赵峥嵘，孔　丹，刘彦明

(1.河南农业职业学院，河南 郑州 451450；　2.信阳师范学院 化学化工学院，河南 信阳 464000)

流动注射化学发光检测盐酸异丙嗪

赵峥嵘1，孔丹1，刘彦明2

(1.河南农业职业学院，河南 郑州 451450；2.信阳师范学院 化学化工学院，河南 信阳 464000)

摘要：在碱性介质中，盐酸异丙嗪对luminol-KMnO4发光体系有显著的增强作用.基于此增强作用，建立了一种FI-CL检测盐酸异丙嗪的新方法.在最优化的实验条件下，盐酸异丙嗪的ΔICL强度与其浓度在7.0 × 10-9~ 9.0 × 10-7mol/L浓度范围内有较好的线性关系.线性方程为ΔICL= 35.19 + 1.19 × 10-10c，相关系数r = 0.998 4，检出限为4.9 × 10-9mol/L.对7.0 × 10-9mol/L的盐酸氯丙嗪标准溶液进行11次平行测定，其RSD为2.4%.盐酸异丙嗪加标回收率在89.1%~96.1%之间.

关键词：流动注射；化学发光；盐酸异丙嗪

盐酸异丙嗪是一种镇静、抗过敏类药物，主要具有强化麻醉以及使动物安静等功能，可以用于治疗动物变态反应性疾病，如荨麻疹、血清病等，也可用于防治动物疾病和促进长膘，提高饲料中营养物质的利用率，但是过量的使用会导致该药品在动物组织中产生残留.因而，寻求一种简便快捷的检验、提纯盐酸氯丙嗪的方法，对中毒个体进行临床诊断并实施急救是至关重要的.中国药典曾记载用紫外分光光度法测定其含量[1-2]，此外还有荧光光度法[3-4]、原子吸收分光光度法[5]、化学发光法[6-7]以及某些可见分光光度法，如钯与盐酸异丙嗪络合物法[8]、高碘酸钾氧化显色法[9]、2-碘酰苯甲酸盐比色法[10]、氯胺-T分光光度法[1]等.与上述检测方法相比，化学发光检测法具有线性范围宽、灵敏度高、仪器设备简单等优点.同时流动注射技术因具有分析时间短、重现性好、耗样量少等多种优点，被广泛的应用于蛋白质、氨基酸等多种生命活性物质的检测以及金属离子、有机化合物等的分析测定.而将流动注射分析法与化学发光分析法联合应用形成的流动注射化学发光分析法既保留了一般化学发光分析法的优点，同时还具备流动注射的优点，从而得到了国内外许多分析化学家的重视，并且越来越多的被用于对吩噻嗪类药物的分析测定.

本文作者利用luminol-KMnO4发光体系在碱性介质中可以产生化学发光，并且盐酸异丙嗪对上述体系化学发光信号有强烈的增敏作用，提出了一种快速灵敏的检测盐酸异丙嗪的新方法.在实验过程中，对该发光体系的发光条件进行了一系列的检测并对流动注射运行参数进行了优化.在此基础上，对盐酸异丙嗪试剂进行加标回收，效果令人满意.

1实验部分

1.1　仪器和试剂

IFFM-E型FI-CL分析仪(西安瑞迈分析仪器有限公司)；聚四氟乙烯管(内径0.8 mm).

盐酸异丙嗪注射液购于当地药店；鲁米诺购于陕西师范大学；所用其他试剂均为分析纯.实验所需溶液均采用18.2 MΩ·cm超纯水中(台湾艾柯-成都康宁实验专用纯水设备厂)配制.0.01 mol/L鲁米诺储备液用0.1 mol/L NaOH稀释.储备液均保存于4 ℃的冰箱中.实验中所需各种试剂均为每日新配.

1.2　实验方法

根据盐酸异丙嗪对luminol-KMnO4体系有很强的增敏作用，设计了如图1所示的发光反应流路图.

按图1所示安装好管道，启动仪器，在设定的工作参数下预热和走基线，待基线稳定后，注入待测溶液进行化学发光强度测定，以相对峰高定量.用水作空白实验，将其发光强度减去样品测定时的发光强度得到相对发光强度ΔI，并据此绘制标准曲线，然后在同等条件下用同样方式测定实际样品盐酸异丙嗪注射液中盐酸异丙嗪的含量.

a-Hb样品/空白样品溶液；b-水；c-鲁米诺溶液；d-KMnO4溶液；P1，P2-蠕动泵；S-六通阀进样器；Y1，Y2-混合器；F-流通池；W-废液；PMT-光电倍增管；NHV-负高压；PC-计算机.图1　FI-CL实验流路图Fig.1　Scheme of FI-CL system

2结果与讨论

为了获得高的化学发光强度和检测灵敏度，我们对影响化学发光的检测条件(NaOH、luminol、KMnO4浓度)和运行参数进行了详细优化.

2.1　反应体系优化

2.1.1缓冲溶液的影响

预实验表明，当luminol储备液用超纯水配制时，luminol-KMnO4体系的发光信号较弱.为了增强发光信号强度，需将luminol用缓冲介质配制.分别考察了Na2CO3、PBS、NaHCO3、NaOH、Na2B4O7·10H2O和Na2HPO4·12H2O等几种缓冲介质对luminol-KMnO4体系发光信号的影响.结果表明，将luminol储备液用NaOH缓冲溶液稀释时，获取发光信号最强.

以NaOH溶液为缓冲溶液，考察了在0.15～0.4 mol/L浓度范围内，NaOH对发光信号的影响.结果表明，在0.15～0.3 mol/L浓度范围内，体系产生的发光信号随NaOH浓度的增大而增强；在0.3 mol/L时产生的发光信号最强；其后，在0.3～0.4 mol/L浓度范围内，体系产生的发光信号随NaOH浓度增大而减弱(图2).所以，以下实验均将luminol储备液配置在0.3 mol/L NaOH介质中.

图2　 NaOH浓度对ΔICL的影响Fig.2　Effect of NaOH concentration on ΔICL

2.1.2Luminol浓度的影响

测试了浓度在1.0 × 10-6～8 × 10-5mol/L范围内luminol对发光信号的影响.如图3所示，在1.0 × 10-6～3.0 × 10-5mol/L范围内，随着luminol浓度增加ΔICL增大，3.0 × 10-5mol/L时发光强度达到最大值，之后在3.0 × 10-5～8 × 10-5mol/L范围内ΔICL随luminol浓度的增加而减小.因此，本实验选取浓度为3.0 × 10-5mol/L luminol进行实验.

图3　luminol浓度对ΔICL的影响Fig.3　Effect of luminol concentration on ΔICL

2.1.3KMnO4浓度的影响

考察了KMnO4浓度(1.0 × 10-6～6.0 × 10-5mol/L)对ΔICL的影响.如图4所示，在1.0 × 10-6～1.0 × 10-5mol/L范围内，随着KMnO4浓度的增加ΔICL增大，之后在1.0 × 10-5～4.0 × 10-5mol/L范围内，ΔICL随KMnO4浓度的增加逐渐减小.因此，本实验选取KMnO4浓度为1.0 × 10-5mol/L.

图4　KMnO4浓度对ΔICL的影响Fig.4　Effect of KMnO4 concentration on ΔICL

2.2FI-CL流路参数优化

为了获得较高的发光强度和检测灵敏度，对流动注射运行参数进行了优化.优化结果见表1.

表1　运行参数优化及结果Table 1　Effect of run parameters of FI-CL systemand the optimum values

2.3　线性范围、检出限和重现性

在上述优化的实验条件下，盐酸异丙嗪的ΔICL强度与其浓度在7.0 × 10-9~ 9.0 × 10-7mol/L浓度范围内有较好的线性关系，线性方程为ΔICL= 35.19 + 1.19 × 10-10c，相关系数r= 0.998 41，检出限为4.9 × 10-9mol/L.对7.0 × 10-9mol/L 的盐酸氯丙嗪标准溶液进行11次平行测定，其RSD为2.4%.

2.4　干扰实验

当盐酸异丙嗪的浓度为1.0 × 10-8mol/L时，考察了样品中可能的共存物对盐酸氯丙嗪测定结果的影响.实验结果表明(见表2)，本实验提出的新方法可用于实际样品的测定.

2.5　实际样品分析

对盐酸异丙嗪注射液(购于当地中心医院)取样分析.并在3个不同浓度下对实际样品进行加标回收测试，结果见表3.结果表明，盐酸异丙嗪的加标回收率在89.1%～96.1%之间，RSD为4.2%.

表2　干扰试验Table 2　Tolerable concentration ratios ofsome interfering species

表3　盐酸异丙嗪注射液中盐酸异丙嗪含量测试及加标回收实验Table 3　Detection of Promethazine Hydrochloride Injectionpromethazine in content and standard recovery test

3结论

利用盐酸异丙嗪对luminol-KMnO4发光体系有显著的增强作用(图5)建立了一种流动注射化学发光检测盐酸异丙嗪的新方法.盐酸异丙嗪加标回收率在89.1%～96.1%之间.该方法体系简单、测定迅速、灵敏度高、选择性好，可以用于盐酸异丙嗪的分析检测.

反应条件：cluminol=3.0 × 10-5 mol/L; cKMnO4=1.0 × 10-5 mol/L; cNaOH=0.3 mol/L.图5　盐酸异丙嗪对luminol-KMnO4 发光体系的增强作用Fig.5　Promethazine hydrochloride on the luminescence of luminol-KMnO4 system

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[10] Editorial Committee of the Pharmacopoeia of People’s Republic of China.The pharmacopoeia of People’s Republic of China (Part Ⅱ) [M].Beijing:Chemical Imdustry Press,1995.

[责任编辑：任铁钢]

Detection of promethazine hydrochloride by flow-injection

chemiluminescence

ZHAO Zhengrong1,KONG Dan1,LIU Yanming2

(1.HenanVocationalCollegeofAgriculture,Zhengzhou451450,Henan,China;

2.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,XinyangNormalUniversity,Xinyang464000,Henan,China)

Abstract:The main purpose of this study was to develop an inexpensive,rapid,simple and sensitive CL method for the determination of promethazine hydrochloride using a FI system.Promethazine hydrochloride was found the remarkable enhancement function to the luminol-KMnO4system in NaOH solution.Based on this,we have established one new method.Parameters affecting the reproducibility and CL detection were optimized systematically.Under the optimized experimental condition.The relative standard deviation (RSD) was found to be 2.4% for 11 replicate determinations of 7.0 × 10-9mol/L promethazine hydrochloride.This proposed method has been satisfactorily applied for the determination of promethazine hydrochloride in real samples with recoveries in the range of 89.1% to 96.1%.

Keywords:flow-injection; chemiluminescence; promethazine hydrochloride

作者简介：赵峥嵘(1979-)，女，讲师，研究方向为分析化学和应用化学.E-mail:zzrgyl@163.com.

基金项目：河南省高等学校重点科研项目(15B150005).

收稿日期：2014-09-04.

中图分类号：O657.3

文献标志码：A

文章编号：1008-1011(2015)02-0175-04