杨春贵

（云南景东彝族自治县文井镇农业服务中心,云南景东 676201）

猪乙型脑炎病毒的乳胶凝集试验

杨春贵

（云南景东彝族自治县文井镇农业服务中心,云南景东 676201）

猪日本乙型脑炎是由日本脑炎病毒引起的一种人畜共患传染病。猪感染后表现为高热、流产、产死胎及公猪睾丸炎。本病严重影响生猪生产的发展，并对人类的健康造成威胁。2014年，采用血清学的乳胶凝集试验对本病的病原体进行了检测，从文井镇、锦屏镇等5个规模猪场，采集猪血清76份进行病原学检测，检出阳性血清19份，阳性率25.00%。

1 材料

1.1 仪器和试剂

5 ml一次性真空负压采血管、离心机、移液管、微量反应板、载玻片等。试剂用武汉科前动物生物制品有限责任公司生产的猪乙型脑炎检测试剂盒（包括阳性对照血清1瓶（2 ml/瓶）、阴性对照血清1瓶（2 ml/瓶）、乳胶抗原1瓶（2 ml/瓶）、稀释液）。

1.2 血清采集

在文井镇、锦屏镇等5个规模猪场，随机用5 ml一次性真空负压采血管采集猪血清76份（其中能繁母猪36份，种公猪5份，育成猪35份）。填写采血登记表，血样置室温 3 h，待血液在负压采血管中充分凝固，3 000 r/min 离心20min，常规分离血清，冰冻保存待检。

2 用法与判定

2.1 定性试验

取被测样品（血清或全血）阳性对照血清、阴性对照血清、稀释液各一滴（20µl），分别置于玻片上，各加乳胶抗原一滴（20ul），搅拌混匀大小1cm，并摇动1～2min，于3～5min内观察结果。

2.2 定量试验

先将被测样品在微量反应板内作连续稀释，各取一滴（2µl）依次滴加于玻片上，另设对照同上，随后各加乳胶抗原一滴（20µl），如上搅拌并摇动，判定。

2.3 结果判定

凝集反应强度标准：“++++”全部乳胶凝集，颗粒聚于液滴边缘，液体完全透明；“+++”大部分乳胶凝集，颗粒明显，液体稍混浊；“++”约50%乳胶凝集，但颗粒较细，液体较混浊；“+”有少许凝集，液体呈混浊状；“-”液滴呈原有的均匀乳状。

2.4 判定标准

当阳性对照血清加抗原呈“++++”凝集；阴性对照血清加抗原呈“-”凝集；抗原加稀释液呈“-”凝集，以呈现“++”及其以上凝集反应判为阳性。

3 结果

呈现“++”及其以上凝集反应19份，阳性率25.00%，其中能繁母猪12份，占阳性的63.16%，种公猪2份，占10.53%，育肥猪26.31%。

4 本病防控体会

4.1 生物安全措施

蚊是乙脑的传播媒介，猪是扩散宿主，夏秋季乙脑病毒在蚊→猪→蚊之间循环。因此在蚊滋生的夏秋季节进行灭蚊。

4.2 淘汰病猪，加强消毒

确诊病猪最好淘汰，猪圈及用具要经常消毒。死胎、胎盘等进行无害化处理。

4.3 做好免疫接种

特别是要按免疫程序做好繁殖母猪及种公猪的免疫接种，于每年3月份（蚊虫出现前1个月），使用乙型脑炎疫苗间隔1个月免疫两次。

[1] 吴清民，苏敬良.兽医传染病学[M].北京：中国农业大学出版社，2001.

[2] 蔡宝祥，沈正达.家畜传染病学[M].农业出版社，1984.