王　拓，付冬梅，钟　科，孙　勇



血液提取物诱导软组织修复再生的研究进展

王拓，付冬梅，钟科，孙勇

血液提取物；软组织；修复；研究进展

目前，种植义齿是口腔临床中牙列缺损的主要修复方式。随着人们审美水平的提高，骨整合不再是权衡种植成功率高的唯一标准。因为软组织缺损直接影响种植义齿的稳定性和美观性，因此，软组织美学成为当今种植领域的研究热点。1984年，Assoian等[1]发现了第1代血液提取物——富血小板血浆(platelet-rich plasma，PRP)，它是自体外周血通过梯度离心得到的血小板凝胶(plateletgel，PG)[2]，富含大量生长因子，能够很好地促进组织再生和修复，从而开启了口腔软组织缺损修复新的理念及路径。后来又出现第2代富血小板纤维蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）、改良型富血小板纤维蛋白（advanced platelet-rich fibrin，APRF）和第3代浓缩生长因子（concentrated growth factors，CGF）等，笔者简要介绍几种血液提取物诱导软组织缺损修复再生的机制及研究进展。

1　PRP

PRP富含高浓度的血小板及少量血浆，当PRP与凝血酶和钙离子混合后，血小板被凝血酶激活后聚集在一起，起到止血的作用，然后由α颗粒释放生长因子[3]。分泌的生长因子包括血小板源性生长因子(PDGF)、表皮样生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、类胰岛素样生长因子(IGF-1)、转化生长因子(TGF-β)、成纤维细胞生长因子(FGF)、骨钙素及纤维蛋白原等[4-5]。研究证实，PRP释放的生长因子约为体内正常浓度的3～8倍[6]。PRP中还含有较多的白细胞，既可以消灭体内的病原体，又可以清除坏死组织，增强机体的免疫力及抗感染能力。PRP的血浆中还包含纤维素、亲玻粘连蛋白及纤粘连蛋白[7]，纤维蛋白提供一个三维结构，将血小板释放的生长因子聚集起来，并将软组织缺损部位粘连在一起，起到止血、消炎的作用，从而促进伤口自然愈合。

2　PRF

继PRP之后，Choukroun等[8]在2000年发现了新一代血液浓缩物——PRF，PRF为第2代血液浓缩制品，虽然PRF与PRP所含成分基本相同，但与PRP相比具有以下优点：制备方法简单快速，不添加异种抗凝剂、凝血酶等化学制剂，避免了交叉感染、免疫排斥及过敏反应的发生；大量血小板介导α-颗粒释放多种生长因子，促进细胞迁移和增殖，有利于损伤组织的愈合。另外，压制成的PRF凝胶结构与人类天然的血凝块相似，不仅具有良好的弹性，还具有纤维蛋白构成的疏松多孔的三维网状结构[9]，损伤发生后，PRF可诱导损伤部位血管活化、上皮封闭损伤组织，体内的葡萄糖胺聚糖既容易被纤维蛋白滞留，又对细胞因子有很强的亲和力，使得血小板释放的细胞因子PDGF、VEGF、TGF-β和TGF s等牢固存储于纤维蛋白网状结构中，并缓慢地呈周期性、节律性地释放，从而减少了生长因子的丢失，并发挥相互协调作用，使得PRF具有更强的促进组织修复再生的能力[10]。但PRP作用时间短暂，只能在植入早期起作用，一般需与骨粉等混合应用[11]。而PRF作为一种自体生物材料，可单独应用于口腔植骨术。

近年来，Ghanaati等[12]又发现了一种新的富血小板纤维蛋白（advanced platelet-rich fibrin，A-PRF），称为改良型富血小板纤维蛋白，它需要特制的离心管，离心速度与PRF也不同。它的组分与PRF基本相同，但各成分的比例可能不同，目前还没有文献报道其促进组织修复再生的临床应用效果，与PRF的差异比较也有待进一步研究。

3　CGF

CGF由Sacco于2006年提出[13]，是继PRF后的新一代血液提取物，与PRF一样，CGF由静脉外周血离心分离制作而成，无需任何抗凝剂及凝血酶等制品，不会引起免疫排斥反应及其他传染病。但需特定的意大利Medifuge离心机、特定离心管及离心速度，通过专门的CGF工具盒制备。与PRF不同的是，CGF中的纤维蛋白及生长因子更多，凝胶块更大、更黏稠，抗张强度更高。CGF促进组织再生修复作用的基础是高浓度的浓缩生长因子及三维网状支架[14]。CGF可与骨移植材料混合，植入损伤处[15]，可加速骨组织及软组织的愈合。当机体受损伤后，血清中的Hagemann因子能将机械损伤转化为可接受的生化信号，渗出的血液和纤维蛋白迅速凝集成血块[16]；大量单核细胞迁移并转化为巨噬细胞，吞噬血块中的细菌及无活力细胞，加强中性粒细胞对机体的防御能力。同时，凝血过程中产生的凝血酶激活血小板α颗粒，释放各种生长因子及免疫调节因子，一方面起到消炎、止痛及修复损伤的作用；另一方面促进损伤组织新生血管化，组织细胞可部分增殖分化为成纤维细胞，合成胶原纤维，有利于创伤的愈合。同时，血小板传递信号，循环血中的各种干细胞、局部上皮细胞及成骨细胞等迁移至缺损区，进行增殖分化，促进组织修复再生及愈合。有研究表明，CGF能明显缩短术区恢复的时间，提高骨组织及软组织愈合质量[17]。

4　血液提取物中生长因子促进软组织损伤愈合的作用机制

生长因子能够促进细胞的增殖及分化、胶原的合成及血管新生，同时抑制破骨细胞的功能，对组织缺损的修复再生起重要作用[18]。另外，纤维蛋白参与凝血过程，并收缩创面，为细胞增殖提供三维空间支架等[19-20]。

当组织损伤时，血管内血液外流，血小板在局部形成血栓并释放PDGF，是最早出现的生长因子。它能促进创伤局部细胞的有丝分裂，刺激血管内皮细胞分裂，促进血管再生及胶原蛋白的合成，从而加速创伤组织的修复再生[21]；它还能刺激成骨细胞增殖，从而促进骨组织再生[22]。TGF-β的作用主要是促进成骨细胞及前成骨细胞的增殖分化，同时抑制破骨细胞的形成[23]。一定浓度的TGF-β可诱导成纤维细胞增殖分化，合成大量胶原蛋白，有利于创伤组织的修复愈合[24]。创伤前期，局部炎症较重，TGF-β含量较少，胶原合成不足，伤口愈合较慢，容易裂开。表皮生长因子能促进纤维组织及基质的合成，且能够激活磷脂酶A，从而促进前列素的合成，前列素能够促进骨吸收和后期骨形成[25]。VEGF的主要作用是促进内皮细胞增殖分化，诱导新生血管的生成，提供丰富的营养物质，改善软组织周围血供，有利于机体新陈代谢，为损伤组织的修复再生创造更好的微环境。其次，还能激活碱性磷酸酶的活性，使局部钙盐沉积，骨折愈合更快。另外，通过改善骨折周围软组织的血供促进软组织修复，间接促进骨折愈合。血小板还可释放IGF1，与PDGF协同诱导表皮和内皮的再生修复[5]，还可促进成纤维细胞及软骨细胞生长，诱导血管内皮细胞聚集到损伤部位，产生更多的新生血管。

5　展望

目前，血液提取物在组织缺损修复中已广泛运用，尤其是PRF和CGF，而且，在医学美容及创面愈合等领域中已取得了很好的成果。虽然已有基础研究及相关的临床观察证实了PRF、APRF、CGF能明显提高口腔软组织缺损修复的愈合率，但是还没有对它们之间促进愈合的效果及相互作用进行系统的基础与临床研究，尚需要进一步的深入探讨，以便在临床工作中为各种血液提取物在软组织缺损中的应用提供理论依据，从而更好地指导种植手术中软组织缺损修复材料的选择。

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R 274.3

A

1004-0188（2016）03-0334-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.03.042

全军“十二五”科研面上课题（CWS11J024）

646000四川泸州，四川医科大学口腔医学院（王拓，付冬梅）；成都军区机关医院口腔科(王拓，付冬梅，钟科，孙勇)

孙勇，电话:028-86687041

（2015-11-30）