李 旺，孙二刚，刘永磊，程传红

（1.河南科技大学宏翔发酵饲料实验室，河南 洛阳 471003；2.河南宏翔生物科技有限公司，河南 汝州 467500）

纤维素是植物细胞壁的主要成分，主要来源于植物，由植物通过光合作用的方式将太阳能转化为生物能并储存在植物体内；是地球上含量最高、最丰富的可再生资源[1]。纤维素最终需要在纤维素酶的作用下分解为葡萄糖才能应用在动物生产中。

枯草芽孢杆菌是动物的益生菌，本身具有很强的产酶能力，各种消化酶丰富，是现在畜牧业益生菌的主要菌种之一。纤维素酶的来源主要是微生物，包括细菌、真菌和放线菌。目前饲用纤维素酶主要来自真菌的霉菌，由于宿主存在不安全因素，故多以纯化酶的形式应用于动物生产[2]。本研究将产纤维素酶的枯草芽孢杆菌作为益生菌饲喂肉鸡，既培养消化道优势益生菌群，又增加可分解日粮纤维素的纤维素酶含量，进而提高日粮粗纤维的消化率，提高鸡的生产性能，并可以通过增加日粮粗纤维的用量来节约饲养成本。

1 材料与方法

1.1 试验材料

枯草芽孢杆菌为纤维素酶产生菌，实验室保存。

1.2 试验日粮

试验日粮组成及营养水平见表1，前期为颗粒料，后期为粉料。

表1 日粮组成及营养水平

1.3 试验设计

试验选用1日龄AA肉仔鸡96只，随机分为4组（对照组和试验1、2、3组），每组设3个重复，每个重复8只鸡。对照组每10日灌服培养液（LB）400 μL，试验组分别每10日口腔灌服枯草芽孢杆菌菌液200、300、400 μL。自由采食与饮水。在饲养的20和40 d从每个重复组中任意选出3只鸡单独饲养，用全收粪法收集每个重复组样本的鸡粪，测定各个试验样品粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、干物质含量，计算无氮浸出物含量以及营养成分的消化率。

1.4 数据处理

试验数据均采用Excel进行整理，用SPSS17.0统计软件的One Way ANOVA方法进行方差分析，结果以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 添加枯草芽孢杆菌对鸡饲料粗纤维消化率的影响

添加枯草芽孢杆菌对鸡饲料粗纤维消化率的影响见表2。

表2 枯草芽孢杆菌对前期鸡饲料粗纤维消化率的影响

由表2可以看出，添加枯草芽孢杆菌的3个试验组对粗纤维的消化率都高于对照组，试验3组对粗纤维的消化率最大。试验结果得出，3个试验组对粗纤维的消化率与对照组相比差异都显著（P＜0.05）；试验3组与试验1组相比差异显著（P＜0.05）。结果表明，添加产纤维素酶枯草芽孢杆菌可以显著提高前期鸡饲料粗纤维的消化率（P＜0.05），并且在一定范围内，随着添加量的增大，对粗纤维的消化率增大。

2.2 枯草芽孢杆菌对后期鸡饲料粗纤维消化率的影响

枯草芽孢杆菌对后期鸡饲料粗纤维消化率的影响见表3。

表3 枯草芽孢杆菌对后期鸡饲料粗纤维消化率的影响

由表3可以看出，对照组对粗纤维的消化率显著低于3个试验组（P＜0.05），试验3组对粗纤维的消化率最大。3个试验组对粗纤维的消化率与对照组相比差异都显著（P＜0.05），试验3组与试验1组相比差异显著（P＜0.05）。结果表明，添加枯草芽孢杆菌可以显著提高后期鸡饲料粗纤维的消化率，且随着添加量增加效果越好。

2.3 添加枯草芽孢杆菌对饲料养分消化率的影响

添加枯草芽孢杆菌对饲料养分消化率的影响见表4。

表4 枯草芽孢杆菌对前期饲料养分消化率的影响%

由表4可以看出，在粗蛋白质消化率上，3个试验组均显著高于对照组（P＜0.05），试验2组显著高于试验3组（P＜0.05），表明添加枯草芽孢杆菌能够提高肉鸡日粮粗蛋白质的消化率。在粗脂肪的消化率上，对照组与试验1、2组相比差异不显著（P＞0.05），对照组显著低于试验3组（P＜0.05）。表明灌服菌液对饲料粗脂肪的消化率影响不显著（P＞0.05）。在粗灰分的消化率上，对照组显著低于3个试验组（P＜0.05）。表明灌服枯草芽孢杆菌对前期饲料粗灰分的消化率有提高作用。在干物质消化率上，试验3组最高，对照组均显著低于3个试验组（P＜0.05）。表明灌服枯草芽孢杆菌对前期饲料干物质的消化率有提高作用。在无氮浸出物消化率上，对照组与3个试验组相比差异均显著（P＜0.05），试验组之间差异不显著（P＞0.05）。结果表明，灌服枯草芽孢杆菌不能提高前期饲料无氮浸出物消化率。

2.4 枯草芽孢杆菌对生长后期鸡饲料养分消化率的影响

枯草芽孢杆菌对生长后期鸡饲料养分消化率的影响见表5。

表5 枯草芽孢杆菌对生长后期鸡饲料养分消化率的影响%

由表5可以看出，在生长后期饲料粗蛋白质消化率上，对照组显著高于3个试验组（P＜0.05）。表明灌服400 μL菌液对后期饲料粗蛋白质的消化率有提高作用。在后期饲料粗脂肪消化率上，对照组显著高于3个试验组（P＜0.05），表明灌服枯草芽孢杆菌对生长后期饲料粗脂肪消化率无促进作用。在粗灰分的消化率上，对照组显著低于试验组（P＜0.05）。结果表明，添加枯草芽孢杆菌对生长后期饲料粗灰分的消化率有提高作用，且本试验中添加400 μL效果最好。在干物质的消化率上，对照组显著低于3个试验组（P＜0.05）。表明灌服枯草芽孢杆菌对生长后期饲料干物质的消化率有提高作用。在无氮浸出物消化率上，对照组显著低于试验1、3组（P＜0.05）。结果表明，添加枯草芽孢杆菌对生长后期饲料无氮浸出物的消化率有提高作用。

3 讨 论

3.1 灌服枯草芽孢杆菌对鸡饲料粗纤维消化率的影响

无论是蛋鸡还是肉鸡，均不能分泌纤维素酶，主要是通过嗉囊和盲肠中的微生物对纤维进行发酵降解，对饲料粗纤维的消化率一般较低，通过添加外源纤维素酶可以对这一限制有所改善。Wang等在蛋鸡日粮中加入纤维素酶，结果显著提高了日粮纤维素表观消化率（P＜0.05），说明鸡日粮中添加纤维素酶，可以增加饲料粗纤维的分解，从而提高饲料粗纤维的消化率[3]。本试验通过灌服枯草芽孢杆菌，使肉鸡消化道内含有大量产纤维素酶枯草芽孢杆菌，并分泌纤维素酶，使日粮粗纤维消化率提高。

3.2 灌服枯草芽孢杆菌对鸡饲料养分消化率的影响

枯草芽孢杆菌富含多种消化酶，并且具有完整的分泌系统，能够将所产消化酶分泌到细胞外。并且由于纤维素酶的添加，破坏细胞壁结构，释放出了更多的粗蛋白质。Kemme等研究表明，添加纤维素酶900 U·kg-1，提高了蛋白质的消化率，也提高了赖氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苏氨酸的表观消化率（P＜0.05）[4]。张克英等研究了添加纤维素酶对断奶仔猪蛋白质、氨基酸等消化率的影响，结果表明，添加纤维素酶可以显著提高蛋白质生物学效价和赖氨酸的回肠消化率（P＜0.05）[5]。王振来等试验表明，添加纤维素酶为主的复合酶显著地提高了仔猪对粗脂肪的表观消化率[6]。许多研究也表明，添加纤维素酶对饲料粗脂肪的消化率有提高作用。本试验结果表明，灌服产纤维素酶枯草芽孢杆菌对肉鸡日粮粗脂肪消化率无显著影响（P＞0.05）。在主要营养物质消化率得到提高的情况下，日粮干物质和灰分的消化率得以提高。王振来等试验表明，添加纤维素酶为主的复合酶显著地提高了仔猪对粗灰分的表观消化率（P＜0.05）[6]。杨桂芹等在雏鹅日粮中添加活性为2000 U·g-1的纤维素酶制剂0.1%，结果显示，干物质的表观消化率消化率提高了8.08%[7]。本试验对饲料无氮浸出物的消化率前期不显著，后期得到提高，原因是前期肉鸡自身消化无氮浸出物能力差，加上多糖等粗纤维分解产物使得消化率降低，后期随着肉鸡消化道功能健全，消化率提高。许梓荣等报道，含麦麸30%的肉鸡日粮中添加复合酶0.005%，结果干物质消化率提高10.58%，粗纤维消化率提高25.9%，粗脂肪消化率提高21.76%[8]。王玲等以纤维素酶为主的复合酶制剂饲喂肉雏鸡，试验结果表明，饲料干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维的表观消化率均极显著提高（P＜0.05）[9]。郑文明在艾维茵肉仔鸡高苜蓿粉日粮中添加纤维素复合酶，结果表明，试验组比对照组平均日增重、日采食量、皮肤颜色和胫颜色级别分别提高了5.05%、3.41%、0.7%和1.25%；腹脂率降低了0.67个百分点；能量的表观代谢率、粗蛋白质的表观消化率均有所提高，但组间差异均不显著（P＜0.05）[10]。

[1]Lin J S,Chen C C,Hu H Y.Homologous and heterologous expres⁃sion of chitosanase gene frombacillus subtilisNCHU-05[J].Jour⁃nal of Biotechnology,2010(150):354.

[2]Lee S J,Pan J G,Park S H,et al.Development of a stationary phase-specific autoinducible expression system inbacillus subtilis[J].Journal of Biotechnology,2010（149）:16-20.

[3]Wang L J,Shan A S,Song J C.Performance and nutrient utiliza⁃tion of layers fed diet supplemented with microbial phytase and cellulase[J].Journal of Northeast Agricultural University,2003,10（1）:33-39.

[4]Kemme P A.Impact on nutrient digestibility and factors affecting phytase efficacy[J].Phylate and Phytases in Pig Nutrition,1998,7（1）:67-72.

[5]张克英,陈代文,余冰,等.饲粮中添加植酸酶对断奶仔猪生长性能及蛋白质、氨基酸和磷利用率的影响[J].动物营养学报,2001,13（3）:19-24.

[6]王振来.高次粉饲粮中添加复合酶制剂对仔猪生长和消化的影响[J].河北畜牧兽医,2005,21（6）:3-4.

[7]杨桂芹,王芬,韩国宝,等.纤维素酶制剂对雏鹅饲粮营养物质表观消化率的影响[J].畜牧与兽医,2005,37（3）:21-23.

[8]许梓荣,钱利纯,孙建义.高麦麸饲粮中添加β-葡聚糖酶、木聚糖酶和纤维素酶对肉鸡作用效果的研究[J].动物营养学报,2000,11（1）:61.

[9]王玲,张惠玲.复合酶制剂对肉雏鸡消化机能的影响[J].饲料工业,2000,21（9）:32-33.

[10]郑文明.添加纤维素复合酶对肉仔鸡生长的影响[J].饲料博览,2006（8）:4-6.