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丙泊酚预处理对单肺机械通气大鼠肺组织血红素氧合酶-1表达的影响

2012-12-17巴玉峰冯惠民李长生程金华邢文群刘宝兴

郑州大学学报(医学版) 2012年4期
关键词:单肺组织细胞血红素

巴玉峰,冯惠民,李长生,李 印 ,程金华,邢文群,刘宝兴

1)河南省肿瘤医院胸外科 郑州450003 2)河南省肿瘤医院麻醉科 郑州450003

#通讯作者,男,1967年8月生,博士,主任医师,研究方向:肺癌综合治疗,E-mail:liyin825@yahoo.com.cn

单肺机械通气技术(one-lung ventilation,OLV)不仅可以充分暴露手术视野,为术者创造良好的操作条件,还可以避免术侧肺的分泌物或渗出物流入健侧通气肺,减少肺部并发症,现已广泛应用于心胸外科手术。但OLV 常引起肺内分流增加,导致低氧血症、低氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV),而通气过程中的过度牵张和OLV 后术侧肺复张均可对肺组织造成损伤[1]。血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是一种诱生型应激蛋白,广泛存在于哺乳动物组织细胞中,可在缺氧、缺血等多种应激状态下表达[2]。HO-1 及其催化产物组成了特殊的机体内源性保护系统,通过抗氧化、抗炎、抗凋亡等机制对组织器官起到保护作用[3-6]。丙泊酚是一种常用的静脉麻醉药。研究[7-8]表明,在离体和在体实验中丙泊酚预处理均具有器官保护作用。作者观察了丙泊酚预处理对OLV 大鼠肺组织HO-1 表达的影响,探讨丙泊酚对OLV 肺损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物与试剂 健康雄性SD 大鼠36 只,体质量220~250 g,由河南省实验动物中心提供。实验前禁食6 h,自由饮水。兔抗鼠HO-1 多克隆抗体购于美国Cell Signaling 公司,组织总蛋白抽提试剂盒购于上海蓝基生物公司,凝胶扫描成像系统购自美国Bio-Rad 公司。

1.2 动物分组与处理 36 只大鼠随机分成6组:双肺通气(T)组,右侧单肺通气-左肺(OL)组,右侧单肺通气-右肺(OR)组,丙泊酚-右侧单肺通气-左肺(POL)组,丙泊酚-右侧单肺通气-右肺(POR)组,对照(C)组,每组6 只。T、OL、OR、POL 及POR组大鼠均戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉,尾静脉液体维持泵入生理盐水(0.5 mL/min),右侧卧位。OL、OR、POL、POR组大鼠开胸后,插入自制气管导管,给予维库溴铵(2 mg/kg),待呼吸停止后,接微型动物呼吸机进行右肺单肺通气(潮气量5 mL/kg,呼吸频率60 min-1)。POL 和POR组大鼠在戊巴比妥钠麻醉前1 h 尾静脉泵入丙泊酚(50 mg/kg,30 min 泵完),苏醒30 min。T组大鼠开胸后,插入自制气管导管,给予维库溴铵(2 mg/kg),待呼吸停止后,接呼吸机进行双肺通气(潮气量10 mL/kg,呼吸频率60 min-1)。通气时间均为1 h。T、OL 和POL组大鼠取左全肺,OR 和POR组大鼠取右全肺,C组戊巴比妥钠麻醉后直接开胸取左全肺。

1.3 W/D 测定 肺组织取出后,称量肺脏标本湿质量(W),后置于80℃烤箱烘烤24 h,称干质量(D),计算湿/干质量比(W/D)。

1.4 肺组织HO-1 蛋白表达 取20 mg 肺组织裂解、抽提蛋白,采用Western blot 方法检测肺组织HO-1 蛋白表达。结果以HO-1 与GAPDH 的平均灰度比值表示。

1.5 统计学处理 采用SPSS 11.5 处理数据。各组大鼠肺组织W/D 和HO-1 蛋白表达的比较应用单因素方差分析和SNK-q 检验。检验水准α=0.05。

2 结果

各组大鼠肺组织W/D 和HO-1 蛋白比较的比较见图1、表1。

图1 各组大鼠肺组织HO-1 蛋白表达

表1 各组大鼠肺组织W/D 及HO-1 蛋白的表达水平比较(n=6)

3 讨论

许多现代心胸外科手术得益于OLV 的成熟和开展,但OLV 可以引起一系列病理生理改变,导致肺脏或其他脏器的损伤[9-10]。该研究表明,单肺通气1 h,OL、OR、POL 和POR组肺组织W/D 明显高于C 和T组,提示无论通气侧肺还是非通气侧肺,都有不同程度的肺水肿。这可能是肺缺血/再灌注、肺萎缩/复张、肺量化应激和机械通气等多因素造成的肺损伤,经过最后的共同途径引起肺组织细胞和炎症介质介导的炎性反应,以水肿形式表现出来[11]。

HO 是哺乳动物组织细胞微粒体中的一种血红素代谢的起始酶和限速酶,有3 种异构体:HO-1、HO-2 和HO-3。HO-1 在体内主要分布于肺、心、肾和肝。在正常机体组织中,HO-1 主要功能是降解血红素,表达水平较低。HO-1 在多种因素(缺氧、高温、缺血、细胞因子、机械-化学损伤等)刺激后诱导表达[9,12]。HO-1 通过抑制细胞脂质膜的氧化,清除自由基,抑制炎症细胞的趋化、黏附和浸润等机制减轻肺组织水肿[10]。

丙泊酚可清除氧自由基,减轻心肌氧化应激损伤,发挥心肌保护作用[13]。该研究结果表明,OL 和OR组大鼠肺组织HO-1 蛋白的表达增高,可能系肺机械通气、肺组织自身炎性反应等原因,诱导并上调了HO-1 的表达,而POL 和POR组大鼠肺组织HO-1 的表达明显高于OL 和OR组,提示丙泊酚预处理可上调肺组织HO-1 的表达。

综上所述,丙泊酚预处理可能通过上调OLV 大鼠肺组织HO-1 的表达,减轻OLV 所造成的组织水肿。

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