葛振民 马枢 贾晓青



·临床研究·

甲硫氨酸对抗强脉冲噪声致聋作用的观察

葛振民 马枢 贾晓青

目的 探讨口服甲硫氨酸对抗强脉冲噪声致聋的预防作用。方法 选择某部健康男性军人203例作为受试者，随机分为2组：试验组113例和对照组90例。噪声暴露前2组分别给予口服甲硫氨酸片和安慰剂，用法：1 500 mg/d×3 d。2组受试者噪声暴露前、后均行纯音测听、听性脑干反应测听检查，对检查结果进行统计学分析。结果 所有受试者噪声暴露前后听力均有改变，2组间差异有统计学意义。结论 噪声暴露前口服甲硫氨酸片能有效减轻强脉冲噪声暴露后耳聋的发生。(中国眼耳鼻喉科杂志，2015，15：41-43)

甲硫氨酸；噪声性聋；听阈

噪声性聋(noise-induced hearing loss, NIHL)是指生产、生活以及军事活动中因接触噪声刺激所引起的感音神经性听力减退，在世界范围内都是一个重要的公共健康问题。大量的研究与观察发现，氧应激是导致耳蜗毛细胞死亡引起噪声性聋发生的重要机制[1]，而且动物实验也已经证实，抗氧化剂对噪声性聋具有明确的保护作用[2-3]。本研究旨在观察口服甲硫氨酸片对抗强脉冲噪声致聋的作用。

1 资料与方法

1.1 对象与分组 选择某部健康男性军人203例作为受试者，随机分为2组：试验组113例和对照组90例。2组受试者年龄为19～35岁，平均(21.5±7.2)岁，既往均无明确噪声接触史，无听力减退、耳部疾病或其他影响听力的疾病(如高血压、糖尿病、耳毒性药物使用等)史。

1.2 方法 2组受试者于噪声接触(自动武器实弹射击训练)前3 d分别给予口服甲硫氨酸片和安慰剂。试验组给予甲硫氨酸片，1 500 mg/d；对照组给予等量安慰剂，2组均连续给药3 d。噪声接触前及接触后1、7 d分别行纯音测听、听性脑干反应(auditory brain response, ABR)测听检查。

1.2.1 纯音测听 由同一名检查者按国家标准规定的测试方法，对每位受试者进行0.5、1、2、4 kHz频率的常规纯音测听。仪器采用丹麦生产的MadsenOB 922型临床听力计，测试在环境噪声<25 dB专用隔声室内进行。

1.2.2 ABR测听 ABR测试仪器选用日本光电诱发电位仪。测试在隔声屏蔽室进行，记录电极置于颅顶，参考电极置于同侧乳突处，接地电极置于前额发际。短声刺激，带通滤波100～3 000 Hz，分析时间10 ms，叠加1 000次。刺激强度从70 dB nHL开始，以10 dB nHL级依次递减，以能引出可重复记录到波Ⅴ的最小声强作为ABR波Ⅴ阈值。测试指标：①Ⅰ-Ⅴ波间期；②波Ⅴ阈值。

1.3 统计学处理 采用配对t检验分析同组试验前后差异，t检验分析组间差异。所有检测结果使用SPSS11.0软件进行统计学处理。

2 结果

2组受试者噪声暴露前、暴露后1、7 d听阈，ABR I-V波间期结果比较见图1和图2。由图可见，噪声暴露前听阈、ABR I-V波间期在2组之间差异不显著(P>0.05)，但2组之间在噪声暴露后1 d差异有显著统计学意义(P<0.01)，7 d差异有统计学意义(P<0.05)；同时显示，与各自噪声暴露前相比较，听阈、ABR I-V波间期，噪声暴露后1 d实验组差异有统计学意义(P<0.05)，对照组差异有显著统计学意义(P<0.01)；噪声暴露后7 d实验组无显著差异(P>0.05)，对照组存在显著差异(P<0.05)。

图1. 2组受试者暴露前后听阈比较

3 讨论

研究已经证实，多种机制参与噪声暴露后耳聋的发生，包括耳蜗血流减少、谷氨酸的兴奋毒性、钙离子平衡改变及氧应激的产生等[4]，临床主要表现为听觉敏感度下降和听阈改变。强脉冲噪声暴露可引起耳蜗血流的剧烈变化和高代谢活动，产生过多的活性氧和活性氮等自由基，超过了细胞抗氧化系统的清除能力，蓄积的活性氧和活性氮等自由基损害DNA、脂质和蛋白质，从而引起耳蜗细胞的坏死或凋亡，证实氧应激引起耳蜗毛细胞死亡是强脉冲噪声导致耳聋发生的重要机制[1，5]。同时，许多研究证实使用抗氧化剂能够调节耳蜗抗氧化状态，减轻噪声性聋和耳蜗毛细胞损伤，具有保护听力的作用[4，6-8]，进一步证明了氧应激在噪声性聋发生中的作用，也提示抗氧化剂能够有效预防噪声性聋。本研究主要观察口服甲硫氨酸片对抗强脉冲噪声致聋的作用。

甲硫氨酸片为氨基酸类药，是体内胆碱生物合成的甲基供体，释放出活性甲基，阻断自由基的连锁反应，保护抗氧化酶的活性；同时还能够增加还原型谷胱甘肽的活性，增加机体抗氧化能力，通过抗氧化机制可发挥预防噪声性聋的作用[2]。动物实验已经证实抗氧化剂甲硫氨酸对噪声、顺铂和氨基糖苷类药物引起的听力减退具有保护作用。Kopke等[9]利用沙鼠研究发现，噪声暴露前、后或暴露后7 h静脉使用甲硫氨酸可减轻永久性阈移和耳蜗外毛细胞死亡。许多研究者应用小鼠、豚鼠也得到了相同的结果。本研究发现，强脉冲噪声暴露前3 d给予甲硫氨酸片1 500 mg/d，能有效减轻强脉冲噪声暴露对听力的损伤，而且噪声暴露后7 d，试验组内及与对照组之间仍有显著差异，提示甲硫氨酸对听力的保护作用在停止用药后仍可持续一段时间，与Claussen等[10]利用沙鼠的实验研究结论相一致。我们推测甲硫氨酸能直接清除自由基，保持过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、超氧化物歧化酶的水平，阻止耳蜗细胞凋亡，可能是其有效对抗强脉冲噪声致聋的作用机制之一。

我们前期的研究已经证实，作为还原型谷胱甘肽补充物前体N-乙酰半胱氨酸能够减轻强脉冲噪声对听力的损害[7]，临床验证了还原型谷胱甘肽参与强脉冲噪声致暂时性阈移主要的细胞内抗氧化途径。Yamasoba等[11]研究发现，噪声暴露能够改变耳蜗还原型和氧化型谷胱甘肽的比例，氧化型谷胱甘肽增加，还原型谷胱甘肽减少，而前者参与活性氧引起的耳蜗细胞损害。Campbell等[12]研究证实，甲硫氨酸能减轻顺铂引起的谷胱甘肽还原酶活性降低，预防顺铂对听力的损伤。本研究发现，预服甲硫氨酸片在强脉冲噪声暴露后7 d仍具有听力保护作用，推测甲硫氨酸通过后期修饰，硫化为半胱氨酸的中间物腺苷甲硫氨酸，增加还原型谷胱甘肽水平发挥抗氧化作用，也可能是其减轻强脉冲噪声致听力损伤的作用机制。

目前，甲硫氨酸已经安全地应用于人类的营养研究、肿瘤成像，近期在接受放疗和顺铂化疗的头颈部肿瘤患者中开展了I期临床试验[13]。几种抗氧化剂也已经开始了预防噪声性聋的临床试验，包括：甲硫氨酸，维生素A、C、E和镁剂，N-乙酰半胱氨酸以及依布硒[10]。本研究证实了仅在强脉冲噪声暴露前应用甲硫氨酸具有有效的听力保护作用，因此，当进入超过现有听力防护装置防护能力的噪声场所前口服甲硫氨酸片作为耳保护剂可减轻噪声性聋，但噪声暴露前口服甲硫氨酸预防噪声性聋的最佳使用时机及其确切的作用机制还需要进一步的研究。

[ 1 ] Henderson D, Bielefeld EC, Harris KC, et al. The role of oxidative stress in noise-induced hearing loss[J]. Ear Hear, 2006, 27 (1):1-19.

[ 2 ] Alagic Z, Goniny M, Canlon B. Protection against acoustic trauma by direct application of D-methionine to the inner ear [J]. Acta Otolaryngol, 2011,131(8):802-808.

[ 3 ] Prell L, Johnson A, Lindblad A, et al. Increased vitamin plasma levels in Swedish military personnel treated with nutrients prior to automatic weapon training [J]. Noise Health, 2011, 13(55):432-443.

[ 4 ] OishiI N, Schacht J. Emerging treatments for noise-induced hearing loss [J]. Expert Opin Emerg Drugs, 2011, 16 (2):235-245.

[ 5 ] Evans P, Halliwell B. Free radicals and hearing. Cause, consequence, and criteria [J]. Ann N Y Acad Sci, 1999, 884(1):19-40.

[ 6 ] Campbell K, Leprell C. Potential therapeutic agents [J]. Semin Hear, 2012, 33(2):97-113.

[ 7 ] 葛振民,马枢,贾晓青，等. N-乙酰半胱氨酸对噪声性耳聋的预防作用研究[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2012,25(22)：1040-1041.

[ 8 ] Rewerska A, Pawelczyk M, Raukowska E, et al. Evaluating D-methionine dose to attenuate oxidative stress-mediated hearing loss following overexposure to noise[J]. Eur Arch Otorhinolaryngol, 2013, 270(4):1513-1520.

[ 9 ] Kopke RD, Coleman JK, Liu J, et al. Candidate’s thesis: enhancing intrinsic cochlear stress defenses to reduce noise-induced hearing loss [J]. Laryngoscope, 2002, 112 (9):515-532.

[10] Claussen AD, Fox DJ, Yu XL, et al. D-methionine pre-loading reduces both noise-induced permanent threshold shift and outer hair cell loss in the chinchilla [J]. Int J Audiol, 2013, 52(12):801-807.

[11] Yamasoba T, Harris C, Shoji F, et al. Influence of intense sound exposure on glutathione synthesis in the cochlea [J]. Brain Res, 1998, 804(1):72-78.

[12] Campbell K, Claussen A, Meech R, et al D-Methionine (Dmet) significantly rescues noise-induced hearing loss: timing studies [J]. Hear Res, 2011, 282(1):138-144.

[13] Hamstra D, Eisbruch A, Naidu M. et al. Pharmacokinetic analysis and phase 1 study of MRX-1024 in patients treated with radiation therapy with or without cisplatinum for head and neck cancer [J]. Clin Cancer Res, 2010, 16(9):2666-2676.

(本文编辑 杨美琴)

Protective effect of D-methionine pre-loading on intense impulse noise-induced hearing loss

GEZhen-min,MAShu,JIAXiao-qing.

DepartmentofOtorhinolaryngology,the404HospitalofPublicLiberationArmy,Weihai264200,China

GE Zhen-min, Email: gezmin@163.com

Objective To observe the protective effect of oral administration of D-methionine tablets on intense impulse noise-induced hearing loss. Methods Two hundred and three volunteers were recruited and randomly divided into two groups: experimental group (n=113) and control group (n=90). The subjects had received oral administration of D-methionine tablets in the experimental group and placebo in the control group before noise exposure. The routine audiometric evaluation and auditory brainstem response testing were performed and recorded pre- and post- noise exposure. The statistical analysis was carried out with SPSS 11.0. Results The changes of hearing in all participators were observed after noise exposure, however, there were statistically significant differences between the two groups. Conclusions The protective effect of D-methionine tablets were prominent on the intense impulse noise-induced hearing loss. (Chin J Ophthalmol and Otorhinolaryngol,2015,15:41-43)

D-methionine; Noise-induced hearing loss; Hearing threshold

中国人民解放军第404医院耳鼻咽喉科 威海 264200

葛振民(Email：gezmin@163.com)

10.14166/j.issn.1671-2420.2015.01.014

2014-01-10)