王继磊，陈云飞

(蒙城县中医院，安徽 蒙城 233500)



HPLC法测定柴黄利胆和胃糖浆中黄芩苷含量

王继磊，陈云飞*

(蒙城县中医院，安徽 蒙城 233500)

目的：建立柴黄利胆和胃糖浆中黄芩苷的含量测定方法。方法：采用HPLC法，色谱柱为依利特Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为甲醇-水-磷酸(49∶51∶0.2)，检测波长为276nm，柱温为30℃，流速为1.0mL/min。结果：黄芩苷在0.302～2.42μg范围内与峰面积积分呈良好的线性关系，平均回收率为97.48%，RSD=1.55%(n=6)。结论：该方法准确可靠，可用于柴黄利胆和胃糖浆中黄芩苷的含量测定。

柴黄利胆和胃糖浆；黄芩苷；HPLC

柴黄利胆和胃糖浆是蒙城县中医院传统制剂，由柴胡、法半夏、麸炒枳壳、陈皮、茯苓等十六味中药组成，具有利胆和胃的功效，主要用于胆胃不和引起的口苦咽干、嗳气纳呆、胃肋胀痛、头晕等疾病的治疗。为了更好地控制该制剂的质量，选择处方中君药黄芩的有效成分黄芩苷作为检测指标，采用高效液相色谱法测定其含量，现报道如下。

1 仪器与试药

岛津高效液相色谱仪(岛津SPD-10A紫外检测器、岛津LC-10A泵)；JK-2200DB型数控超声波清洗仪；黄芩苷对照品(中国食品药品检定研究院)；样品自制(批号20140301，20140320，20140408)；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

2.1.1 对照品溶液制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成15.1μg/mL的黄芩苷溶液。

2.1.2 供试品溶液制备 精密量取供试品溶液10mL，置于100mL圆底烧瓶中，加入70%乙醇50mL，加热回流3h，放冷，滤过，滤液置于蒸发皿中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一蒸发皿中，蒸干。残渣加50%甲醇溶解，置于50mL容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.1.3 阴性对照溶液制备 取按处方比例及生产工艺制备的不含黄芩原药材的柴黄利胆和胃糖浆，按照供试品溶液制备方法同法操作即得。

2.2 色谱条件

色谱柱：依利特Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm,5μm)，流动相为甲醇-水-磷酸(49∶51∶0.2)，检测波长为276nm，柱温为30℃ ，进样量为20μL，流速为1.0mL/min。

2.3 系统适用性实验

在“2.2”项下色谱条件下，分别精密量取黄芩苷对照品溶液、样品溶液以及阴性样品溶液各20μL进样测定。结果表明，在与对照品色谱对应的位置上未出现色谱峰，阴性样品溶液无干扰。见图1。

图1 柴黄利胆和胃糖浆HPLC色谱

2.4 线性关系考察

精密称取黄芩苷对照品7.55mg，置于50mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密吸取黄芩苷对照品储备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL至5mL容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。按照“2.2”项下色谱条件进行测定，以黄芩苷进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=0.970 3x+11.183，r=0.999 4。结果表明，黄芩苷在0.302～2.42μg范围内与峰面积积分呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取黄芩苷对照品溶液适量，按照“2.2”项下色谱条件进样测定，连续测定6次，记录峰面积积分值，RSD=1.43%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

精密吸取同一样品溶液，分别于放置0、2、4、6、8、10、12h进样测定，记录峰面积积分值，结果表明被测样品峰面积积分值RSD=0.85%，样品溶液在12h内性质稳定。

2.7 重复性试验

取同一批样品，按照“2.1.2“项下方法制备6份供试品溶液，按照“2.2”项下色谱条件进样测定，求得峰面积积分值 RSD=0.86%，表明该方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

取已知黄芩苷含量(0.165mg/mL)的样品6份，精密量取5mL，每份精密加入黄芩苷对照品溶液(浓度185μg/mL)5mL，按照“2.1.2“项下方法制备供试品溶液，按照“2.2”项下色谱条件进样测定。结果表明平均回收率为97.48%，RSD=1.55%，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.9 样品测定

取3批样品，按照“2.1.2“项下方法制备供试品溶液，按照“2.2”项下色谱条件进样测定，代入线性方程计算黄芩苷含量。结果表明，3批样品黄芩苷含量分别为0.161mg/mL(批号20140301)、0.159mg/mL(批号20140320)、0.165mg/mL(批号20140408)。

3 讨论

中华人民共和国药典[1]规定，酒黄芩药材中黄芩苷含量不得少于8.0%，制成制剂后每毫升黄芩苷含量不得少于0.2mg，考虑到药材来源及工业化大生产的特点，柴黄利胆和胃糖浆中黄芩苷含量不得少于0.12mg/mL。结果表明，本实验考察的所有医院制剂均符合要求。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2010:283.

(责任编辑：尹晨茹)

Content Determination of Baicalin in Chaihuanglidanhewei Syrup by HPLC

Wang Jilei,Chen Yunfei*

(TCM Hospital of Mengcheng,Mengcheng 233500,China)

Objective:To establish the method for determination of Baicalin in chaihuanglidanhewei syrup.Methods:The HPLC method was used with Hypersil ODS2 column(4.6mm×250mm,5μm), The mixture of methanol water phosphoric(49∶51∶0.2) was the mobile phase, the flow rate was 1.0ml/min and the detection wavelength was at 276nm ,The column temperature was at 30℃.Results:The linear range of Baicalin was 0.302～2.42μg and the average recovery was 97.48% with RSD of 1.55%(n=6).Conclusion:Conclusion:This method is simple,accurate and can be used to determine the contents of Baicalin in chaihuanglidanhewei syrup.

Chaihuanglidanhewei syrup;Baicalin;HPLC

2015-06-16

王继磊(1976-)，男，安徽省蒙城县中医院主管中药师，研究方向为中药制剂。

陈云飞(1984-)，男，安徽省蒙城县中医院初级中药师，研究方向为中药制剂。

R284.2

A

1673-2197(2015)22-0028-02

10.11954/ytctyy.201522011