高金良

（长春中医药大学附属医院风湿科，吉林 长春 130117）

加味黄芪建中颗粒对类风湿性关节炎大鼠相关细胞因子及免疫球蛋白影响的实验研究

高金良

（长春中医药大学附属医院风湿科，吉林 长春 130117）

目的 探讨加味黄芪建中颗粒对类风湿性关节炎大鼠相关细胞因子及免疫球蛋白的影响。方法 选取清洁级Wistar大鼠48只，随机分4组，正常组、模型组、雷公藤多苷片组、加味黄芪建中颗粒组，每组12只，均行细胞因子、免疫球蛋白检测。结果 模型组细胞因子（TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP）、关节炎指数、免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA）高于正常组，细胞因子（IL-4、IL-10）低于正常组。雷公藤多苷片组与加味黄芪建中颗粒组细胞因子（TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP）、关节炎指数、免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA）较模型组降低，细胞因子（IL-4、IL-10）较模型升高，加味黄芪建中颗粒组变异幅度大于雷公藤多苷片组（P＜0.05）。结论 加味黄芪建中颗粒可显著改善类风湿性关节炎大鼠的细胞因子及免疫球蛋白状况。

加味黄芪建中颗粒；类风湿性关节炎；细胞因子；免疫球蛋白；影响

类风湿性关节炎是以关节滑膜慢性炎症为主的自身免疫性疾病，传统治疗方案中，多采用抗风湿药物治疗，患者几年后常常会出现明显的不良反应［1］，逐渐失去临床疗效结果多数患者的病情不能得到长期有效的控制，因此合理用药，在疾病的早期控制病情的发展和转归，已成为国内外研究的热点。中药治疗类风湿性关节炎是具有一定优势的［2］，不良反应小，安全性较高，报道如下。

1　材料与方法

1.1实验动物：雄性Wistar大鼠48只，体质量180～250 g。

1.2试剂：加味黄芪建中颗粒：药物组成：饴糖30 g、桂枝15 g、芍药18 g、生姜9 g、大枣6枚、黄芪30 g、炙甘草6 g、秦艽10 g、鸡矢藤10 g。采用免煎颗粒制剂，取自正规医院颗粒药房，每日1剂。雷公藤多苷片：10毫克/片，浙江普洛康裕天然药物有限公司生产，国药准字Z33020778。

1.3方法：取冻干卡介苗素1支（50 mg），80 ℃、1 h灭活，混入灭菌液体石蜡油和羊毛脂（2∶1）10 mL中，制成Freund's完全佐剂。除正常组外，在每鼠右后足拓皮内注射Freund's完全佐剂0.05 mL致炎，复制佐剂性关节炎大鼠模型。致炎后第19天开始给药，连续30 d，各组的给药量相当于临床用量的5倍，具体给药方法如下：①正常对照组：给予9 g/L氯化钠溶液灌胃，10 mL/kg，每天1次。②模型对照组：给予9 g/L氯化钠溶液灌胃，10 mL/kg，每天1次。③雷公藤多甙治疗组：将雷公藤多苷片研成细末，加9 g/L氯化钠溶液，配制成混悬液，按照10 mL/kg的剂量灌胃，每天1次。④加味黄芪建中颗粒治疗组：将加味黄芪建中颗粒，加9 g/L氯化钠溶液，配制成混悬液，按照10 mL/kg的剂量灌胃，每天1次。末次用药24 h后，用20 g/L乌拉坦溶液按大鼠体质量5 mL/kg剂量，腹腔注射麻醉，由腹主动脉抽取4～6 mL血液，4000 r/min，离心10 min，取血清测定细胞因子（TNF-α、IL-1、IL-4、IL-10、ESR、RF、CRP）及免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA），均采用ELISA法测定，严格按照试剂盒说明书进行操作。检测指标的时间节点为末次用药24 h。

1.4评定标准。关节炎指数［3］：全身病变按5级评分法评价，根据未注射佐剂的其余3只肢体的病变程度合计积分，计算出关节炎指数。①0分：无红肿。②1分：小趾关节红肿。③2分：趾关节和足拓肿胀。④3分：踝关节以下的足爪肿胀。⑤4分：包括踝关节在内的全部足爪肿胀。满分12分，分数越高，关节炎越严重。

1.5统计学方法：SPSS16.0软件行统计学分析，组间差异用方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结 果

2.1各组大鼠细胞因子与关节炎指数比较：模型组细胞因子（TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP）、关节炎指数高于正常组，细胞因子（IL-4、IL-10）低于正常组。雷公藤多苷片组与加味黄芪建中颗粒组细胞因子（TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP）、关节炎指数较模型组降低，细胞因子（IL-4、IL-10）较模型升高，加味黄芪建中颗粒组变异幅度大于雷公藤多苷片组（P＜0.05）。见表1。

2.2各组大鼠免疫球蛋白比较：模型组免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA）高于正常组。雷公藤多苷片组与加味黄芪建中颗粒组免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA）较模型组降低，加味黄芪建中颗粒组降低幅度大于雷公藤多苷片组（P＜0.05）。见表2。

表1　各组大鼠细胞因子与关节炎指数比较（）

表1　各组大鼠细胞因子与关节炎指数比较（）

注：TNF-α为肿瘤坏死因子α，IL-1为白细胞介素1，IL-4为白细胞介素4，IL-10为白细胞介素10，ESR为血沉，RF为类风湿因子，CRP为C反应蛋白。与正常组比较，aP＜0.05。与模型组比较，bP＜0.05。与雷公藤多苷片组比较，cP＜0.05

组别　例数　TNF-α（g/L）　IL-1（μg/L）　IL-4（μg/L）　IL-10（μg/L）正常组　12　7.8±1.2　0.7±0.3　7.8±1.0　52.8±6.7模型组　12　27.1±2.6a　2.0±0.9 a　4.3±1.2 a　15.6±1.9 a雷公藤多苷片组　12　15.4±2.3ab　1.4±0.7ab　5.2±0.8ab　31.4±2.3ab加味黄芪建中颗粒组　12　8.6±1.4 abc　0.8±0.2abc　7.1±1.3abc　46.7±4.1abc组别　例数　ESR（mm/h）　RF（ng /L）　CRP（mg/L）　关节炎指数（分）正常组　12　0.8±0.2　33.1±4.8　1.6±0.4　0.0±0.0模型组　12　12.7±2.9a　89.2±17.6a　3.7±1.3a　6.8±2.9a雷公藤多苷片组　12　4.3±1.5ab　64.7±10.3ab　2.3±1.0ab　4.2±1.2ab加味黄芪建中颗粒组　12　1.2±0.5abc　38.5±6.2abc　1.7±0.6abc　1.7±0.3abc

表2　各组大鼠免疫球蛋白比较（）

表2　各组大鼠免疫球蛋白比较（）

注：IgM为免疫球蛋白M，IgG为免疫球蛋白G，IgA为免疫球蛋白A。与正常组比较，aP＜0.05。与模型组比较，bP＜0.05。与雷公藤多苷片组比较，cP＜0.05

组别　例数　IgM（mg/L）　IgG（mg/L）　IgA（mg/L）正常组　12　261.5±24.3　395.7±34.6　71.2±5.8模型组　12　517.2±43.8a　978.1±91.7a134.7±13.2a雷公藤多苷片组　12　397.4±35.0ab672.9±80.3ab109.8±10.6ab加味黄芪建中颗粒组　12　272.7±31.8abc449.5±51.7abc80.3±6.4abc

3　讨 论

类风湿性关节炎的发生发展与体内诸多因子的改变密切相关［4］。中药治疗类风湿性关节炎的效果较好［5］。黄芪建中汤加秦艽、鸡矢藤、青风藤、三七、薏苡仁组成核心方：加味黄芪建中汤。方中重用黄芪、饴糖为君增强益气建中之力，臣以辛温之桂枝温阳气，祛寒邪；酸甘之白芍养营阴；生姜温胃散寒，甘温质润之饴糖，温补中焦，缓急止痛大枣补脾益气；佐以秦艽、鸡矢藤、青风藤助黄芪、饴糖健脾祛风湿，舒筋络，散瘀止痛，解毒消肿；薏苡仁健脾舒筋，祛湿除痹。方中在健脾祛湿的基础上加三七，活血化瘀生新，入胃经，养胃止血不留瘀，化瘀通络不伤正。炙甘草为使药益气和中，调和诸药。其中饴糖配桂枝，辛甘化阳，温中焦而补脾虚；芍药配甘草，酸甘化阴，缓肝急协调鸡矢藤而止痛。秦艽、鸡矢藤、青风藤微寒以劫黄芪、桂枝而升阳助火，祛湿邪；黄芪、饴糖、薏苡仁益气固本扶正祛邪；三七化瘀通络贯穿疾病的始终；诸药合用，共奏健脾益气，散寒祛湿、通络止痛之功效。本次研究的结果表明，雷公藤多苷片与加味黄芪建中颗粒均是类风湿性关节炎的有效治疗药物，且加味黄芪建中颗粒的治疗效果更佳，可显著改善类风湿性关节炎大鼠的细胞因子及免疫球蛋白状况。但此次研究也存在一定的弊端，样本量较少，仍需要进一步扩大。加味黄芪建中颗粒是否可以彻底治愈类风湿性关节炎，仍需要进一步研究。

［1］王旻晋，武永康，林辉.甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎的不良反应及应对措施［J］.华西医学，2013，28（6）:940-943.

［2］王俊杰，范永升.中药治疗类风湿性关节炎实验研究进展［J］.中华中医药学刊，2013，31（7）:1588-1590.

［3］陈建双，于海荣，张玉玲，等.赤雹根总皂甙对类风湿性关节炎大鼠血清细胞因子的影响［J］.时珍国医国药，2012，23（5）:1097-1098.

［4］施晓柯.类风湿性关节炎相关细胞因子的研究进展［J］.中山大学研究生学刊（自然科学·医学版），2012，33（4）:1-5.

［5］曾海坤，曾灶英，郭大敏，等.中药生地马钱丸配合来氟米特治疗类风湿性关节炎（RA）的疗效及安全性［J］.当代医学，2012，18（16）:153-154.

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1671-8194（2015）20-0052-02