★ 黄陆强 黎田儿 黄文平 李志峰，*** 冯育林， 杨世林，

(1.江西中医药大学 江西 南昌 330004 ; 2.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 江西 南昌 330006)

地埝(MelastomadodecandrumLour)为野牡丹科植物地埝的全草，又名山地埝、地葡萄、地石榴等[1]。分布于广西、湖南、贵州等地。其味甘、涩，性凉，具有活血止血，消肿祛瘀，清热解毒之功效[2]。临床用于治疗高热、肿痛、咽喉肿痛、牙痛、痢疾、痛经、崩漏、痔疮、毒蛇咬伤等病症。现代临床研究报道，将地埝制成制剂，治疗消化道出血、止血功效显著[3]。另有报道地埝有抗肿瘤、抗衰老、降血糖等作用，而对正常细胞没有毒副作用[4,5]。目前，《湖南省中药材标准》2009年版地方标准以“地菍(地稔)”之名收载，并规定了性状鉴别，但是可控性差。鉴于上述原因，本文对10批地埝药材进行了薄层色谱鉴别研究，探索了地埝简单易行的鉴别方法，为地埝药材质量控制提供了依据。

1 材料

AUW220D型电子天平(日本岛津公司)；BS224型电子天平(Sartorius公司)；KQ250DB型数控超声波清洗器(巩义市予华仪器有限责任公司)；KQ5200型水浴锅(昆山市超声仪器有限公司)；薄层层析硅胶GF254(化学纯，青岛海洋化工厂分厂)；薄层层析硅胶GF254(化学纯，青岛市基亿硅胶试剂厂)；薄层层析硅胶G(化学纯，青岛海洋化工厂分厂)。

甲醇(批号：20130907，分析纯，广州光华科技股份有限公司)；乙酸乙酯(批号：10009418，分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；二氯甲烷(批号：20101115，分析纯，天津市福晨化学试剂厂)；没食子酸对照品(含量大于98%，批号：M05-20130113，购于中国药品生物制品检定所)；其它试剂均为分析纯。

本实验收集到不同批次的地埝样品共10批，来源于江西、安徽等地，样品经江西中医药大学钟国跃教授鉴定为地埝植物MelastomadodecandrumLour.药材信息见表1。

表1 药材信息

2 方法与结果

2.1 实验条件的考察 薄层色谱鉴别的影响因素包括有效成分的提取方法、溶媒、展开系统的组成、点样量、展开环境等。试验分别对以上影响因素进行了考察，以获得理想的薄层色谱鉴别条件。

2.1.1 提取方法的考察

2.1.1.1 方法一 取本品粉末2.0g，加水20mL和2mL盐酸，超声处理20min，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取2次，20mL/次，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣加1mL甲醇溶解，即得。

2.1.1.2 方法二 取本品粉末2.0g，加水20mL和2mL盐酸，冷浸1小时，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取2次，20mL/次，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣加1mL甲醇溶解，即得。

2.1.1.3 方法三 取本品粉末2.0g，加水20mL和2mL盐酸，冷浸1小时后超声20min，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取2次，20mL/次，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣加1mL甲醇溶解，即得。

实验结果表明三种不同的提取方法基本无显著差别。但方法一较其他两种方法简单。故选择直接超声提取。

2.1.2 层析板的考察 采用羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板、硅胶GF254板作为固定相，所得药材斑点以GF254板效果好，确定以硅胶GF254板进行薄层鉴别。

2.1.3 展开剂的考察 采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(640.5)、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂，其中以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂的展开效果最好，所得斑点多清晰、圆整、分离度好。根据实验结果采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂。

2.1.4 显色剂的考察 浓氨水氨熏显色，斑点较清晰，再置于紫外灯(254nm)下检视，与没食子酸对照品相同位置出现同颜色荧光斑点，且斑点清晰、数量较多。故采用氨熏显色后，再置于紫外灯下检视的方法。

2.1.5 点样量考察 取本品粉末2.0g，加水20mL和2mL盐酸，超声处理20min，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取2次，20mL/次，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣加1mL甲醇溶解。分别吸取3，5，8μL点于同一薄层板上，二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂。氨熏后置于紫外灯下检视，结果发现点样量的差异对斑点无明显的影响，为操作方便，故定点样量为3μL。

2.2 耐用性考察 观察在不同厂家生产的薄层板上的层析效果。将相同的供试品溶液和对照品溶液，分别点样于青岛市基亿达硅胶试剂厂生产的薄层板、青岛海洋化工厂分厂生产的薄层板上，用相同的展开系统展开，结果显示两个薄层板上的展开效果均较理想，所得斑点清晰，且分离效果好。

2.3 实验结果 根据以上实验，确定地埝的薄层鉴别方法为：取本品粉末2.0g，加水20mL和2mL盐酸，超声处理20min，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取2次，20mL/次，合并乙酸乙酯层，蒸干，残渣加1mL甲醇溶解，作为供试品溶液。另取没食子酸对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5mg没食子酸的溶液。照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述两种溶液各3μL，分別点于同一硅胶GF254薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂，取出，吹干，氨熏，再置紫外灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品溶液相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果见表2。

表2 10批地埝药材薄层鉴别结果

3 讨论

3.1 在实验过程中，分别比较了水

加盐酸超声(20min)、冷浸(1h)和冷浸(1h)加超声(20min)三种提取方法，提取后用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层蒸干，残渣加甲醇溶解，制成供试品。不同的提取方法无显著差别，故选择直接超声提取；在对提取溶媒的考察中，选择了水加盐酸、甲醇加盐酸两种溶媒。结果表明，不同的提取溶媒有显著差别，水加盐酸的提取效果优于甲醇加盐酸，故选择前者；对于展开剂的考察中，考察石油醚(30～60℃)-乙醚(3：2)、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸等展开系统。根据实验结果选择二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为最终展开剂。

3.2 实验建立了地埝中没食子酸的薄层色谱鉴别方法，该方法对地埝中没食子酸的鉴别有较好的适应性，其方法简便、快速，重现性好， 专属性强， 为地埝质量控制提供了有效手段。

[1]中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第二册)[M].北京：科学出版社，1972：1 002.

[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(5)[M].上海：上海科学技术出版社，1999：628.

[3]江苏新医学院编.中药大辞典·上册[M].上海：上海人民出版社，1997：804.

[4]程剑华，李以傧. 抗癌植物药及其验方[M].南昌：江西科学技术出版社，1998: 295.

[5]田庚元，冯宇澄，林颖.植物多糖的研究进展[J].中国中药杂志，1995，20(7):441-444.