吴小松，刘沐雨，曹玉发，李 建，姜 雪

(1.国家白酒产品质量监督检验中心，江苏宿迁223800;2.宿迁市产品质量监督检验所，江苏宿迁223800;3.江苏省宿迁质量技术监督局，江苏宿迁223800)

测量不确定度是表征合理的赋予被测量之值的分散性，是与测量结果相联系的参数［1］。一切测量过程都会不可避免的产生不确定度［2］。近年来随着国际贸易的不断发展，对检测结果的国际互认提出了要求，为实现检测结果的互认，测量不确定度得到了广泛的应用［3］。检测结果的不确定度反映了结果的可靠性，同时可以反映出检测实验室人员技术、仪器设备的水平。本实验通过对婴儿奶粉中维生素A 含量的测定过程中不确定度进行分析评定［4-5］，以期找出对实验结果影响较大的环节，在今后的检验过程中加以关注，进一步提高本实验室检测结果的可靠性。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

实验用奶粉为本实验室某次检验的余样，在样品处理阶段向其中加入了适量的维生素A 纯品，并进行充分混匀。

e2695 高效液相色谱仪，配紫外检测器 美国Waters。

1.2 实验方法

本实验参照相关国家标准［6］，对试样中维生素A的含量进行测定。

1.2.1 样品处理 称取混合均匀的奶粉样品10g 于250mL 三角瓶中，加约50mL 45℃左右的水使其溶解，混合均匀［1］。

1.2.2待测液的制备 本实验待测液按照GB 5413.9 -2010 标准中的方法进行制备［6］。

1.2.3 色谱条件 色谱柱:C18(250 ×4.6mm)，流动相:甲醇，流速:1.0mL/min，检测波长:325nm，柱温:35℃，进样量:20μL。

1.3 测定

从上述容量瓶中准确移取2.0mL 石油醚溶液，氮吹仪吹干，加入5.0mL 甲醇，振荡溶解，以5000r/min的速度离心10min，静置，待测。

式中:X 为试样中维生素A 的含量(μg/g);CS为从标准曲线得到的维生素A 待测液的浓度(μg/mL);v1为提取液总体积(mL);v2为从提取液v1中分取的溶液体积(mL);v3为实验溶液最终体积(mL);m 为称样质量，单位为g。

1.4 不确定度来源

从测试全过程分析不确定度来源包括以下几方面:样品测定过程中随机效应产生的不确定度;样品前处理过程产生的不确定度;标准溶液浓度的不确定度;校准曲线拟合产生的不确定度。

2 结果与分析

2.1 样品测定过程中随机效应产生的不确定度

2.2 样品前处理过程中产生的不确定度

样品前处理过程中的不确定度产生于奶粉样品的称量、提取液的定容、分取及分取后的定容。

4.要使全体党员党内生活制度科学化。《党章》规定，每一个党员都要编入党的一个支部中生活，而支部生活又由种种制度来约束，如“三会一课”制度、民主评议制度、联系群众制度等。在党的思想文化建设过程中，要使这些制度科学化，成为每一名党员自觉遵守的准则和自我约束的标尺，成为每一名党员工作、学习、生活中的一个不可分割的部分，中国共产党就会在中国特色社会主义建设事业中，在以人为本构建和谐社会的过程中，发挥出最大的能量，创造出最优秀的业绩。

合并三项，移液管带来的标准不确定度为u(V3)=2.61 ×10-3，其相对标准不确定度为urel(V2)=1.31×10-3。

2.3 标准溶液浓度产生的不确定度

标准溶液浓度的不确定度来源于其纯度P、质量m、体积V。

2.3.3 体积产生的不确定度

合并三项，容量瓶带来的合成标准不确定度为u(V2)=6.37 ×10-2，其相对合成标准不确定度为urel(V3)=6.37 ×10-4。

2.3.3.2 稀释用移液管产生的不确定度 标准溶液稀释分别用到1mL、2mL 移液管。

合并三项，移液管带来的标准不确定度为u(V4)=2.45 ×10-3，其相对标准不确定度为urel(V4)=2.45×10-3。

2mL 移液管产生的不确定度:与2.2.3 相同，2mL移液管带来的标准不确定度为u(V5)=2.61 ×10-3，其相对标准不确定度为urel(V5)=1.31 ×10-3。

2.4 标准曲线拟合产生的不确定度

配制了10、20、30、40、50μg/mL 的维生素A 标准溶液，每个浓度进行3 次测定，得到表1 的数据，并对峰面积-浓度曲线进行拟合，得到方程y =a +bx，其中a =-172497，b =76448，r =0.9999。

表1 最小二乘法拟合维生素A-峰面积Table 1 Least squares fitting vitamin A-peak area

式中N 为求回归方程时，测量y 的总次数(N =mn =15，m =3，n =5)，i 为下标，表示标准溶液的序数(i =1，2，3，…，n)，j 为下标，指标准溶液的第几次测定(j =1，…，m)。根据表1，计算S =71558.4。

2.5 合成不确定度

表2 奶粉中维生素A 含量测定的不确定度分量Table 2 The individual uncertainty of determination of vitamin A in milk

2.6 扩展不确定度

取包含因子k =2，则扩展不确定度为U(X)=1.496。该奶粉样品中维生素A 含量的测定结果为X =(15.013 ±1.496)μg/g，k =2。

3 结论

本实验采用HPLC 法测定奶粉样品中维生素A的含量，结果为(15.013 ±1.496)μg/g，k =2。本实验从测量重复性，称量、定容、标准品的纯度、标准曲线拟合等几个方面进行不确定度的评定，通过对不确定度各分量的评定结果分析可知，不确定度主要来源于人员的重复测定，标准品的纯度，标准曲线的拟合，其中标准曲线拟合在不确定度合成中产生的贡献最大，这与众多类似的研究结果是一致的［2，7-8］，因此在今后的类似检测过程中均应对标准曲线的拟合过程加强控制。

［1］JJF 1059-1999.测量不确定度评估与表示［S］.

［2］张淑霞，鲁慧芳，高亚辉，等.GC-MS-MS 法测定浓缩苹果汁中对硫磷残留量的不确定度评定［J］.《粮油加工》，2010(10):153-156.

［3］李安.质检测量中不确定度评定［J］.误差与不确定度，2005(8):67-68.

［4］中国实验室国家认可委员会.化学分析中的不确定度评估指南［M］.北京:中国计量出版社，2002.

［5］国家质量技术监督司计量司.测量不确定度评定与表示指南［M］.北京:中国计量出版社，2000.

［6］GB5413.9-2010.食品安全国家标准 婴儿食品和乳品中维生素A、D、E 的测定［S］.

［7］杨秀培，肖丹，山桂云，等.白酒中己酸乙酯测定的不确定度评估［J］.食品科学，2006，27(7):214-217.

［8］丁明，屈明华，韩素芳.液相色谱测定茶油中维生素E 结果的不确定度评定［J］.中国粮油学报，2008，23(5):190-193.