李彩东，杨勇卫，田鹏飞，李惠军，吴　　斌

慢性乙型肝炎病毒感染者血清MIF、IL-17和IL-10水平变化*

李彩东，杨勇卫，田鹏飞，李惠军，吴斌

【摘要】目的探讨HBV感染者外周血巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、IL-17和IL-10水平变化的临床意义。方法收集60例慢性无症状HBV携带者、60例慢性乙型肝炎患者、60例乙型肝炎肝硬化患者、60例肝癌患者和50例健康对照者空腹血清，采用 ELISA法检测血清MIF、IL-17和IL-10水平；采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量；采用全自动生化分析仪检测血清肝功能指标。结果与健康对照组［（1.9±1.4）ng/ml］比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血MIF水平均显著升高［分别为（5.7±2.8）ng/ml、（10.5±4.1）ng/ml、（17.7±7.4）ng/ml、（19.8±9.9）ng/ml，P＜0.01］，其中HCC组最高，ASC组最低；与健康对照组［（4.4±2.2）ng/ml］比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-17水平均显著升高［分别为（8.6±4.3）ng/ml、（20.7±6.6）ng/ml、（23.4±15.1）ng/ml、（16.0±8.7）ng/ml，P＜0.01或P＜0.05］，其中LC组最高，ASC组最低；与健康对照组［（12.9±4.6）ng/ml］比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-10水平均显著升高 ［分别为（237.2±72.9）ng/ml、（184.68±59.0）ng/ml、（356.6±150.8）ng/ml、（287.9±88.8）ng/ml，P＜0.01］，其中LC组最高，CHB组最低。结论MIF、IL-17和IL-10在慢性HBV感染过程中可能起重要作用，检测血清细胞因子水平可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。

【关键词】慢性乙型肝炎；巨噬细胞移动抑制因子；白介素-17；白介素-10

乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）感染人体后，在不同的感染者临床转归存在较大的差异，其中免疫反应可能起了重要的作用。多种细胞因子参与免疫反应的调节，已有研究证实巨噬细胞移动抑制因子（Macrophage migration inhibitory factor，MIF）参与了肿瘤的发生发展，在机体炎症及免疫反应中起炎症介质作用［1］。研究表明，白细胞介素-17 （Interleukin-17，IL-17）在自身免疫性肝病、脂肪性肝病及肝脏肿瘤中参与肝脏损伤及肝再生过程［2］。白细胞介素-10 （Interleukin-10，IL-10）被认为是一种免疫和炎症抑制因子，是导致乙型肝炎慢性化的重要因素［3］。本研究检测了慢性无症状HBV携带者（Chronic asymptomatic carriers，ASC）、慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B，CHB）患者、乙型肝炎肝硬化（Liver cirrhosis，LC）患者和肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）患者血清MIF、IL-17和IL-10水平，现报道如下。

1　资料与方法

1.1病例来源2012年2月～2013年12月我院住院及门诊诊治的ASC60例，男性32例，女性28例；年龄21～57岁，

平均年龄（37.28±12.08）岁。CHB患者60例，男性43例，女性17例；年龄28～63岁，平均年龄（41.45±13.17）岁。LC患者60例，男性43例，女性17例；年龄39～66岁，平均年龄（50.23±11.95）岁。肝癌患者60例，男性48例，女性12例；年龄43～69岁，平均年龄（53.72±9.84）岁。肝炎和肝硬化诊断符合2010年12月中华医学会肝病学会和感染病学会联合修定的《慢性乙型肝炎防治指南》［4］的标准。常规检查诊断肝癌。选择健康体检者50例，男性25例，女性25例；年龄23～58岁，平均年龄（32.15±8.46）岁，排除各型肝炎病毒感染，排除心肺疾病，肝功能正常。

1.2检测方法采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量（湖南圣湘生物科技有限公司）；采用 ELISA法检测血清MIF、IL-17和IL-10水平（美国RD公司）；采用贝克曼AU680全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平（北京九强生物技术有限公司）。

1.3统计学处理应用SPSS 17.0统计软件，计量资料以（x±s）表示，对方差齐资料采用t检验，对方差不齐资料采用校正t检验。采用Pearson相关分析，P＜0.05为具有统计学意义。

2　结果

2.1临床基本资料见表1。

表1　慢性HBV感染者和健康人肝功能和HBV DNA水平（x±s）比较

2.2慢性HBV感染者与健康人外周血MIF、IL-17和IL-10水平比较与健康对照组比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血MIF水平均显著升高，差异有统计学意义（t=4.749，t=3.544，t=10.264，t=8.537，P＜0.01）。HCC组MIF水平最高，与CHB组和ASC组比，差异均有统计学意义（t=4.088，t=8.363，P＜0.01），而与LC组比，差异无统计学意义（P＞0.05）；与健康对照组比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-17水平均显著升高，差异有统计学意义（t=3.716，t=2.074，t=5.009，t=3.723；P＜0.01或P＜0.05）。ASC 组IL-17水平最低，与CHB组、LC组和HCC组相比，差异有统计学意义（t=3.166，t=4.326，t=3.065；P＜0.01）；与健康对照组比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-10水平均显著升高，差异有统计学意义（t=6.700，t=7.889，t=13.949，t=7.785；P＜0.01）。CHB组IL-10水平最低，与LC组和HCC组比，差异有统计学意义（t=5.409，t=3.411；P＜0.01，表2）。

表2　慢性HBV感染者与健康人外周血MIF、IL-17和IL-10水平（ng/ml，x±s）比较

3　讨论

乙型肝炎是一种免疫介导的疾病，机体免疫系统在HBV感染后被激活，免疫细胞释放多种细胞因子，进而形成一个复杂的免疫调节网络，促进肝脏炎症反应，介导肝细胞损伤，并诱导各类细胞分化增殖，使慢性肝脏炎症持续存在。有研究显示MIF参与了乙型肝炎、肝硬化、肝癌等的发病过程，其变化与肝脏组织损害程度相关［5］。Th17细胞参与了多种肝脏疾病的发生发展［6］，其产生的IL-17作为一种强致炎因子与HBV感染后的肝脏炎性损伤有着密切的关系，且大部分的HBV感染者肝内IL-17水平与血清ALT水平或HBV DNA载量呈正相关［7］。有研究表明IL-17与慢性乙型肝炎的发病有关，并且IL-17的血清水平与肝损伤程度呈正相关［8］。Arnaud et al［9］及Wasmuth et al［10］认为IL-10的产生可能影响HBV感染者的临床转归，高水平的IL-10不利于HBV的清除，可能与HBV感染慢性化有关。Li et al［11］研究发现在慢性乙型肝炎患者，HBcAg介导Th17细胞参与免疫应答，并同时刺激IL-10分泌，IL-10通过下调维甲酸相关核孤儿受体γt来抑制特异性Th17细胞功能，并且IL-10作用于未成熟的树突状细胞，可诱导T细胞失去功能，减弱了对病毒的细胞免疫清除作用，这可能是HBV感染慢性化的主要途径［12］。

本研究发现，与健康对照组比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血MIF水平显著升高，其中HCC组MIF水平最高，说明MIF参与了乙型肝炎、肝硬化、肝癌等肝病的发病过程，且与肝病的严重程度密切相关。

最近的一项研究显示，在急性肝衰竭发病过程中，IL-17等细胞因子起至关重要的作用［13］。我们的研究发现，与健康对照组比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组血清IL-17水平显著升高，推测血清IL-17随着乙型肝炎病程的进展其水平也增高，IL-17对肝脏炎症的进展和细胞的癌变有一定的促进作用。

有研究显示，肝硬化患者尤其是失代偿期肝硬化患者外周血IL-10水平明显高于健康对照组，并且这种增高随肝硬化病情的加重而越发明显，说明IL-10参与了肝纤维化的发生发展［14］。我们的研究发现，与健康对照组相比，ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-10水平均显著升高，其中LC组外周血IL-10水平明显高于其它组，推测IL-10参与了肝病的相关进程以及肝纤维化的发生发展。另外，ASC组IL-10水平高于CHB组，推测内源性IL-10可以降低HBV感染对肝脏的损害，对肝脏有一定的保护作用，而当IL-10等抗炎因子生成减少，将无法抑制肝脏受到炎性损伤［15］。

本研究通过比较慢性HBV感染者外周血MIF、IL-17和IL-10水平变化，初步阐明这几种细胞因子在HBV感染慢性化、肝细胞损伤以及疾病进展中的作用，提示检测血清MIF、IL-17和IL-10水平可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。

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（收稿：2014-09-03）

（本文编辑：陈宗炳）

第一作者：李彩东，女，45岁，博士，主任药师。主要从事慢性乙型肝炎发病机制及治疗学研究。 E-mail：lzlicaidong@163.com

DOI：10.3969/j.issn.1672-5069.2015.01.018

*基金项目：兰州市科技发展指导性计划项目（编号：2013-ZD-07）

作者单位：730046甘肃省兰州市第二人民医院肝病研究所

Changes of serum macrophage migration inhibitory factor，IL-17 and IL-10 levels in patients with chronic hepatitis BLi Caidong，Yang Yongwei，Tian Pengfei，et al.Institute of Liver Diseases，Second People’s Hospital，Lanzhou 730046，Gansu Province，China

【Key words】Chronic hepatitis B；Macrophage migration inhibitory factor；Interleukin-17；Interleukin-10