李勇，李莉，祁春梅，刁军，武维恒，冯建启

临床研究

急性ST段抬高型心肌梗死患者血清结缔组织生长因子表达的研究

李勇，李莉，祁春梅，刁军，武维恒，冯建启

目的：检测急性ST段抬高型心肌梗死患者血清中结缔组织生长因子（CTGF）表达的变化及其与肌酸激酶同工酶（CK-MB）酶活性峰值的相关性。

方法：选择2013-07至2014-06入院的急性ST段抬高型心肌梗死患者（心肌梗死组）及不稳定性心绞痛患者（心绞痛组）各50例。酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测ST段抬高型心肌梗死组发病1、2、7、14天及心绞痛组入院后24 h内血清CTGF蛋白浓度，免疫抑制法检测心肌梗死组患者CK-MB酶活性峰值。

结果：心绞痛组血清CTGF蛋白浓度为（10.34±2.00）ng/ml；心肌梗死组患者入院后1、2、7、14天血清CTGF蛋白浓度分别为（16.76±3.17）ng/ml、（29.87±4.90）ng/ml、（45.02±8.35）ng/ml、（31.61±4.40）ng/ml；心肌梗死组患者发病后各时间段血清CTGF蛋白浓度较心绞痛组患者高，且差异有统计学意义（P＜0.01）；心肌梗死组患者发病后血清CTGF蛋白浓度1～7天逐渐升高，后逐渐下降，差异有统计学意义（P＜0.01）；7天时血清CTGF蛋白浓度与CK-MB酶活性峰值呈正相关关系（r=0.859，P=0.000）。

结论：本研究中急性ST段抬高型心肌梗死患者CTGF表达上调，可能与心肌梗死后心肌纤维化相关；CTGF浓度与心肌梗死面积存在相关性，对于预测心肌梗死面积有一定的临床意义。

结缔组织生长因子；心肌梗死

Methods: Our research included 2 groups of patients: STEMI group and unstable angina (UA) group. All patients were treated in our hospital from 2013-07 to 2014-06, n=50 in each group. In STEMI group, the serum levels of CTGF were examined by ELISA at 24h, 2, 7, 14 days of onset, and in UA group, CTGF level was examined at 24h of onset. The CK-MB activity levels were measured in STEMI group at the same time points by immunosuppression method.

Results: The serum level of CTGF in UA patients at 24 h of onset was (10.34 ± 2.00) ng/mL, and in STEMI patients were (16.76 ± 3.17) ng/mL at 24h, (29.87 ± 4.90) ng/mL at 2d, (45.02 ± 8.35) ng/mL at 7d and (31.61 ± 4.40) at 14d. The CTGF levels in STEMI group at different time points were all higher than UA group at 24h of onset, P＜0.01. In STEMI group, the CTGF levels were increasing from 24h to 7d, then decreasing at 14d, all P＜0.01. In STEMI group, the highest protein concentration of CTGF was positively related to the maximal activity of CK-MB at 7 days of onset (r=0.859, P=0.000).

Conclusion: CTGF expression has been up-regulated in STEMI patients which might be related to myocardial fibrosis. The protein level of CTGF is related to MI size, it shows certain predictive value in relevant patients.

(Chinese Circulation Journal, 2015,30:540.)

结缔组织生长因子（CTGF）由Bradham等[1]最先于1991年从人脐静脉内皮细胞互补 DNA（cDNA）文库中克隆得到的。CTGF具有多样的生物学活性，目前认为其可以促进细胞增殖、细胞外基质沉积及细胞表型转化，介导细胞黏附，刺激细胞迁移，诱导细胞凋亡，促进血管形成等[2-4]。与心血管病相关的方面，CTGF可以促进动脉粥样斑块的形成，参与心肌梗死时的炎症反应[5]，介导高血压病时左心室心肌肥厚[6]，促进慢性心力衰竭时心肌纤维化[7]。本研究测定不稳定性心绞痛及心肌梗死患者发病后不同时间段CTGF水平的变化，并研究CTGF水平与肌酸激酶同工酶（CK-MB）酶活性峰值的相关性，探讨了CTGF水平在心肌梗死后心肌纤维化中的意义及与心肌梗死范围的相关性。

1 资料与方法

对象：选择2013-07至2014-06因初次急性ST段抬高型心肌梗死住我院治疗且无直接经皮冠状动脉介入治疗（PCI）及溶栓指征的患者50例（心肌梗死组）。排除标准：既往严重瓣膜病、心肌病，严重慢性心功能不全以及持续性心房颤动者。50例患者中大范围心肌梗死16例（包括急性广泛前壁心肌梗死13例，下壁合并右心室心肌梗死2例，下壁合并正后壁心肌梗死1例）；中等范围心肌梗死18例（均为前壁心肌梗死）；小范围心肌梗死16例（包括前间壁心肌梗死11例，下壁心肌梗死3例，局限前壁心肌梗死2例）。患者入院后均按指南接受常规强化药物治疗及择期PCI。50例患者胸痛发作至梗死相关动脉（IRA）首次球囊扩张时间为（278.3±43.2）h。同时收集因不稳定性心绞痛住院患者50例（心绞痛组），排除标准：既往严重瓣膜病、心肌病、严重慢性心功能不全、持续性心房颤动、结缔组织病、各种慢性炎症性疾病等。患者入院后均按指南接受药物治疗或择期PCI。

标本采集：心肌梗死组分别在发病1、2、7、14天抽取肘静脉血5 ml，检测CTGF蛋白浓度。心绞痛组于入院时抽取肘静脉血5 ml，检测血清CTGF蛋白浓度。心肌梗死组入院后每2 h抽取肘静脉血5 ml，检测CK-MB酶活性，获取CK-MB酶活性峰值。

实验室测定方法： （1）血清CTGF蛋白浓度测定：将一定量样本（＜3个月）行预研究确定最佳稀释比例。然后统一用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清CTGF蛋白浓度。ELISA试剂盒购于美国PeproTech公司，操作均严格按照说明书进行，质量控制和定标结果均在要求范围内。（2）CK-MB酶活性水平测定：采用免疫抑制法，使用罗氏全自动生化分析仪检测血清CK-MB酶活性水平，参考值0～25 U/L，试剂购自罗氏公司。

2 结果

心绞痛组及心肌梗死组患者基线资料比较（表1）：两组患者在年龄、性别、合并症及血肌酐水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1 两组患者一般临床资料比较

表1 两组患者一般临床资料比较

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血清CTGF蛋白浓度检测结果:心绞痛组CTGF蛋白浓度为（10.34±2.00）ng/ml，心肌梗死组CTGF蛋白浓度发病1天（16. 76±3.17）ng/ml、2天（29.87±4.90）ng/ml、7天（45.02±8.35）ng/ml、14天（31.61±4.40）ng/ml，与心绞痛组比较，心肌梗死组发病1、2、7、14天CTGF蛋白浓度均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。与心肌梗死组发病1天比较，心肌梗死组CTGF蛋白浓度发病2、7、14天明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01），且发病7天较发病2天CTGF蛋白浓度明显升高，发病14天较发病7天CTGF蛋白浓度下降，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

血清CTGF蛋白浓度与CK-MB酶活性峰值相关性:CK-MB酶活性峰值为（187.10±57.43）U/L。心肌梗死组不同时间段血清CTGF蛋白浓度与CK-MB酶活性峰值Pearson相关性检验提示：发病1天（r=-0.071，P=0.625）、2天（r=-0.103，P=0.477）、14天（r=0.227，P=0.113 ）时血清CTGF蛋白浓度与CK-MB酶活性峰值相关性不佳，发病7天（r=0.859，P=0.000） 时血清CTGF蛋白浓度与CK-MB酶活性峰值呈正相关关系。

3 讨论

CTGF是一种C端富含半胱氨酸的分泌多肽，含349个氨基酸，相对分子量为38 000，属于高度保守的CCN（CTGF、Cef10/cyr61和Nov的缩写）多肽家族中的成员[8]。广泛存在于多种组织器官中，如心、脑、肾、肺、肝、胎盘、胰腺和结缔组织等。生理情况下，机体多种组织及细胞可有基础量CTGF分泌；病理情况下，它与皮肤瘢痕、动脉粥样硬化、器官纤维化、创伤修复等疾病密切相关[9]。有研究表明，CTGF与心肌纤维化有密切关系，而心肌纤维化在心肌梗死后的心肌重构中起重要作用[10]。

有文献报道血清CTGF蛋白浓度和肾功能有关[11]，本试验中，两组患者肌酐差异无统计学意义。心肌梗死组发病1天血清中CTGF蛋白浓度与心绞痛组比较差异有统计学意义（P＜0.01），且明显升高，表明心肌梗死后引发的炎症反应促使局部心肌组织立即释放大量包括CTGF在内的多种炎症介质及细胞因子[12，13]。心肌梗死组发病1 、2、7天血清CTGF蛋白浓度差异有统计学意义（P＜0.01），且逐渐升高，发病14天较7天CTGF水平下降，差异有统计学意义（P＜0.01），但发病14天CTGF水平仍较心绞痛组高，且差异有统计学意义（P＜0.01），说明心肌梗死后诱发CTGF的高表达从心肌梗死后持续到心肌梗死后较晚的重构阶段。CTGF参与组织损伤后的修复过程，同时CTGF又可以促进心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，CTGF 能刺激成纤维细胞增殖。CTGF能诱导心脏成纤维细胞分泌表达胶原和纤黏蛋白，并能增加心肌梗死部位胶原和纤黏蛋白的表达量[14]。CTGF的此种作用导致心肌纤维化，心肌重构，引起心肌梗死后心功能下降。

本研究中，相关性分析表明，CK-MB酶活性峰值和发病7天时CTGF呈正相关（r=0.859，P＜0.000），而与其他时间段相关性不佳，提示心肌梗死后血清CTGF蛋白浓度峰值和CK-MB酶活性峰相关，而CK-MB酶活性峰值与心肌梗死范围呈正相关[15]，因此，CTGF峰值也可能与心肌梗死范围相关，心肌梗死范围越大，梗死心肌组织中CTGF表达越多，心肌重构更明显，心功能受影响也就越大。CTGF在组织损伤修复过程中均可高表达，因此其影响因素较多，特异性欠缺。另外，本研究中，未长期随访患者心功能情况，尚不能明确CTGF是否和心肌梗死后患者心功能呈负相关。

本研究表明，CTGF与心肌梗死后心肌重塑可能有关，但其在心肌梗死的确切作用及机制、与心肌梗死后其它神经内分泌激活的关系有待于进一步深入研究。CTGF可能作为心肌梗死的早期诊断指标之一及治疗靶点，以阻止心肌梗死后心肌重塑，防止发展成难治性心力衰竭。

[1] Bradham DM, Igarashi A, Potter RL, et al. Connective tissue growth factor: a cysteine-rich mitogen secreted by human vascular endothelial cells is related to the SRC-induced immediate early gene product CEF-10. J Cell Biol, 1991, 144: 1285-1294.

[2] Parada C, Li J, Iwata J, et al. CTGF mediates Smad-dependent transforming growth factor β signaling to regulate mesenchymal cell proliferation during palate development. Mol Cell Biol, 2013, 33: 3482-3493.

[3] Ma B, Kang Q, Qin L, et al. TGF-β2induces transdifferentiation and fibrosis in human lens epithelial cells via regulating gremlin and CTGF. Biochem Biophys Res Commun, 2014, 447: 689-695.

[4] Kiwanuka E, Andersson L, Caterson EJ, et al. CCN2 promotes keratinocyte adhesion and migration via integrin α5β1. Exp Cell Res, 2013, 319: 2938-2946.

[5] Gravning J, Ørn S, Kaasbøll OJ, et al. Myocardial connective tissue growth factor （CCN2/CTGF） attenuates left ventricular remodeling after myocardial infarction. PLoS One, 2012, 7: e52120.

[6] Szabó Z, Magga J, Alakoski T, et al. Connective tissue growth factor inhibition attenuates left ventricular remodeling and dysfunction in pressure overload-induced heart failure. Hypertension, 2014, 63: 1235-1240.

[7] Wu CK, Wang YC, Lee JK, et al. Connective tissue growth factor and cardiac diastolic dysfunction: human data from the Taiwan Diastolic Heart Failure Registry and molecular basis by cellular and animal models. Eur J Heart Fail, 2014, 16: 163-172.

[8] Lau LF, Lam SC. The CCN family of angiogenic regulators: the integrin connection. Exp Cell Res, 1999, 248: 44-57.

[9] Moussad EE, Brigstock DR. Connective tissue growth factor: what's in a name ? Mol Genet Metab, 2000, 71: 276-292.

[10] Gravning J, Ørn S, Kaasbøll OJ, et al. Myocardial connective tissue growth factor （CCN2/CTGF） attenuates left ventricular remodeling after myocardial infarction . PLoS One, 2012, 7: e52120.

[11] Metalidis C, van Vuuren SH, Broekhuizen R, et al. Urinary connective tissue growth factor is associated with human renal allograft fibrogenesis. Transplantation, 2013, 96: 494-500.

[12] 王洁, 孟磊, 丁文惠, 等. 急性ST段抬高型心肌梗死患者血浆儿茶酚抑素水平的动态演变及临床意义. 中国循环杂志, 2013, 7: 506-510.

[13] 赵汉军, 颜红兵, 李文铮, 等. 急性心肌梗死患者全身与局部血浆组织蛋白酶抑制素水平的变化. 中国循环杂志, 2012, 3: 170-173.

[14] Dean RG, Balding LC, Candido R, et al. Connective tissue growth factor and cardiac fibrosis after myocardial infarction . J Histochem Cytochem, 2005, 53: 1245-1256.

[15] Rakowski T, Dziewierz A, Legutko J, et al. Creatine kinase-MB assessed in patients with acute myocardial infarction correlates with cardiac magnetic resonance infarct size at 6-month follow up . Hellenic J Cardiol, 2014, 55: 4-8.

Expression of Connective Tissue Growth Factor in Patients With ST-segment Elevation Myocardial Infarction

LI Yong, LI Li, QI Chun-mei, DIAO Jun, WU Wei-heng, FENG Jian-qi.
Department of Cardiology, The Second Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou (221006), Jiangsu, China

Objective: To detect the changes of serum level of connective tissue growth factor (CTGF) in patients with ST-segment elevation myocardial infarction (STEMI) and to study the correlation between CTGF level and the maximal activity of creatine kinase-MB (CK-MB).

Connective tissue growth factor; Myocardial infarction

2014-08-20）

（编辑：汪碧蓉）

221006 江苏省徐州市,徐州医学院第二附属医院 心内科

李勇 主治医师 硕士 研究方向：冠心病的诊治 Email： liyongmyzone@126.com

冯建启 Email：Dr_jqf@163.com

R54

A

1000-3614（ 2015 ）06-0540-03

10.3969/ j. issn. 1000-3614. 2015.06.007