侯　杰 综述，管世鹤 审校

(安徽医科大学第二附属医院检验科，合肥 230001)



·综述·

维生素D与乙型肝炎关系研究进展*

侯杰 综述，管世鹤△审校

(安徽医科大学第二附属医院检验科，合肥 230001)

维生素D；乙型肝炎；维生素D受体

维生素 D(VD)是人体的一种必需维生素，主要是通过日晒合成或食物摄入，合成的VD3需要和VD转运蛋白或清蛋白结合后，运输至肝脏和肾脏进行羟化并形成具有生物活性的VD [1,25(OH)2D3]。另外，由肝脏中合成的25(OH)D是人体血液循环中VD主要代谢产物，也是监测体内VD状态最稳定的指标[1]。既往研究表明，VD在体内主要发挥调节钙、磷代谢与维持骨骼稳态的作用，而VD不足则可引发一系列骨质疾病。最新研究发现，慢性肝脏疾病中不仅普遍存在VD不足的现象，而且VD受体(VDR) 表达模式与慢性肝脏疾病的发生、发展密切相关。本文就VD及其受体与乙型肝炎病毒(HBV)感染相关的最新研究进展作如下综述。

1　VD的简介

1.1VD的获得VD为固醇类衍生物，属脂溶性维生素，具有抗佝偻病功能，所以又称为抗佝偻病维生素。VD种类很多，其中以麦角钙化醇(VD2)和胆钙化醇(VD3)较为重要。VD2主要在植物中合成，在酵母、覃类、麦角等含量较多。VD3在海鱼、鱼肝油、动物肝脏等含量较多[2]。人体中VD主要由紫外线照射皮肤合成，皮肤中7脱氢胆固醇经紫外线(波长290～315 nm)照射后可转化为VD3前体，再迅速经过热异构反应后生成VD3，另外，体内仅有很少一部分的VD是通过食物获得的[3]。

1.2VD的生化代谢和生理作用食物中的VD通过胆汁酸循环过程一起吸收至肠腔内，再经肠上皮细胞吸收后通过淋巴循环转运至血液中。食物摄入和皮肤合成的VD3经过肝脏羟化作用变成为25(OH)D3，是VD的前体，经过肾细胞再羟化成为1,25(OH)2D3(也称为骨化三醇)，随血液循环到全身细胞，发挥激素作用[4]。VD可以促进钙和磷在肠道的吸收，以及肾小管对钙和磷的重吸收，提高钙、磷在血液中水平，与甲状旁腺激素及降钙素等激素具有协同作用，共同维持体内钙、磷水平稳定。另有研究表明，VD在体内主要是通过与分布在细胞内的VDR结合而发挥免疫学功能的[5]。

2　VDR基因表达与乙型肝炎的关系

2.1VDR及其基因简介VDR为亲核蛋白，是介导1,25(OH)2D发挥生物效应的核内生物大分子，属于类固醇激素/甲状腺激素受体超家族成员。VD的许多生物学功能都是通过VDR介导调节靶基因转录来实现的，1,25(OH)2D 激素信号分子在靶细胞与VDR结合形成激素-受体复合物，该复合物作用于靶基因上的特定DNA序列，进而调节结构基因的表达[6]。早在1980年，VDR就在免疫细胞中发现，后来逐渐发现VDR遍布于心、脑、肾脏、肝脏、皮肤以及各种免疫细胞中[7]。目前关于VDR基因多态性研究已经有很多，发现了4个主要的多态性位点，分别为VDR-ApaⅠ(A/a,rs7975232)、VDR-TaqⅠ(T/t,rs731236)、VDR-FokⅠ(F/f,rs2228570/rs1073810)和VDR-BsmⅠ(B/b,rs1544410)[8]。

2.2VDR基因多态性与乙型肝炎的关系VDR介导活性VD发挥生物学效应，两者结合后可抑制1型辅助型T细胞(Th1)的增殖以及干扰素的分泌[9]，而机体主要是以Th1细胞介导的细胞免疫来清除HBV，因此，VDR基因的表达不同可能与HBV的感染具有很大的相关性。李俊红等[10]通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别对募集的无症状HBV携带组和慢性乙型肝炎组患者做VDR基因TaqⅠ和FokⅠ进行基因分型测定，结果显示携带含有FokⅠFF基因型在慢性乙型肝炎组的频率显著高于携带组，经Logistic回归分析，调整复杂条件后，两组间FF基因型频率的差异仍具有统计学意义(OR=1.95,P<0.05)，FokⅠ和TaqⅠ组成的FT基因型在慢性乙肝组的频率也明显偏高(OR=1.45,P<0.05)，提示了VDR基因的表达不同很可能与HBV的易感性相关。国外学者Suneetha等[11]运用荧光素酶分析慢性乙肝患者VDR基因结构，发现ApaⅠ和TaqⅠ的基因型与HBV的易感性以及感染后的高病毒载量、发展成肝癌具有重大的联系。伊朗学者Arababadi等[12]获取3 700例志愿者的标本，并从中选取了352例隐匿性肝炎患者标本，运用PCR技术分析发现位于9号染色体外显子上的基因位点，即TaqⅠ与隐匿性肝炎具有一定的联系。结合国内外学者近年来的研究，可以推测VDR基因的多态性与乙型肝炎的发生、发展以及结局相关联[13-14]，但是目前国内还未发现其具体机制以及关联的准确性，因此，上述结论还需大量实验加以证实。

3　VD缺乏与乙型肝炎的关系

近些年来，越来越多的国内外学者发现在各种肝脏疾病中普遍存在着VD的缺乏，Wong等[15]学者从1997年到2000年登记的426例慢性乙肝患者，经过长期随访检测他们血清25(OH)D3的水平以及HBV DNA载量水平，结果显示82%的患者表现出 25(OH)D3的水平偏低(<32 ng/mL)，并且低血清25(OH)D3水平的患者更易病情恶化，发展为肝硬化，肝癌，甚至死亡。Farnik等[16]对203例慢性乙肝患者研究发现，血清25(OH)D3严重缺乏(<10 ng/mL)、中等缺乏(10～<20 ng/mL)、水平正常(≥20 ng/mL)分别占 34%、47%、19%，并且通过多因素分析，慢性乙肝患者体内血清25(OH)D3水平与其HBV DNA载量呈负相关关系，并且HBV DNA 载量与血清25(OH)D3水平呈现相反的季节性变化。另外，国外学者Stokes等[17]和Putz-Bankuti等[18]对慢性肝硬化和肝衰竭患者体内VD水平进行研究发现，VD在慢性肝炎发展过程中可能是一个重要因素，血清内低水平的VD可预示着肝组织的损伤程度高，病情发展快且预后效果差等情况，进而提高了患者的病死率，因此维持患者体内一定的VD水平，可有效缓解病程的发展。此外，研究表明，由多种不同原因引起的慢性肝脏疾病普遍存在VD的缺乏，如酒精性肝炎(ALD)[19]、自身免疫性肝病(AIH)[20]、慢性丙型肝炎(CHC)[21]、肝细胞癌(HCC)[22]等。

4　VD对乙型肝炎治疗的影响

据研究表明，VD具有调节免疫反应的功能，能减少CD4+T细胞的增殖、分化以及其细胞因子的分泌[23]，促进抗炎因子IL-4、IL-5的分泌，同时提高调节性T细胞的活性，刺激细胞免疫，参与机体的免疫调节。Hu等[24]学者用雌性BALB/C小鼠构建了急性肝炎的动物模型，结果发现1,25(OH)2D3可以调节免疫系统应答，显著减少肝细胞的损伤，同时上调VDR的基因表达。目前对于慢性乙肝临床上的治疗还是依赖于干扰素，但患者对IFN-γ的病毒学应答效果并不理想，对此国内外进行大量的实验研究。Lange等[25]学者研究发现，VDR可能与Jak-STAT信号转导途径具有某种相互关系，同时发现运用骨化三醇可以明显增加慢性肝炎患者对IFN-γ的免疫应答，进而为改善临床上干扰素治疗低疗效的现状提供了新的思路和方向。但就目前研究来说，关于VD与慢性肝炎的关系研究还是较少，很多研究报道的结论有差异之处，这可能与样本量、性别、年龄、检测方法差异有关，因此，VD与慢性肝炎的发生、发展以及预后的关系还需要更多的实验来验证。

5　小结与展望

近年来，国内外对VD的研究发展非常迅速，VD除了能调节钙、磷代谢外，还被认为是一种新的免疫调节激素，具有调节免疫反应的功能。HBV感染依旧是世界卫生健康的一大难题，严重危害人类的健康和生命。VDR基因多态性揭示可能与HBV感染有关，同时VD与乙型肝炎患者的治疗相关，但目前对VD和VDR系统的研究还尚未健全，VD的缺乏对慢性肝炎的影响机制以及其与VDR系统对肝脏疾病的作用机制均未明确，对于补充VD来控制乙型肝炎患者病情发展，同时避免高钙血症的发生还有待进一步的探索。因此，VD为HBV感染者治疗提供的新思路和方法还需更多的前瞻性研究。

[1]Heaney RP.Vitamin D-baseline status and effective does[J].N Engl J Med,2012,367(1):77-78.

[2]杨春华．VD简介[J]．中国实用医学，2009，4(3)：243-244．

[3]Kitson MT,Roberts SK.D-livering the message:the importance of vitamin D status in chronic liver disease[J].J Hepatol,2012,57(4):897-909.

[4]Lips P.Relative value of 25(OH)D and 1,25(OH)2D measurements[J].J Bone Miner Res,2007,22(11):1668-1671.

[5]Haussler MR,Whitfield GK,Haussler CA,et al.The nuclear vitamin D receptor:biological and molecular regulatory properties revealed[J].J Bone Miner Res,1998,13(3):325-349.

[6]李俊红，李洪权，李卓，等.维生素D受体基因TaqⅠ、FokⅠ单核苷酸多态与HBV感染结局关联探讨[J].中华医学杂志,2006,86(28):1952-1956.

[7]Ramagopalan SV,Heger A,Berlanga AJ,et al.A ChIP-seq defined genome-wide map of vitamin D receptor binding:associations with disease and evolution[J].Genome Res,2010,20(10):1352-1360.

[8]Huang YW,Liao YT,Chen W,et al.Vitamin D receptor gene polymorphisms and distinct clinical phenotypes of hepatitis B carriers in Taiwan[J].Genes Immun,2010,11(1):87-93.

[9]Margher ita T.Cantor na and Amanda Waddell.The Vitamin D receptor turns off chronically activated T cells [J].Ann N Y Acad Sci,2014,1317:70-75.

[10]李俊红，陈冬梅，李卓，等.维生素D受体基因多态性与乙型肝炎病毒感染的关联研究[J].中华医学遗传学杂志，2006,23(4):402-405.

[11]Suneetha PV,Sarin SK,Goyal A,et al.Association between vitamin D receptor,CCR5,TNF-alpha and TNF-beta gene polymorphisms and HBV infection and severity of liver disease[J].J Hepatol,2006,44(5):856-863.

[12]Arababadi MK,Pourfathollah AA.Association of exon 9 but not intron 8 VDR polymorphisms with occult HBV infection in south-eastern Iranian patients[J].J Gastroenterol Hepatol,2010,25(1):90-93.

[13]Yao X,Zeng H,Zhang G,et al.The associated ion between the VDR gene polymorphisms and susceptibility to hepatocellular carcinoma and the clinicopathological features in subjects infected with HBV[J].Biomed Res Int,2013，2013:953-974.

[14]Karatayli SC,Ulger ZE,Ergul AA,et al.Tumour necrosis factor-alpha,interleukin-10,interferon-gamma and vitamin D receptor gene polymorphisms in patients with chronic hepatitis delta[J].J Viral Hepat,2014,21(4):297-304.

[15]Wong GL,Chan HL,Chan HY,et al.Adverse effects of vitamin D deficiency on outcomes of patients with chronic hepatitis B[J].Clin Gastroenterol Hepatol,2015,13(4):783-790.

[16]Farnik H,Bojunga J,Berger A,et al.Low vitamin D serum concentration is associated with high levels of hepatitis B virus replication in chronically infected patients[J].Hepatology,2013,58(4):1270-1276.

[17]Stokes CS,Krawczyk M,Reichel C,et al.Vitamin D deficiency is associated with mortality in patients with advanced liver cirrhosis[J].Eur J Clin Invest,2014,44(2):176-183.

[18]Putz-Bankuti C,Pilz S,Stojakovic T,et al.Association of 25-hydroxyvitamin D levels with liver dysfunction and mortality in chronic liver disease[J].Liver Int,2012,32(5):845-851.

[19]Trépo E,Ouziel R,Pradat P,et al.Marked 25-hydroxyvitamin D deficiency is associated with poor prognosis in patients with alcoholic liver disease[J].J Hepatol,2013,59(2):344-350.

[20]Agmon-Levin N,Theodor E,Segal RM.Itamin D in systemic and Organ-Specific autoimmune diseases[J].Clin Rev Allergy Immunol,2013,45(2):256-266.

[21]Gentile I,Scarano F,Celotti A,et al.Low vitamin D levels are associated with the presence of serum cryoglobulins in patients with chronic HCV infection[J].In Vivo,2015,29(3):399-404.

[22]Chiang KC,Yeh CN,Chen MF,et al.Hepatocellular carcinoma and vitamin D:a review[J].J Gastroenterol Hepatol,2011,26(11):1597-1603.

[23]Konijeti GG,Arora P,Boylan MR,et al.Vitamin D supplementation modulates T Cell-Mediated immunity in humans:results from a randomized control trial[J].J Clin Endocrinol Metab,2016,101(2):533-538.

[24]Hu XD,Jiang SL,Liu CH,et al.Preventive effects of 1,25-(OH)2VD3against ConA-induced mouse hepatitis through promoting vitamin D receptor gene expression[J].Acta Pharmacol Sin,2010,31(6):703-708.

[25]Lange CM,Gouttenoire J,Duong FH,et al.Vitamin D receptor and Jak-STAT signaling crosstalk results in calcitriol-mediated increase of hepatocellular response to IFN-α[J].J Immunol,2014,192(12):6037-6044.

2016-02-24修回日期：2016-05-13)

国家自然科学基金资助项目(81171662)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.032

A

1673-4130(2016)15-2134-03