郭 丰，孙 华，郁敏燕，宋 健，马晓琳，张美云

（南通大学附属医院生殖医学中心，江苏226001）

精液质量对宫腔内人工授精妊娠结局的影响

郭 丰，孙 华，郁敏燕，宋 健，马晓琳，张美云

（南通大学附属医院生殖医学中心，江苏226001）

目的：研究宫腔内人工授精（IUI）精液质量对IUI妊娠结局的影响。方法：不孕症夫妇151对共进行294个IUI治疗周期，分析精子正常形态率和前向运动精子总数对妊娠率的影响。结果：294周期基础正常形态精子＜4%组与>4%组比较，妊娠率分别为7.86%和17.1%，差异有统计学意义（P<0.05）；294周期精液处理后前向运动精子总数＜10×106、～30×106和＞30×106的3组妊娠率分别为16.2%、15.1%和9.3%。前向运动精子总数＞30×106时妊娠率下降，但与其他两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：精子正常形态率和前向运动精子总数影响IUI妊娠率。

不孕症；宫腔内人工授精术；前向运动精子数；精子形态；妊娠率；Diff-Quik染色法

宫腔内人工授精术（IUI）作为一种简单、经济、无创技术，已广泛应用于不孕患者的助孕。IUI妊娠率在10%~20%，如何提高IUI妊娠率是临床关注焦点。影响IUI妊娠率的因素有不孕症原因、促排卵方案、精液质量、精子处理方法以及授精时机等。我院生殖医学中心2013年3月—2014年10月收治不孕症夫妇151对294个IUI治疗周期，本研究旨在通过分析精子形态和处理后前向运动精子总数对IUI妊娠率的影响，作为IUI患者提高妊娠率的参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 不孕症夫妇151例，女方年龄21~ 40岁，平均年龄（28.3±3.3）岁、男方年龄20~40岁，平均年龄（29.2±3.8）岁。不孕年限1~10年，平均不孕年限（3.14±1.96）年。共接受夫精人工授精294周期，所有患者均符合IUI适应证并经完善术前检查无禁忌证。输卵管碘油造影或宫腔镜下插管通液至少一侧输卵管通畅。

1.2 方法

1.2.1 排卵监测:采用自然周期或促排卵周期，自然周期：月经第10天开始阴道超声监测，记录子宫内膜厚度和分型。根据卵泡发育情况决定隔日或每日监测，当优势卵泡直径达17~20 mm，子宫内膜厚度大于7mm，肌肉注射 HCG 10 000 U或皮下注射GnRHa 0.1mg扳机。促排卵周期：使用克罗米芬（CC）、来曲唑（LE）和（或）尿促性腺素（HMG）诱导排卵，卵泡监测和扳机方法同自然周期，但应注意优势卵泡的大小和数目。扳机后24～36 h排卵前单次人工授精。

1.2.2 精液采集与检测:男方禁欲2~7天，在本中心取精室IUI日通过手淫法取精。精液收集到无菌取精杯中，交予男科学实验室，置于37℃水浴锅中，完全液化后进行精液洗涤处理。采用梯度离心法，试剂购于Vitrolife（Sweden）。取15mL试管1个，由底部向上分层加入1.5 mL 90%Sperm Grad TM，1.5mL 45%Sperm GradTM和1~2mL液化后的精液，350g离心20min，去上部液体，保留底部沉淀，加入3mL G-MOPS混匀，350g离心 10min，收集沉淀，加0.5mL G-MOPS混匀，取10μL镜检。精液检测：按照WHO第5版精液参数检测方法进行精液量、精子形态和功能等检测，采用精子分析仪（北京伟力）计数并计算前向运动精子数目。精子形态采用Diff-Quik染色法分析，油镜下计数200个精子形态，计算每份精液样本中正常形态精子百分率。精子形态学根据Kruger标准评估[1]。

1.2.3 人工授精：接受IUI妇女取膀胱截石位，暴露宫颈，用0.9%氯化钠甲硝唑溶液清洁宫颈及阴道穹隆部，用特制的人工授精管接1mL的注射器，吸取处理后的精子悬液0.5mL，将导管置入宫腔，缓慢将精子悬液注入，患者术后抬高臀部仰卧30min。所有接受IUI的患者术后均接受黄体支持。

1.2.4 妊娠判断：IUI后14日作血HCG测定，大于5IU/L为生化妊娠，IUI后5周阴道B超发现宫内孕囊和原始心管搏动，确诊为临床妊娠。以临床妊娠成功统计周期妊娠率。

1.3 统计学处理 应用SPSS15.0统计软件进行分析，计数资料组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

将294个周期基础精液检测结果按正常形态率分为2组：正常形态精子<4%组89个周期中临床妊娠成功7例，周期妊娠率7.9%；正常形态精子>4% 组205个周期中临床妊娠成功35例，周期妊娠率17.1%。正常形态精子>4%组妊娠率明显高于正常形态精子<4%组，两组比较差异有统计学意义（P< 0.05）。294个周期精液处理后前向运动精子总数分为3组：前向运动精子总数<10×106组74个周期中临床妊娠成功12例，周期妊娠率16.2%；前向运动精子总数～30×106组166个周期中临床妊娠成功25例，周期妊娠率15.1%；前向运动精子总数＞30×106组54个周期中临床妊娠成功5例，周期妊娠率9.3%。前向运动精子总数＞30×106组周期妊娠率较其他两组低，但差异无统计学意义（P>0.05）。

3 讨 论

预测IUI周期妊娠率比较困难，多数研究注重女方年龄、优势卵泡数、子宫内膜厚度、不孕年限等女方因素对妊娠率的影响，对精液质量与IUI妊娠率关系关注不多[2]。男方因素中精液量、精子密度、前向运动精子百分率、前向运动精子总数和精子形态等精液参数是主要内容，其中以精子形态和洗涤后的前向精子总数与妊娠关系最为重要[3]。根据Kruger精子形态学严格标准进行精子形态学评估，WHO第5版精液分析指南界定正常形态精子小于4%为畸精。研究发现精子正常形态率影响IUI妊娠结局，当精子正常形态大于4%时妊娠率增高[4-6]，但有学者认为精子形态对IUI妊娠率并无直接关系[7]。本研究发现精子正常形态大于4%时IUI妊娠率为17.1%。而当小于4%时妊娠率仅为7.86%，结果支持精子正常形态率对IUI妊娠结局有一定的预测价值。

精液处理后前向运动精子总数达到一定数量，才能获得较理想的IUI妊娠率。文献认为前向运动精子总数>10×106时，可获得较高的临床妊娠率[8]，另外一项研究认为洗涤后的前向精子总数达0.3×106到20×106行IUI都可获得较好的妊娠率[9]。但临床妊娠率并不会随着前向运动精子总数的进一步增加而升高。本研究发现当注入宫腔内的前向运动精子总数超过30×106时，妊娠率由16.2%下降至9.3%，两组差异虽无统计学意义，但过多的前向运动精子使IUI妊娠率呈下降趋势，可是本组样本数较少，需进一步扩大样本量来继续观察。过多的前向运动精子使IUI妊娠率下降，可能与下述因数有关：（1）大量精子进入女性生殖道，在与卵子结合时导致多精子受精；（2）大量精子死亡后产生毒素，对胚胎的运行和植入产生不良影响。所以对IUI洗涤后精子密度过高者进行适当稀释，使注入宫腔的精子总数在20×106以内，对提高IUI治疗效果有积极的意义。

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2014-11-12

1006-2440（2014）06-0713-02