卢继承，朱群群，王雪飞

(泰山学院生物与酿酒工程学院，山东泰安271000)

螭霖鱼人工早繁初步研究

卢继承，朱群群，王雪飞

(泰山学院生物与酿酒工程学院，山东泰安271000)

经过营养强化和提高水温等生殖调控措施，螭霖鱼的繁殖提早到3月上旬，雌鱼产卵率为60%，各批次受精率在40－90%，孵化率在61－85%，出苗率在30－45%.正交试验结果表明，影响螭霖鱼繁殖最主要的环境因素是温度.

螭霖鱼;早繁;温度调控

泰山螭霖鱼是一种为泰山所独有的小型野生鱼类，学名多鳞白甲鱼(Scaphesthes macrolepis Bleeker)，隶属鲤形目、鲤科、鲃亚科、白甲鱼属［1］，是泰安市首个获得国家地理标志性保护的产品，其肉质细嫩、味美不腥、营养丰富、药用价值高，深受广大养殖者和消费者青睐，市场价格居高不下，是经济价值较高的名优鱼类，也是目前最具发展潜力的淡水养殖品种之一.

泰山螭霖鱼雄鱼3冬龄、雌鱼4冬龄可达性成熟，每年的5月至6月是螭霖鱼主要的繁殖季节.螭霖鱼的人工繁殖多采用沙盆集卵，费时费力、效率差、孵化率低.在自然条件下，螭霖鱼生长缓慢，加之对水质、水温要求较高，低于3℃就会冻死，夏季水温超过28℃时也会热死，一年中适合螭霖鱼生长的时间较短［2－3］.另外，螭霖鱼孵化期较长(10天左右)，等到培育出供成鱼养殖所需的夏花鱼种时，已到6月底，当年生鱼苗往往已错过了春末夏初的有利生长时机.因此，为延长螭霖鱼生长期，缩短养殖周期，提早进行螭霖鱼的春季繁殖就显得十分必要了.为了探索螭霖鱼早繁的可行性，我们于2014年12月－2015年4月在泰山学院生物与酿酒工程学院实验室内进行了泰山螭霖鱼的早繁初步研究，研究过程如下.

1 材料与方法

1.1 营养强化及提高水温对螭霖鱼早繁的影响

1.1.1 试验设施条件

早繁设3个试验组，A为营养强化提温组、B为营养强化正常温度对照组、C为未经营养强化提温组，每组均投放10尾雌鱼、2尾雄鱼于100×50×50cm的水族箱中.水族箱放置两台20W循环水泵，24小时开启进行水质循环过滤，水流速度0.2m/s左右，流量4000L/h左右.水族箱放置在明亮的室内，采用自然光照(散射光)，光照强度在800－2000lux之间.每周换水1次，换水量占总容量的1/4－1/3，并清洗过滤棉和过滤环等滤材.

1.1.2 亲鱼的营养强化培育

泰山螭霖鱼亲鱼均购于泰安天井湾泰山螭霖鱼繁育有限公司，雌鱼4－6龄，雄鱼3－5龄.12月挑选体型健硕、性腺发育良好、性情活泼、规格均匀的亲鱼随机放养在A、B两缸中进行营养强化培养，2015年1月24日之前，水温在17－18℃，每天上午和下午交替投喂升索牌鲟鱼颗粒料和添加了螺旋藻的锦鲤颗粒饲料各一次，日饲料投喂量为鱼体重的1%－2%.2015年1月24日－2月23日室内停止供暖，水温约8－9℃，日饲料投喂量为其体重的0.5%－1%.C组亲鱼购于2015年2月20日，规格与A、B两组的亲鱼接近，因养殖场冬季水温度低，亲鱼未进行投喂.

1.1.3 温度调控

2015年2月24日A、C两组开始温度调控，通过加装在水族箱内的一根300W加热棒，于24－25日先将温度逐渐提升至12℃，将此温度保持一天，27－28日将温度由12℃提升至15℃，并在3月1日将此温度保持一天，接着在3月2－5日将温度提升至18℃，之后水温保持在18℃－20℃.B组未经温度调控，水温一直与室温接近(9－13℃).

1.1.4 人工挤卵授精

当观察到雄鱼对雌鱼的追逐增强并不时撞击雌鱼腹部时，轻挤压雄鱼腹部有精液流出，精液入水即散，雌鱼腹部膨大、柔软、生殖孔红润，轻压腹部有卵子流出，则立即进行人工挤卵和授精.

人工挤卵的具体操作如下:捞取雌鱼，用干爽的纱布将鱼身包住，擦干其腹部及泄殖孔，使鱼尾斜向下，一手固定鱼的头部，一手轻轻地由上而下挤压雌鱼腹部，若有鱼卵流出，则落入下面洁净干燥的搪瓷托盘中.挤出鱼卵后立即捞取一尾雄鱼，用同样的方法，将精液挤压至鱼卵上，为保险起见，再捞一尾雄鱼，将精液挤入鱼卵上.用毛笔将精卵充分混匀，再倒入适量的精子稀释液(0.2%的生理盐水)，并用毛笔轻轻搅动精卵，使之充分混合，然后加入冲洗液(晾过的自来水，水温20℃左右)，轻轻搅拌，倒掉一部分水，再加入新水，如此反复多次冲洗掉多余的精液，并尽快地使所有的卵粒都均匀的分布.

1.1.5 人工孵化

将受精卵分散在浅盘静水中进行人工孵化(水温19－22℃)，保持光照强度200－600lux.当鱼卵发育到原肠中期，用小盆随机取鱼卵百余粒，放在白瓷盆中，用肉眼检查，统计受精(好卵)卵数和混浊、发白的坏卵(或空心卵)，计算受精率.每日定时换水并且观察鱼卵的发育情况，及时清理死去的鱼卵以保持水质的清洁.

3天左右鱼卵孵化出膜，计算孵化率.此时鱼苗依靠自身的卵黄囊获取营养.螭霖鱼胚后期较长，破膜10天左右，体色素不断增加，出现集群现象，待卵黄囊吸收完毕，鱼苗全长10mm左右，能正常平游并开口摄食，计算出苗率.

1.1.6 早繁鱼苗培育

2015年3月20日开始逐渐将平游后的螭霖鱼鱼苗移入鱼缸(40×30×30cm)中，缸内设一个气动式生化棉过滤器进行增氧过滤，并有一根100W加热棒进行控温，水温控制在19℃－22℃.每缸放养200尾左右，水位10cm左右，随着仔鱼游泳能力的增强，不断提高水位.待鱼苗长到2cm左右时，水位提高到20cm左右，并可将仔鱼分缸，放养密度降到每缸100尾.

仔鱼开口后，前3天混合投喂轮虫(2－6个/mL)和卤虫无节幼体(0.01－0.02个/mL)，第四天开始投喂卤虫无节幼体(1－2个/mL).饵料每天投喂4次，投喂量应让仔鱼30分钟内基本摄食完毕，每天对鱼缸底部进行吸污，并加注晾过的新水.

1.2 温度、水流和光照对螭霖鱼早繁的影响

为探究影响螭霖鱼提早繁殖的关键环境因子，从2015年3月20日至4月30日进行了正交试验，设温度(正常、提温)、光照(正常、延长)和水流(静水、造浪)3因素2水平，采用L4(23)表.在4个100 ×80×40cm规格的鱼缸中分别放雌鱼4尾，雄鱼6尾.鱼缸放置在靠窗的室内进行，试验开始时自然光照周期约为11L:13D，试验结束时约为13L:11D.延长光照时开启鱼缸上方2根60w荧光灯，每天延长0.5h直至光照时长为15L:9D，后保持不变.试验开始水温11－13℃，实验结束时正常水温在17－18℃.提温通过300W加热棒进行，每天提水温1℃直至18℃，后一直保持在18－20℃.水流造浪是通过一台24w造浪泵实现.每天定时、定质投喂饵料，并吸污换水1/10－1/5.每天早晨注意检查雄鱼对雌鱼的追逐情况，并适时检查精卵成熟度.

2 结果

2.1 营养强化及提高水温对螭霖鱼早繁的影响

随温度提升，A组亲鱼的活动量、进食量都明显增加，不时观察到雄鱼对雌鱼进行追逐并撞击雌鱼腹部.C组亲鱼在提温一周后才开始少量进食，雌雄鱼无追逐现象.3月7日检查到A组中2条雄鱼都能挤出精液，精液入水即散，10条雌鱼腹部均比较膨大、柔软有弹性，其中有2条雌鱼的生殖孔红润，轻压腹部有卵子流出，随后对其进行了人工挤卵和授精.

3月7－10日，A组先后共有6尾雌鱼挤出鱼卵，雌鱼成熟率为60%，对其进行人工授精，后经人工孵化，成功培育出仔鱼2000余尾，结果详见表1.截至3月30日，B、C两组亲鱼雄鱼均无法挤出精液，雌鱼腹部紧实，无流动感，无法挤出卵子.

表1 营养强化及提高温度后螭霖鱼人工早繁情况表

2.2 温度、水流和光照对螭霖鱼早繁的影响

试验开始后，每天注意观察雄鱼对雌鱼的追逐情况，4月7日，观察到第3实验组中雄鱼一直对雌鱼不断追逐并不时撞击雌鱼腹部，捞出检查精卵成熟情况，轻压雌鱼腹部有成熟卵子流出，持续观察，记录各组首次挤出卵子时所用天数.结果采用直观分析法，表明影响螭霖鱼早繁的主要环境因素依次为温度＞水流＞光照周期，详见表2所示.

表2 螭霖鱼早繁正交试验表

3 分析与讨论

3.1 营养强化

营养是鱼类性腺发育的物质基础.当卵巢发育到第Ⅲ期以后(即卵母细胞进入大生长期)，卵母细胞要沉积大量的营养物质，以供胚胎发育的需要，卵巢增重约占体重的20%.因此，亲鱼需要从外界摄取大量的营养物质，特别是蛋白质和脂肪供其性腺发育.C组亲鱼虽也采取了提高水温、加强流水刺激等措施，雌鱼性腺仍未发育成熟，早繁试验未能成功.后通过探卵发现雌鱼体内卵黄积累不够，主要原因亲鱼因在养殖场水温低，停止喂食3个月，造成体内营养物质积累不够.目前，李庆华等［4］发现大菱鲆经营养强化后亲鱼产卵量、上浮卵量、上浮率及受精卵存活率、孵化率均有显著提高;通过采取对亲鱼进行营养强化等措施，宋友韩等［5］在自然水温下已实现了草鱼的早繁技术.这些研究成果都是与我们的初步研究结果相符的.因此，营养强化是影响螭霖鱼早繁的关键因素.

3.2 温度、水流和光照

鱼类是变温动物，通过温度的变化，可以改变鱼体的代谢强度，加速或抑制性腺发育和成熟的过程.水温及其变化是鱼类产卵行为的信号，若水温达不到产卵或排精的温度阈值，即使性腺已经发育成熟，也不能完成生殖活动.另外，在近几年的繁殖试验中，笔者也观察到一现象，即鱼龄越大，产卵越早.目前，草鱼、鲤鱼等通过调控水温可实现提早繁殖，另外鲇形目、鲈形目也可通过温度控制来实现早繁或反季节繁殖.目前，通过提高亲鱼养殖温度这一条件，胡国宏等［6］把黄颡鱼在寒区的繁殖提早了20天.王本健等［7］使赤点石斑鱼提早2个月产卵，实现了人工早繁.因此，温度是决定螭霖鱼早繁的重要因素.

鱼类的生殖周期在很大程度上受光照时间长短的调节，光刺激通过中枢神经，引起脑垂体的分泌活动，从而影响性腺发育.对春季产卵鱼类，延长光照期可促进性腺发育和提早产卵，但大多数鱼类的产卵是受温度和光照周期的共同调控.如，采取降低温度和光照，能将翘嘴鳜在江苏地区的人工繁殖期推迟至7月底，从而实现高温期的批量育苗［8］.罗海忠等［9］研究表明，通过调控水温、光照周期和注射外源激素能使鮸鱼由原来在9－10月份产卵提前到6月份产卵;而仅调控水温只能提前至8月份产卵;仅调控光照或仅在春季注射激素，不会使鮸鱼提前产卵.木云雷等［10］利用延长光照时间和提高水温使牙鲆亲鱼性腺提前1－5个月成熟和产卵.李庆华等［4］通过人工控光控温使大菱鲆亲鱼性腺提早发育两个月以上，达到反季节产卵的效果.光照周期对秋季产卵鱼类影响较大，对鲤形目鱼类来说，只调控水温也可实现繁殖［11］.本试验研究也验证了这一点，即影响螭霖鱼繁殖最主要的环境因素是温度，在不延长光照时间，也可实现螭霖鱼的提早繁殖.

水流对于产半浮性卵鱼类和溯河产卵鱼类等的性腺成熟和产卵极为重要.栖息在天然条件下的家鱼缺乏水流刺激，性腺就不能过渡到第Ⅴ期，致使家鱼不能产卵.因此，流水刺激对家鱼性腺进一步发育成熟就很重要.虽然，野生螭霖鱼生活在泰山270－800米溪流中，对水流、溶氧、水质等条件要求较高，但经过多年人工养殖后，螭霖鱼的性腺在静水中也可以正常发育成熟，也早已实现平原水泥池静水繁殖.而本研究中螭霖鱼繁殖更是采用人工挤卵、授精进行，因而，水流对螭霖鱼全人工早繁的影响不如温度显著.

3.3 其它因素

本次早繁试验鱼卵的受精率、孵化(破膜)率也较高，但出苗(下塘)率较低，笔者认为可能与以下因素有关:一是螭霖鱼胚胎期很短、胚后期较长，仔鱼破膜后容易受到水霉菌及其它敌害生物的侵害.二是有几条雌鱼产出的卵大小不一，有些卵粒过于扁塌或糊状，无光泽，过熟程度轻的卵虽可受精发育，鱼苗也能孵出，但大多为畸形，如歪尾、曲背、卵黄膜肿大，不能正常游动等，绝大多数畸形鱼苗均陆续夭折.三是目前螭霖鱼近亲繁殖严重、种质退化，导致鱼苗畸形率高.这些因素使得本研究中出苗率较低.因此，如何恢复螭霖鱼种质，优化螭霖鱼的孵化技术，提高螭霖鱼的出苗率，是目前亟待解决的问题.

4 小结

本研究在未使用任何催产药物的情况下，仅通过营养强化亲鱼，提高水温，持续流水刺激等措施，将螭霖鱼的人工繁殖时间提早到3月上旬，并采用人工挤卵授精、孵化，室内高密度培育仔鱼等全人工繁殖技术，节省了人力，延长了仔鱼生长期.等到4月底5月初，泰山山区养殖池水温度达16℃－19℃，自然条件下螭霖鱼刚刚进入繁殖初期，而早繁仔鱼在室内已经过1个月左右培育，鱼苗体长3cm左右，此时，再下池养殖，鱼种规格较大、生长快、成活率高，在生存能力上已远远超过自然条件下繁殖的仔鱼.

我们开创的早繁模式，将螭霖鱼每年的最适生长期延长两个月以上，如果养殖得当，商品鱼可以在当年春节期间就能达到上市规格，比自然条件下养殖的商品鱼上市时间提前半年左右.这样，既缩短了养殖周期，又可为优质螭霖鱼的均衡上市提供条件.

［1］陈红菊，姜运良，宋憬愚，等.泰山赤鳞鱼胚胎发育的研究［J］.水生生物学报，2008，32(6):926－933.

［2］刘永进，刘会，张安才，等.泰山赤鳞鱼繁育养殖技术研究［J］.水利渔业，2005，25(1):32－35.

［3］张安才.泰山赤鳞鱼的生物学及人工养殖技术［J］.齐鲁渔业，2005，22(8):31－32.

［4］李庆华，孙建，李仰真，等.营养强化和控光控温对大菱鲆亲鱼性腺发育及卵子质量的影响［J］.南方农业学报，2013，44(6):1030－1036.

［5］宋友韩，陆天一.自然水温下早繁草鱼的技术研究［J］.淡水渔业，1994，4(3):25－26.

［6］胡国宏，熊占山，张家松，等.黄颡鱼早繁试验［J］.黑龙江水产实用技术，2014，1(1):30－32.

［7］王本健.赤点石斑鱼早繁试验初报［J］.福建水产，2011，33(4):64－66.

［8］叶金明，黄桂铭.翘嘴鳜反季节人工繁殖及苗种培育试验［J］.上海海洋大学学报，2014，23(7):513－517.

［9］罗海忠，陈波，傅荣兵，等.鮸鱼性腺发育人为调控技术研究［J］.海洋渔业，2007，29(2):128－133.

［10］木云雷，刘悦，王鉴，等.水温和光照对牙鲆亲鱼性腺成熟和产卵的影响［J］.大连水产学院学报，1999，14(2):62－65.

［11］梁淑娟，林明秋，孙万肘，等.北方地区鲤鱼早繁技术的试验报告［J］.天津水产，1990(1):16.

A Preliminary Study on the Early Propagation of Varicorhinus Macrolepis

LU Ji－cheng，ZHU Qun－qun，WANG Xue－fei
(School of Biology and Brewing Engineering，Taishan University，Tai＇an，271000，China)

By controlling water temperature and the nutrition reinforced conditioning of broodstock，the propagation of varicorhinus macrolepis was moved up to early march，60%of females were sexually mature，the fertilization rate was 40－90%，the hatching rate was 61－85%，and the viable fry rate was 30－45%.Results of orthogonal test showed that the temperature was the main environmental factor，which influenced the early propagation of varicorhinus macrolepis.

varicorhinus macrolepis;early propagation;temperature control

S961.3

A

1672－2590(2015)06－0099－05

2015－10－11

泰安市大学生科技创新计划项目(2014D083)

卢继承(1964－)，男，山东泰安人，泰山学院生物与酿酒工程学院副教授.