袁 宁 吴 佗 张荣强 江新泉 倪 楠 侯佩强

(1.泰山医学院公共卫生学院，山东 泰安 271016； 2.泰安市疾病预防控制中心，山东 泰安 271000)

手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)作为一种全球性的急性传染病，其病原体以肠道病毒71型( Enterovious 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackie A 16 , Cox A 16)为主[1]。一般的临床表现为发热，口腔黏膜出现散在疱疹，手、足和臀部出现斑丘疹疱疹，疱疹周围可有炎性红晕，疱内液体较少，可伴有咳嗽、流涕、食欲不振等症状[2]。而EV71型感染的患者主要并发症为中枢神经系统疾病，如脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、脑出血等[3]。2008年5月卫生部将手足口病纳入丙类法定传染病管理并开始实行网络直报[4]。

为了解泰安市2013年手足口病的发病率水平和流行特征，为制定防控策略和措施提供依据，本市疾控中心病毒学实验室将我市多家医院收集送检的粪便标本共505份，利用分子生物学方法进行肠道病毒检测，同时进行了EV71和Cox A 16的型别分析，现将检测结果报告如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 本地医院临床诊断为HFMD患者的粪便505份，低温送至病毒学实验室，当日不能检测的，放入-70℃冰柜保存。

1.2主要仪器和试剂 荧光定量PCR仪，ABI7500型，AB公司；低温高速离心机 3-18K，Sigma公司；台式高速离心机，德国Eppendorf公司；MaxwellTM16全自动核酸提取仪，美国Promega公司。RNA提取试剂盒为MaxwellTM16总RNA纯化试剂盒，检测试剂为上海硕世生物科技公司生产的肠道病毒实时荧光定量PCR专用试剂盒。

1.3标本处理 在生物安全柜内，取5 g左右的粪便标本，放入50 ml离心管，标记标本号，每管中加入10 ml PBS、1 g玻璃珠和1 ml氯仿；用振荡器剧烈振荡40 min；用冷冻离心机1500 r/min离心20 min；在生物安全柜中将每一份标本的上清液分别吸入2个带螺旋盖的冻存管中；一管粪便悬液冻存于-70℃作为备份，另一管用于病毒检测。

1.4病毒RNA的提取及逆转录反应 核酸提取采用Promega公司的MaxwellTM16 Total RNA Purification Kit，操作按照试剂说明书进行。荧光定量PCR法的反应体系和反应参数依据试剂说明书操作。

1.5统计学处理 采用描述性流行病学方法进行分析，数据采用SPSS17.0统计软件进行分析，组间率或构成比的比较用χ2检验，以P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1时间分布 2013年度泰安市手足口病主要为春末至盛夏季节集中发病，实验室在1月和2月份没有接收到标本，所接收的标本中4～8月份发病的标本最多，为373例，占全年总数的73.87%(如图1)。标本的收检时间分布见表1。

图1 2013年泰安市手足口病实验室收检标本时间分布

2.2人群分布 手足口病标本中性别情况为男性309例，女性196例，性别比例为1.58∶1，男女性别数量比较具有统计学意义(χ2=50.57，P<0.01)。发病年龄最小的患者6个月，最大的34岁。6岁及6岁以下病例为472例，占全部病例的93.47%(472/505)。病例的年龄分布情况见表2。

表1 2013年泰安市手足口病实验室收检标本时间分布

表2 2013年泰安市手足口病病例发病年龄构成比

2.3地区分布及检测结果 泰安市有6个县市区，各县市区均有疫情发生，其中泰山区和宁阳县疫情较重，所采集的标本也最多(如图2)。2013年泰安市手足口病各县区发病人数构成比，见表3。

图2 2013年泰安市手足口病各县区发病人数构成比

表3 2013年泰安市手足口病各县区发病人数构成比

实验室对本年度所采集的505例大便标本进行分析，其中EV71型阳性 141例，Cox A16型阳性 157例，EV71型和Cox A16型混合阳性 1例，其他肠道病毒(PE)阳性 183例，阳性率为36.24%，阴性 24例。EV71的阳性率为27.92%，Cox A16的阳性率为31.09%，PE阳性率为95.05%。EV71与Cox A16两者进行统计学分析，无显著性差异(χ2=1.22，P>0.05)。在各县市区中，新泰市的EV71感染率最高，为50.00%，肥城市的Cox A16感染率最高，为49.32%，对6个县市区之间的感染率进行分析，EV71的感染率有显著差异(χ2=31.79，P<0.01)。Cox A16感染率在6个县市区中也有显著性差异(χ2=30.65，P<0.01)。2013年泰安市各县市区手足口病大便标本阳性率的分布情况见表4。

表4 2013年泰安市各县市区大便标本的阳性率

3 讨 论

手足口病一般症状较轻，呈自限性，虽然目前治疗HFMD尚无特效药，但及时予以对症抗病毒处理是有效的[5]。但有些手足口病病毒还是会侵犯呼吸系统、中枢神经系统和心血管系统，引起脑膜炎脑炎(以脑干脑炎最为凶险)、脑脊髓炎、肺水肿循环障碍等，极少数病例病情危重，可致死亡，存活病例可留有后遗症[2]。

研究表明在确诊的手足口重症和死亡病例中EV71感染比例处于较高水平，EV71是手足口病重症和死亡病例主要病因[6]。而CoxA16同样可引起神经系统、呼吸系统以及循环系统并发症，尽管症状相对较轻，但仍可对患者健康产生重大损害[3]。手足口病发病分布广泛，无严格的地区性，四季均可发病，以夏秋季发病较多，冬季发病较少,常见于5岁以下的儿童。

2013年度泰安市的手足口病疫情主要发生春末至盛夏季节,实验室所接收的标本也以4～8月份发病的标本最多，合计为373例，占全年总数的73.86%。本年度手足口病标本患者的发病年龄最小6个月，最大的34岁。发病年龄主要集中在6岁以下儿童，病例为472例占全部病例的93.47%。从性别看，在各年龄分组中，男性人群的手足口病发病率高于女性人群，性别比例为1.58∶1。这可能与男童户外活动多于女童，从而导致暴露和感染手足口病的机会高于女童有关[7]。在地区分布上，泰安市6个县市区均有疫情发生，其中泰山区和宁阳县疫情较重，分析各县市区中的病原体感染情况，新泰市的EV71感染率最高，为50.00%，肥城市的Cox A16感染率最高，为49.32%。从全年看，泰安市整个地区的病原感染情况是EV71的阳性率为27.92%，Cox A16的阳性率为31.09%，经统计学处理，二者之间的差异无显著性，因此2013年度泰安市的手足口病的病原体以EV71和Cox A16并发为主。另外，505例手足口病例中检测有其他肠道病毒阳性183例，阳性率为36.24%，略高于Cox A16和EV71，提示在手足口病中检测其它病原体很有必要。

近几年，手足口病疫情暴发频繁，病原体的感染范围也非常广泛。因此，针对HFMD防控环节，要适时开展健康教育，向家长或广大市民介绍手足口病相关知识，对儿童玩具定期消毒，保持环境卫生,经常室内通风。儿童应养成良好的卫生习惯,勤洗手，勤换衣。在手足口病流行期内，家长应尽量减少带儿童到人群聚集、空气流通差的公共场所。如果发现病情，应及早治疗，以减少对儿童的危害。

[1] 杜潘艳，乔国昱，赵丽梅，等.手足口病患儿EV71、CoxA16及EBV和CMV的检测与临床意义[J].基础医学与临床，2012，34(2)：251-252.

[2] 陈 宏，苏俐.手足口病的研究现状[J].现代中西医结合杂志,2012，21(2)：224-226.

[3] 牛文柯，林艺，丁淑军,等.山东省EV71和CoxA16所致手足口病重症病例流行病学及临床特征分析[J].中国病原生物学杂志,2012，7(2)：101-104.

[4] 吕华坤， 张严峻，缪梓萍,等.浙江省2008-2009年手足口病疫情及病原学分析[J].中国公共卫生杂志,2012，28(1)：105-107.

[5] 蒋萍，王海昕.894例门诊手足口病流行病学特征分析及护理干预[J].临护理杂志，2011，10(4):4-6.

[6] 郭青，张春曦，王晓风,等. 2008-2009年中国大陆手足口病流行特征分析[J].疾病监测，2011，30(11):852-856．

[7] 徐辉，陈聪，姚杏娟,等．常州市2008-2009年5岁以下儿童手足口病流行特征分析[J].中国现代医学杂志，2011，21(2):275-278.