潘俊辉

（广东省惠州市第三人民医院检验科，广东 惠州 516002）

凝血酶原时间（prothrombin time，PT）和活化部分凝 血 活 酶 时 间（activated partial thromboplastin time，APTT）是临床上比较常用的检验凝血功能指标，可以鉴别因凝血因子异常导致的出血性或血栓性疾病，从而了解患者在术前凝血状态及应用抗凝药物监测等起着重要作用［1］。在检验过程中，胆红素浓度是影响检测凝血功能因素。本研究探讨不同胆红素浓度对检测血浆PT 及APTT 结果的影响。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器 PT 和APTT 检测试剂由德国西门子公司（Siemens）生产，胆红素的检测试剂由上海华臣生物试剂有限公司生产。凝血质控品由德国西门子公司（Siemens）生产，胆红素的校准品由上海华臣生物试剂有限公司公司生产。全自动的凝血分析仪SYS-MEX CA7000由日本希森美康公司生产，全自动的生化分析仪HITA-CHI7600 由日立公司（日本）生产。

1.2 方法 根据临床化学实验室的标准化委员会关于体外诊断相关试剂干扰的评估指南要求，凝血质控样品由1.0ml的蒸馏水溶解成对照组血浆；将不同浓度胆红素的校准品加入5瓶装有凝血质控的血浆中为实验组血浆，应用生化式分析仪测定实验组与对照组血浆中的胆红素3次，取其平均值；并应用凝血分析仪（凝固法）测定不同浓度的胆红素下血浆PT 及APTT各5次，取其平均值。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件对数据进行处理，组间比较采用两独立样本t检验，回归方程的二次项分析用来表示血浆PT 及APTT 的检测与胆红素的关系，以P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同胆红素浓度血浆PT 及APTT 的检测结果 血浆胆红素的浓度分别为20.12、41.51、65.23、83.60、101.98μmol／L，对照组的血浆胆红素浓度为8.02μmol／L，胆红素浓度为65.30、83.60、101.98 μmol／L组的PT 时间长于对照组，差异有统计学意义，胆红素浓度为45.51、65.30、83.60μmol／L 组的APTT 时长于对照组，差异有统计学意义，见表1。

表1 不同胆红素浓度的血浆PT 及APTT 比较结果 （±s）

表1 不同胆红素浓度的血浆PT 及APTT 比较结果 （±s）

组别 胆红素浓度（μmol／L）PT t P APPT t P实验组20.12 12.21±0.15 1.448 0.186 27.19±0.63 1.141 0.287 41.51 12.32±0.25 1.884 0.096 34.19±0.35 20.263＜0.001 65.3 14.19±0.31 11.858＜0.001 51.59±1.01 44.258＜0.001 83.60 18.35±0.37 30.95＜0.001 65.74±1.13 64.383＜0.001 101.98 24.32±0.19 83.374＜0.001---对照组8.02 12.01±0.27--26.69±0.75--

2.2 不同浓度的胆红素和血浆PT 及APTT 回归分析 胆红素的浓度作为自变量，以X 表示；血浆PT 及APTT 相应检测均值为因变量，Y1表示血浆PT，Y2表示血浆APTT，进行相关性回归分析，见表2。

表2 胆红素的浓度与血浆PT 及APTT 的回归分析

3 讨论

检测血浆PT 及APTT 一般应用凝固法，其原理为反应杯或者试剂预温到37.0 ℃，充分混匀试剂和血浆，散射光强度在混匀瞬间很弱，设定此时散射光强度0%；随着标本中纤维蛋白的凝固，散射光强度在反应杯中逐渐增加，在样品完全凝固时稳定在最高强度，此时的散射光强度是100%。散射光强度在0%～100%变化表现为一条曲线，设定曲线中一点其对应时间为凝固时间。检测的样品达一定散射光强度时，与其对应的标准曲线相比后转化成血浆PT 及APTT 检测结果［2］。如标本混有胆红素及其他干扰物质，可以影响样品的散射光强度，可能对血浆PT 及APTT 的检测结果产成影响。黏度法凝血分析可以减少黄疸对检测结果的干扰，但活化凝血因子作用不容易控制［3］。

健康人群的血浆胆红素含量为1.71～17.1 μmol／L，当红细胞发生过多破坏、肝脏疾病或胆道梗阻等，可以使胆红素超过正常水平，血中的胆红素越高，黄疸程度越重［4］。本研究中通过不同浓度胆红素形成不同黄疸程度的血浆，结果示黄疸越严重，血浆PT 及APTT 检测值越高。血浆PT 及APTT 的检测结果在胆红素为20.12μmol／L 时与对照组相比，其差异无统计学意义（P ＞0.05），表明血浆PT 及APTT检测结果不受较低胆红素的影响；当胆红素为41.51 μmol／L 时，血浆PT 检测结果和对照组相比，其差异无统计学意义（P ＞0.05），PT 检测结果不受影响，但APTT 检测结果与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.001），而此时APTT 检测结果受胆红素浓度的影响；胆红素的浓度＞66μmol／L 时，PT 和APTT 检测结果与对照组均值相比，差异有统计学意义（P ＜0.001），说明血浆PT 及APTT 的检测结果受高浓度的胆红素影响。因为当标本中含有高浓度的胆红素时，色泽变深的血浆散射光至基线上移，使PT 及APTT 检测时间变长［5］。

本研究以胆红素浓度作为自变量，其对应的血浆PT 及APTT 检测结果作为因变量，做回归曲线。胆红素浓度与PT 和APTT 检测结果的二次项方程相关系数要比线性方程的高，分别为0.991与0.993，表明胆红素浓度与PT 和APTT 检测结果相关性较好。根据相关系数最高的曲线得出PT 及APTT 检测结果随胆红素浓度变化回归方程。因而，如发现标本PT 及APTT 检测结果不正常升高，应注意标本有无存在黄疸，从而减少黄疸对PT 及APTT 检测结果的影响。血浆PT 及APTT 检测结果除受黄疸的标本影响外，还受溶血、标本量和放置时间等多种因素影响［6-7］。应用大剂量青霉素等会使PT 及APTT 延长。重度肝炎、肝硬化和肝功能不全等患者的抗凝血蛋白和凝血因子合成减少，也可以使血浆PT 及APTT 延长［8-9］。当排除以上因素，且胆红素的浓度高，可依据相关回归方程所得的校正公式对标本PT 及APTT 检测结果校正，以得到更准确结果［10］。

综上所述，对于重度黄疸标本需加强和临床科室沟通，如标本的颜色深黄可能是摄入含有色素的药物所致，应停药一段时间后重新检测；如果是因为患者自身因素所致，可应用回归方程以校正，从而为临床提供更为准确的凝血相关检测结果。

［1］ 孙磊.凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题［J］.中国医药指南，2013，11（5）：177-178.

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