任 桥，徐 玉，刘焕奇，毕可东

（青岛农业大学动物科技学院，山东 青岛266109）

2012年1月山东省文登市一水貂养殖场突然发病。该水貂场饲养水貂已有4年，水貂共400只，母320只，公80只。从2011年12月开始发病，病程有一个月，死亡90多只，曾在某动物医院按肠炎用氟苯尼考、头孢他啶和黄芪多糖治疗过，有短暂好转，但现又反复发病。第二次发病后，将病死貂送来检验。本病通过临床症状、病理剖检及细菌学检查，疑似为气单胞杆菌和大肠杆菌混合感染。

1 临床症状

病貂多数突然发病，表现食欲减退或废绝，精神委靡，体温升高到40.5℃以上。继而出现腹泻，腹泻先以黄色粪便出现，后转为排煤焦油样的粪便。病程一般2～3d，快则1d左右死亡，慢则5d左右死亡。

2 病理变化

肺脏有大小不等的出血点或出血斑；肝脏弥漫性出血，红黄相间，边缘光滑，稍脆；脾脏肿，有少量黑色坏死灶；肾脏表面有出血点；肠系膜淋巴结肿大，有出血、坏死；胃内容物呈煤焦油样。

3 实验室诊断

3.1 涂片镜检 取新鲜病死貂的心血、肝脏、肺脏、脾脏直接进行涂片，分别进行革兰染色，显微镜下观察，见有菌体两端钝圆的的革兰阴性杆菌，单个或成对存在；同时发现一种革兰阴性直杆菌，无荚膜，散在或成对。

3.2 分离培养 取新鲜病死貂的肝脏、肺脏、脾脏及肠黏膜等病料分别接种于营养琼脂和鲜血琼脂平板上，放入37℃恒温培养箱中培养24h。结果普通培养基上长出圆形、边缘整齐、中央隆起、表面湿润、光滑、半透明、颜色由灰白色至浅黄色、带有芳香气味及灰色、边缘整齐、光滑、表面有光泽的两种小菌落。挑选有芳香气味、浅黄色的可疑菌落再接种于鲜血琼脂培养基上进行纯培养，得到细菌的纯培养物，涂片镜检见有大量两端钝圆的革兰阴性杆菌（以下简称病菌Ⅰ）。挑取另一可疑菌落再接种于伊红美蓝培养基，在培养基上产生黑色带金属闪光的菌落，涂片镜检见有大量的革兰阴性直杆菌（以下简称病菌Ⅱ）。

3.3 病菌Ⅰ的鉴别

3.3.1 生化试验 取分离纯化后的培养菌进行生化试验。结果表明，本菌能利用甘油、葡萄糖，产酸产气；发酵水杨素、阿拉伯糖、蔗糖、麦芽糖、甘露糖；发酵乳糖、棉籽糖和肌醇。靛基质、M.R、V－P阳性，氧化酶、过氧化氢酶阳性。该生化反应试验结果与气单胞杆菌生化反应特点相符。

3.3.2 动物试验 采取濒死或刚死不久的病死貂的肝、脾病变组织，按比例制成1∶10的悬液，或纯分离菌24h培养物，经口或皮下接种敏感水貂。通常3～7d致死。也可给小鼠腹腔注射，在2～4d发病死亡。从死亡鼠的心血中分离到与接种菌菌落形态Ⅰ菌体涂片、染色特征一致的细菌。根据以上综合诊断，病菌Ⅰ为气单胞杆菌。

3.4 病菌Ⅱ的鉴别

3.4.1 生化试验 取分离纯化后的培养菌进行明胶穿刺培养后进行生化试验，结果表明，本菌能发酵葡萄糖产酸产气；能发酵乳糖、甘露糖、D－木糖、海藻糖；吲哚和甲基红试验均为阳性；V－P和枸橼酸盐试验均为阴性；不产生硫化氢；不液化明胶。该生化反应试验结果与大肠杆菌生化反应特点相符。

3.4.2 动物试验 取分离菌的肉汤22h培养液0.1mL、0.2mL，分别腹腔接种20g左右的小鼠各2只，18h4只小鼠全部死亡，对照组正常。从死亡鼠的心血中分离到与接种菌菌落形态Ⅱ菌体涂片、染色特征一致的细菌。根据以上综合诊断，病菌Ⅱ为大肠杆菌。

4 诊断结果

综合临床症状、病理变化、实验室诊断，确诊为气单胞杆菌和大肠杆菌混合感染。

5 药敏试验

分别选择新霉素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、先锋霉素、头孢噻呋、复方新诺明、氨苄青霉素、氟哌酸、氯霉素、林可霉素及强力霉素等10种药物进行药敏试验，新霉素和头孢噻呋高敏；强力霉素中敏；其他各种药物未出现抑菌环。

6 防治

6.1 加强饲养管理 搞好卫生消毒工作，隔离发病貂，对笼舍、地面环境、粪便等用5%热火碱水喷洒消毒，每天1次，连用1周；食槽及饮水槽，彻底清洗消毒，每天2次。对病死貂焚烧深埋，杜绝再用来饲喂貂。鱼类饲料必须用自来水清洗干净、充分煮熟后饲喂，不得生喂。供给新鲜清洁、无污染的饮水，避免本病的继续传播。

6.2 根据药敏结果，选用敏感的药物进行治疗 按临床常规剂量注射头孢噻呋，1次/日，连用3d；新霉素，口服，15g/kg饲料，连用5d；葡糖糖、维生素C和复合维生素B 50mg/kg饲料，连用2周。

7 讨论

水貂气单胞菌病又称水貂出血性败血症，是由嗜水气单胞杆菌引起的一种出血性败血性传染病。嗜水气单胞杆菌广泛存在于淡水、海水、含有有机物的淤泥，以及鱼类的体表；健康鱼的带菌率甚高，因此，水域和鱼类是本病的主要传染源［1］。本病主要由污染的鱼类饲料通过消化道感染发病。在饥饿、饲料蒸煮不完全、抵抗力降低等因素诱发下可引起暴发流行。

大肠杆菌是肠道的一种常在菌，属于条件致病菌，当水貂机体抵抗力降低时才呈现致病性。在气候突变、管理不当时，幼貂容易受寒感冒，导致机体抵抗力下降，环境中和体内的条件性致病菌容易入侵机体，造成水貂发生疾病［2］。

该貂场发病原因可能是由于鱼类饲料长时间生喂，使之存在于鱼体表面的嗜水气单胞杆菌感染机体导致发病，再加之气候忽冷忽热，水貂场的消毒工作不到位，继发大肠杆菌的感染。通过药敏试验表明，嗜水气单胞杆菌和大肠杆菌对多种抗生素都有一定的耐药性，可能与平时滥用药物有关。所以治疗此类疾病时最好尽早做出正确诊断，并通过药敏试验，选择最敏感药物，才能收到显著的防治效果，避免浪费药物和延误防治时机，减少损失。

［1］ 钱国成.毛皮动物细菌性病害（6）［J］.特种经济动植物，2009（5）：19－20.

［2］ 邹玲.水貂大肠杆菌病的诊断［J］.中国畜牧兽医，2006，36（9）：147－148.

［3］ 吕俊，徐镔蕊.鸡大肠杆菌病的实验室诊断［J］.中国畜牧兽医，2008，35（9）：98－99.