师梦凡，何文君，谢日青，刘艳丽，许琼明，杨世林

(苏州大学医学部药学院天然药物化学教研室，江苏苏州 215123)

枸骨Ilex Cornuta Lindl为冬青科常绿植物，主产于河南、湖北、湖南、安徽、江苏等地，其根、枝、叶和果均可入药，其叶既为常用中药，也为苦丁茶的主要来源之一［1］。枸骨具有散风热、清头目、解烦闷、活血脉的功能，亦用于冠心病心绞痛和高血压症［2］。枸骨根味苦，性凉，无毒，有补肝肾、健腰膝、除风湿、凉血清热作用。民间用于肝肾不足，关节疼痛，牙痛。

枸骨叶的主要化学成分包括黄酮及其多酚类化合物、三萜及其皂苷类等［3-5］。近年药理学研究表明，枸骨叶具有抗心肌缺血、降血脂、抗氧化、免疫抑制、抗生育等广泛的药理作用［6-8］。研究发现枸骨根含有多种三萜和皂苷类化学成分［9］，与枸骨叶的化学成分相似［10］，因此我们推测其可能具有心血管方面的活性。本实验旨在通过血瘀证大鼠模型，考察枸骨根对其血液流变性的影响，为枸骨根在治疗血瘀证方面的研究和开发提供实验依据。

1 材料

1.1 动物 SD大鼠，180～220 g，雄性，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供 (许可证号SCXK(沪)2007-0005)。饲料和垫料由苏州大学实验动物中心提供，实验期间动物自由采食和饮水。

1.2 试剂与药品 盐酸肾上腺素 (sigma公司，Lot:070M2015V);戊巴比妥钠 (Germany，批号6900183);地奥心血康胶囊 (成都地奥制药集团有限公司，批号1010033);丹参片 (上海雷允上药业有限公司，批号100916)。

1.3 枸骨根醇提物 由苏州大学药物化学教研室提供。枸骨根200 kg，用50%乙醇回流提取2次，提取液减压浓缩得不含乙醇浓缩液。浓缩液 (100 L)过D101离子交换柱，用纯水、30%、60%、90%乙醇洗脱，合并30%与60%乙醇洗脱部分作药理研究。

1.4 仪器 LG-R-80B电脑血液黏度测试仪 (北京世帝科学仪器公司);H1850R离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公司)。

2 方法

2.1 模型制备 大鼠随机分6组，即正常对照组、模型组、枸骨根提取物 (30，60 mg/kg)组、丹参片组 (300 mg/kg)和地奥心血康 (300 mg/kg)组。连续灌胃给药14 d，末次给药1 h后，除正常对照组外，其余各组大鼠皮下给予盐酸肾上腺素注射液0.8 mg/kg，共2次，间隔时间为4 h。第1次皮下给予盐酸肾上腺素0.8 mg/kg后2 h，将大鼠置于0～2℃冰水中游泳4 min，造成大鼠急性血瘀模型。最后一次皮下注射盐酸肾上腺素后大鼠禁食不禁水饲养。次日以戊巴比妥钠腹腔麻醉后，腹主动脉取血 (肝素抗凝)，检测［11］。

2.2 血液流变学测定 取上述各组大鼠肝素抗凝后的血液每只5 mL，用LG-R-80 B型血液黏度仪进行全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积等指标的测定，并计算红细胞聚集指数、刚性指数与血沉方程K值［12］。

3 结果

3.1 对急性血瘀大鼠全血黏度的影响 与空白组相比，模型组全血黏度和全血还原黏度明显升高，表明血瘀模型成立。而给药组均能降低全血黏度和全血还原黏度，其中枸骨根醇提物 (60 mg/kg)可以显著降低全血黏度 (P＜0.05，P＜0.01)，枸骨根醇提物 (30 mg/kg)可以显著降低全血高切黏度 (P＜0.05)，结果见表1。

表1 枸骨根醇提物对血瘀大鼠模型全血黏度的影响 (¯，n=10)

表1 枸骨根醇提物对血瘀大鼠模型全血黏度的影响 (¯，n=10)

注:模型组与正常组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;给药组与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01

全血黏度全血还原黏度组别 剂量/(mg·kg－1低切 中切 高切 低切 中切 高切正常组 － 7.88±1.00 4.61±0.47 3.91±0.27 17.38±2.16 9).10±0.98 7.31±0.50模型组 － 17.75±4.91＊＊ 7.53±0.97＊＊ 6.37±0.58＊＊ 34.69±11.35* 13.02±2.49* 10.47±1.30＊＊枸骨根提 30 13.14±3.25 6.28±0.98 5.35±0.59# 27.72±6.77 11.70±1.88 9.54±1.02取物 60 11.04±1.47# 5.85±0.56# 5.08±0.40# 23.30±3.00 10.83±1.08 8.98±0.76丹参组 300 10.33±0.49# 5.50±0.23## 4.77±0.27## 22.58±1.53 10.49±0.47 8.64±0.47#心血康组 300 12.71±0.74 6.61±0.59 5.63±0.70 26.67±1.11 12.29±0.38 9.96±0.78

3.2 对急性血瘀大鼠血浆黏度、红细胞压积、血沉、血沉方程、红细胞聚集指数、刚性指数的影响 与空白组相比，模型组大鼠血浆黏度、红细胞压积、血沉、血沉方程、红细胞聚集指数、刚性指数均增高，给药组均能降低这些指数，其中枸骨根醇提物 (60 mg/kg)可以显著降低红细胞压积、血沉和血沉方程 (P＜0.05，P＜0.01);枸骨根醇提物 (30 mg/kg)可以显著降低血沉和血沉方程 (P＜0.05)，结果见表2。

表2 枸骨根醇提物对血瘀大鼠血浆黏度、红细胞压积、血沉、血沉方程、红细胞聚集指数、刚性指数的影响(¯x ± s，n=10)

4 讨论

本实验采用血液流变学的指标观察枸骨根醇提物不同剂量对血瘀大鼠的影响。血液流变学是研究循环血液的流动性、变形性、凝固性、黏弹性以及心血管黏滞性的科学。血液黏度是衡量血液流变性的指标，而血浆黏度、红细胞压积和红细胞聚集性等是决定血液黏度的内在因素［13-15］。可以依据这一指标衡量是否“血瘀”。

由血液流变学各项指标变化可知，枸骨根醇提物不同剂量组均能改善血瘀大鼠异常的血液流变性，降低其全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞压积、血沉、血沉方程、红细胞聚集指数、刚性指数，使其血液循环状态得到明显改善，这在一定程度上证实了枸骨根的活血化瘀作用。

本实验研究了枸骨根对改善急性血瘀模型大鼠血液流变学各项指标的作用，证实了其活血化瘀的药效，为其进一步开发成预防和治疗血瘀疾病的药物提供实验依据。

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