吴慧静

・临床医学・

CCL-18在慢性阻塞性肺疾病中的表达

吴慧静

目的 比较分析趋化因子配体-18(CCL-18)在急性加重期慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者治疗前后的表达水平变化情况,为患者病情严重程度和临床疗效评价提供依据。方法 急性加重期慢阻肺住院病例80例为A组,稳定期慢阻肺病例80例为B组,健康对照60例为C组,A组患者于入院后24 h,治疗后3、6、9和12 d取血样检测；B组患者于病情稳定后24 h取血样检测；C组于体检时取血样,采用酶联免疫吸附法测定CCL-18和白细胞介素-6(IL-6)值。结果 A组入院后24 h,A组CCL-18和IL-6显著高于B、C组(P＜0.01),B组显著高于C组(P＜0.01)。随着治疗的进行,A组患者CCL-18和FEV1%预计值逐渐下降,以CCL-18为自变量,以FEV1%预计值为因变量进行一元回归分析,证实两种变量间存在负相关：r=-0.991,Y=126.599-9.714X(P＜0.01)。结论 CCL-18在慢阻肺患者中呈高表达,随着患者病情的加重,CCL-18表达增高,且其表达与患者肺功能呈负相关性。

趋化因子配体-18；慢性阻塞性肺疾病；基因表达

慢性阻塞性肺疾病在临床比较多见,尤其我国老龄化越来越严重,其发生率和死亡率也不断增加。慢阻肺的发病机制多与有害气体或颗粒造成的肺部异常炎症反应有关,已有研究证实吸烟是慢阻肺发病的主要危险因素［1］。CCL-18其mRNA在人体肺脏等一些器官组织中呈现着持续高表达的特征［2］。已有报道表明CCL-18参与了过敏性哮喘、乳腺癌、卵巢上皮癌等疾病的发病过程［3,4］。我国临床对慢阻肺患者肺部CCL-18表达的研究样本比较有限,还需要更多的研究探寻该趋化因子在肺部疾病发生与发展过程中的作用,为临床治疗提供新的思路。本研究比较分析了CCL-18在急性加重期慢阻肺患者治疗前后的表达水平变化情况,希望为患者病情严重程度和临床疗效评价提供依据,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2014年1～12月间急性加重期慢阻肺住院病例80例为A组：男52例,女28例；年龄56～78岁,平均年龄(64.8±7.2)岁；病程5～20年,平均病程(12.8±3.2)年；吸烟史58例。选取同期稳定期慢阻肺病例80例为B组：男50例,女30例；年龄55～76岁,平均年龄(65.2±7.5)岁；病程4～21年,平均病程(12.3±4.1)年；吸烟史62例。另选取同期院内健康体检健康者60例为C组,男38例,女22例；年龄52～73岁,平均年龄(63.8±8.2)岁。三组研究对象除本文相关疾病外,其他一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 纳入标准 ①慢阻肺诊断及分期标准参照2007修订版《慢性阻塞性肺疾病诊疗规范》［5］； ②急性加重期指短期内喘息、咳嗽、咳痰等症状加重,脓性痰增多,可伴或不伴发热等炎性症状；③稳定期指患者经治疗10～14 d后喘息、咳嗽、咳痰等症状明显减轻,偶发轻微咳嗽,少量痰液；④排除合并有其他类型肺部疾病、肝炎、糖尿病、心血管疾病、严重感染、脏器功能衰竭、恶性肿瘤、血液系统疾病、免疫系统疾病及近期有免疫抑制剂用药患者；⑤临床化验项目均在详细告知患者并获得患者同意后实施。

1.3 方法

1.3.1 取样及样本处理 A组患者于入院后24 h和治疗后3、6、9和12 d取血样检测；B组患者于病情稳定后24 h取血样检测；C组于体检时取血样。均取清晨空腹静脉血3ml,抗凝并于室温中静置1～2 h,送入4℃冰箱保存。实验室离心机处理,3000 r/min,10min,留取上清液置于-80℃冰箱保存待测。

1.3.2 CCL-18检测 采用酶联免疫吸附法,试剂盒由上海蓝基生物科技有限公司提供,操作方法严格参照说明。

1.3.3 IL-6检测 采用酶联免疫吸附法,试剂盒由上海蓝基生物科技有限公司提供,操作方法严格参照说明。

1.3.4 肺功能监测 采用肺功能监测仪进行第一秒用力呼出量(FEV1)的测定,并计算FEV1%预计值。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析；计数资料采用χ2检验；相关性分析采用直线回归分析,以患者CCL-18值为自变量,FEV1%预计值为因变量。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组间CCL-18和IL-6比较 A组入院后24 h,A组CCL-18和IL-6显著高于B、C组(t=19.764、44.172、9.913、15.351,P＜0.01),B组显著高于C组(t=21.166、4.668,P＜0.01)。见表1。

2.2 A组治疗前后CCL-18和FEV1%预计值变化情况 随着治疗的进行,患者CCL-18和FEV1%预计值逐渐下降,以CCL-18为自变量,以FEV1%预计值为因变量进行一元回归分析,证实两种变量间存在回归关系,呈负相关：r=-0.991,Y=126.599-9.714X(P＜0.01)。见表2,图1。

表1 三组CCL-18和IL-6水平比较(±s)

表1 三组CCL-18和IL-6水平比较(±s)

注：三组比较,P＜0.01

组别 例数 CCL-18(ng/ml) IL-6(ng/L) A组 80 8.2±0.8 11.8±1.3 B组 80 5.7±0.8 9.6±1.5 C组 60 3.4±0.3 8.5±1.2F12.473 7.896P＜0.01 ＜0.01

表2 A组患者治疗不同时间点的CCL-18与FEV1%预计值变化水平(±s)

表2 A组患者治疗不同时间点的CCL-18与FEV1%预计值变化水平(±s)

指标 入院后24 h 治疗后3 d 治疗后6 d 治疗后9 d 治疗后12 d CCL-18(ng/ml) 8.2±0.8 7.1±0.5 6.3±0.7 5.9±0.7 5.7±0.8 FEV1%预计值(%) 47.9±9.6 56.6±8.2 63.8±7.3 69.4±7.8 72.8±7.6

图1 CCL-18与FEV1%预计值相关性

3 讨论

慢阻肺以不完全可逆的呼吸道气流受限为主要表现特征,临床上对其发病机制尚不明确,但已有研究证实氧化/抗氧化失衡、气道炎症、异常细胞凋亡、免疫反应、蛋白酶失衡等参与其发病过程［6,7］。气道炎症学说认为,慢阻肺的发病与感染、吸烟、过敏、粉尘颗粒、有毒物质、大气污染等密切相关,是这些因素刺激肺部组织而引发的一类气道慢性炎症反应［8］,其发病过程有多种炎症因子、炎症细胞、趋化因子、细胞因子等参与其中,较为典型的如白细胞介素、中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞等可破坏肺泡和肺组织结构,从而影响肺功能［9］。

趋化因子为一类具有显著的催化作用的可溶性蛋白,分子量小,可广泛参与习惯性炎症反应,可对树突细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、自然杀伤细胞(NK)等起到趋化作用,并参与了淋巴细胞的活化,随淋巴系统迁移［10-12］。另外,趋化因子在血管生成、肿瘤生长与转移、造血等病理生理过程中也起到了一定趋化作用,我国临床已有报道［13］对趋化因子在白血病病例中的表达及意义做出研究。CCL-18最早于1997年在人的胎儿肺内发现,是一种肺部活化调节趋化因子。早期的研究发现,CCL-18在肺内呈现持续的高表达,而在淋巴组织、胸腺、阑尾等组织中则呈低表达。近些年来,我国临床逐渐出现肺部疾病的CCL-18表达的相关研究,刘桂桃等［14］通过动物实验证实了CCL-18参与肺纤维化的发生过程；王健等［15］的临床报道证实了CCL-18在过敏性哮喘急性发作期中的高表达特征。

CCL-18参与慢阻肺及其急性发作的机制在于：CCL-18与特异性受体结合后募集相应炎细胞向气道迁移,造成气道内大量的细胞因子被释放,触发瀑布式级联反应,刺激气道黏液细胞的大量分泌,从而促进气道的高反应性。CCL-18促进了患者气道内炎症细胞的信号转导过程,从而参与和促进了炎症反应的发生。本组研究中,对慢阻肺急性加重期、稳定期及健康人的血清CCL-18及IL-6水平检测结果显示,患者病情程度越重,炎症因子和趋化因子的表达越高,证实了CCL-18在慢阻肺、尤其是急性加重期慢阻肺患者中的高表达,参与了慢阻肺炎症反应的发生机制中。FEV1%预计值反映了肺功能水平,对急性加重期慢阻肺患者治疗不同时点的CCL-18与FEV1%预计值变化的相关性分析结果显示,CCL-18与患者肺功能的变化呈负相关,说明CCL-18的表达对于指导临床诊断、治疗、预后评价及对肺功能的评估具有一定价值。

综上所述,CCL-18在慢阻肺患者中呈高表达,随着患者病情的加重,CCL-18表达增高,且其表达与患者肺功能呈负相关性。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.11.019

2016-03-03］

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