尤亚辉　闫怀芝

（1 洛阳市孟津县中医院检验科，河南 洛阳 471100；2 洛阳市孟津县人民医院检验科，河南 洛阳 471100）

县级医院产广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药分析

尤亚辉1闫怀芝2

（1 洛阳市孟津县中医院检验科，河南 洛阳 471100；2 洛阳市孟津县人民医院检验科，河南 洛阳 471100）

目的 了解临床上我院分离的大肠埃希菌产广谱β-内酰胺酶的情况，并对其耐药性进行分析，从而为临床上抗菌药物的合理使用提供科学的使用依据。方法 使用珠海黑马半自动微生物鉴定敏分析仪对细菌进行鉴定，而药敏试验使用K-B纸片扩散法。结果 在2013年6月至2014年6月，我院共送检600份临床标本，在其中共分离出大肠埃希菌150株，而其中共有40株能够产广谱β-内酰胺酶。总检出率为26.67%（40/150）。产广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌极度耐药的抗生素为头孢类抗生素包括头孢唑啉、头孢他啶，其耐药率分别为100%和93.23%；对于复方新诺明、庆大霉素的耐药性也较强，其耐药率分别为86.11%和72.87%；对于阿米卡星、氨苄西林以及哌拉西林的耐药性较弱，其耐药率分别为51.23%、48.56%和34.21%；对于亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星和的耐药性最弱，其耐药率分别为0%、10.8%与21.2%。结论 目前，我院产广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌的阳性率比较高，已经成为患者发生感染的主要病原菌，因此应该以细菌耐药性的监测数据资料为根据，严格管理并加强临床上抗菌药物的合理使用，积极预防耐药菌株的产生和医院感染的暴发流行。

大肠埃希菌；产广谱β-内酰胺酶；耐药性

作为临床上一种比较常见的革兰阴性致病菌，大肠埃希菌在临床标本中分离很高，而且该菌对于抗生素的耐药性越来越严重。由于临床上对于广谱抗生素特别是第三代头孢的广泛应用，致使临床上产广谱β-内酰胺酶的细菌检出率呈现逐年上升的趋势［1］。广谱β-内酰胺酶是一种质粒介导的酶类，具有此酶的细菌对β-内酰胺类抗生素存在耐药性，这是临床上使用广谱抗生素产生耐药性的主要原因，也是临床上抗生素治疗效果不佳的根本，也有可能是发生医院内感染和耐药菌株扩散的原因［2］。为了了解临床上我院分离的大肠埃希菌产广谱β-内酰胺酶的情况，并对其耐药性进行分析，从而为临床上抗菌药物的合理使用提供科学的使用依据，本文对我院2013年6月至2014年6月送检600份临床标本进行分离检测。现将其结果报道如下。

1　资料与方法

1.1标本来源：为我院2013年6月至2014年6月送检600份临床标本主要包括血液、痰液、胸腹水以及中段尿液和伤口分泌物等标本，在其中共分离出大肠埃希菌150株。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922购自上海伊华医学科技有限公司。

1.2细菌鉴定：使用珠海黑马半自动微生物鉴定药敏分析仪对细菌进行鉴定，并使用革兰阴性菌鉴定板条。

1.3抗菌药物纸片及M-H培养基：抗菌药物纸片和培养基购自北京天坛药品生物技术开发公司。M-H培养基中的水解酪蛋白干粉是从益阳生化试剂厂购自，而后由我科微生物室自行配制。

1.4方法

1.4.1药敏试验：根据第二版《全国临床检验操作规程》［3］，采用K-B纸片扩散法进行。其具体操作如下：首先将待检测的细菌配制成菌液，其浓度为0.5麦氏单位，然后将菌液涂在M-H板上，并使其均匀分布。等待片刻待其干后，即可贴药敏纸片，注意每两个相邻纸片间的中心应相距约24 mm左右，而每个纸片的中心距离平皿的边缘至少15 mm。严格按照美国国家临床实验室标准化委员会2000年制定标准对药敏的结果进行判定［4］。

1.4.2产广谱β-内酰胺酶的检测：在进行药敏实验时，将分离得到的大肠埃希菌按照上述标准进行判定，其抑菌圈的标准如下：①头孢噻肟钠不高于27 mm；②头孢他啶不高于22 mm；③氨曲南不高于27 mm；④头孢曲松钠不高于25 mm。满足上述标准其中之一者，即可认为疑似产广谱β-内酰胺酶的细菌。然后进行下一步的确证实验。

1.4.3确诊实验：将待检测的菌液涂在M-H平皿上，并将头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸纸片、头孢噻肟钠和头孢噻肟/克拉维酸纸片贴在平皿上，并使其均匀分布。然后将上述平皿放在35 ℃环境中进行培养，时间大约为16 h。结束后对抑菌圈的直径进行测定，如果发现有至少1对纸片的直径差值不小于5 mm，即可确认该菌为产广谱β-内酰胺酶的细菌。

2　结果与分析

在我院共送检600份临床标本中，共分离出大肠埃希菌150株，而其中共有40株能够产广谱β-内酰胺酶。总检出率为26.67%（40/150）。产广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌极度耐药的抗生素为头孢类抗生素包括头孢唑啉、头孢他啶，其耐药率分别为100%和93.23%；对于复方新诺明和庆大霉素的耐药性也较强，其耐药率分别为86.11%和72.87%；对于阿米卡星、氨苄西林以及哌拉西林的耐药性较弱，其耐药率分别为51.23%、48.56%和34.21%；对于亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星和的耐药性最弱，其耐药率分别为0%、10.8%与21.2%。见表1。

表1　产广谱β-内酰胺酶阳性和阴性大肠埃希菌对10种抗生素的耐药情况

3　讨 论

作为临床上一种比较常见的致病原菌，大肠埃希菌可引起泌尿系统、呼吸系统以及伤口等多个系统和组织的感染，而其中最常见的耐药菌是产广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌［5］。本文的研究结果表明，我院分离出的产广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌的阳性比较高。而且结果也显示，产酶菌株对多种抗生素的耐药率都比非产酶菌株要高，这些菌株已经成为患者发生医院内感染的主要病原菌。因此，临床以及实验室应该对此给予高度的重视，将开展广谱β-内酰胺酶的检测纳入到常规工作中来，同时也应该根据以上细菌耐药性的监测数据资料，严格管理并加强临床上抗菌药物的合理使用，积极预防耐药菌株的产生和医院感染的暴发流行。

［1］张继红.县级医院肺炎克雷伯氏菌感染的耐药性调查分析［J］.中华医院感染学杂志，2008，18（10）:1452-1453.

［2］陈子松，喻长法，郑英姿.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌与肺炎克雷伯氏菌的检测及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2009，19（8）:998-999.

［3］陈浙涌.超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯氏菌的耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2008，18（9）:1326-1327.

［4］章清，魏丽，魏光美，等.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性变迁［J］.中华医院感染学杂志，2004，14（2）:220-222.

［5］潘晓龙，周晓东，吴祥镜，等.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型的研究［J］.检验医学，2005，20（5）:462-416.

R969.3

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1671-8194（2015）20-0065-02