刘 微 秦海翔 黄晓东 常 影 范红艳 王艳春 顾饶胜 任 旷

(吉林医药学院药理教研室，吉林 吉林 132012)

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)为杜仲科、杜仲属植物，又名思仙、思仲、丝绵树、木棉等〔1〕，常以其树皮干燥后入药，为我国传统中药材，具有降低血压、血脂、抗疲劳、抗老化及安胎等功效〔2，3〕。杜仲木质素为杜仲的有效成分之一，具有较显著的降低血压的作用〔4〕。本实验观察杜仲木质素对自发性高血压大鼠(SHRsp)脑卒中的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 SHRsp由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，120只，雌雄各半，体重(160±20)g。雌雄分笼喂养，每笼10只，吉林大学实验动物中心饲养。

1.1.2 药物与试剂 杜仲木质素提取物，吉林大学中药化学实验室提供;阳性药物：尼莫地平注射液，德国拜耳公司生产(批号：BH20110495);阴性对照：5%碳酸氢钠注射液，河南双鹤华利药业生产(批号：H41021681);NaCl，安徽华源生物药业有限公司生产(批号：11092302)。

1.1.3 仪器设备 BP-600A型全自动大鼠无创血压测量仪，成都泰盟有限公司生产。

1.2 方法

1.2.1 脑卒中模型制造方法 7周龄SHRsp自由饮用高浓度盐水(0.9%氯化钠溶液)连续2个月后给予1%氯化钠溶液，大鼠陆续出现轻重不等的脑卒中症状。脑卒中发作判断标准：(1)单肢或前双肢或全身抽动;(2)出现偏瘫或全身瘫痪，腹部贴地不能站立;(3)较重者为全身细小震颤，最后爬伏，软瘫，甚至死亡。以上各项中有些动物伴有激惹现象(跳或蹿)，凡出现以上一项症状者，评定为脑卒中发作〔5〕。

1.2.2 分组及给药 先随机取出20只大鼠，作为空白组(5%碳酸氢钠)，喂给普通饮用水。对其他大鼠进行造模，造模完成后，将动物按随机分组原则分成5组：模型组(5%碳酸氢钠)、杜仲木质素低(1 mg/kg)、中(2 mg/kg)、高(3 mg/kg)剂量组、阳性药尼莫地平组(900 μg/kg)，每组20只，其中空白组喂给普通饮用水，其他各组喂给1%的生理盐水。

用5%碳酸氢钠溶液配制成相应的浓度，使给药剂量均为0.2 ml/100 g大鼠。每天给药一次，肌肉注射。模型组和空白组大鼠肌肉注射同等剂量的5%碳酸氢钠溶液。

1.2.3 观察指标

1.2.3.1 脑卒中行为学评分 自开始给药起，每隔2 d观察大鼠行为学变化，对每只大鼠进行脑卒中行为学评分，评分参考日本评分标准〔6〕。

1.2.3.2 动脉收缩压(SAP)、心率(HR)开始给药前及给药42 d后用全自动大鼠无创血压测量仪测定所有大鼠SAP、HR各一次。

1.2.3.3 存活时间及死亡率 每天对实验动物进行观测，如出现死亡，记录其组号、编号、死亡时间。比较观察各组的存活时间和死亡率的差别。

1.2.3.4 体重变化 记录造模前、给药前及给药1个月后所有大鼠的体重。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行分析，实验数据均以s表示，采用χ2检验和t检验。

2 结果

2.1 脑卒中行为学评分结果 5组喂给高浓度盐水的SHRsp不断发生脑卒中，表现为激惹、阵发性抽搐、瘫痪、头大、进食少、尿失禁、竖毛、消瘦等症状。空白组脑卒中行为学评分显著低于模型组(P＜0.01)，表明脑卒中模型建立成功。从给药开始，杜仲木质素给药组行为学评分呈逐渐下降趋势，其中以中、高剂量组下降趋势尤为明显(P＜0.05)，说明这两个剂量均可显著改善脑卒中神经行为学功能，低剂量组与模型组比较也有一定抑制趋势，但无统计学意义。见表1。

2.2 SAP和HR的变化 随着实验进行，SHRSR血压均有所上升。给药42 d后模型组大鼠的SAP与空白组比较有显著差异(P＜0.01)。中剂量和高剂量组给药后SAP有一定的降低趋势，与模型组比较具有显著差异(P＜0.05)。尼莫地平组给药后有较强的降低血压的趋势，与模型组比较有显著差异(P＜0.01)。给药前后，大鼠HR均无明显变化。见表2。

表1 各组SHRsp脑卒中行为学评分( s ，n=20)

表1 各组SHRsp脑卒中行为学评分( s ，n=20)

与模型组比较：1)P ＜0.05，2)P ＜0.01;下表同

6±0.24低剂量组 2.53±0.44 2.66±0.39 2.68±0.42 2.72±0.41 2.78±0.10中剂量组 2.54±0.37 2.53±0.47 2.57±0.51 2.44±0.0.281)2.66±0.341)高剂量组 2.58±0.18 2.71±0.24 2.49±0.50 2.15±0.501)1.85±0.611)阳性药组 2.49±0.39 2.35±0.51 2.26±0.251)1.83±0.382)1.47±0.472)空白组 0.41±0.212)0.57±0.182)0.91±0.122)1.03±0.182)1.37±0.201)1～10 d 11～21 d 22～31 d 32～42 d模型组 2.49±0.48 2.58±0.55 2.79±0.36 2.86±0.27 2.9组别 给药前

表2 给药前后大鼠SAP和HR变化(n=20，s)

表2 给药前后大鼠SAP和HR变化(n=20，s)

组别 存活动物SAP给药前 42 d后HR给药前 42 d后14 26.60±1.25 31.85±1.93 356±51 354±69低剂量组 15 26.66±1.62 29.79±0.65 384±31 369±57中剂量组 17 25.61±2.34 27.83±1.921) 354±51 364±52高剂量组 18 26.85±2.51 27.07±2.741) 373±34 388±49尼莫地平组 20 25.18±2.17 26.35±2.262) 366±33 367±32空白组 20 23.54±1.212) 25.63±2.152)模型组364±32 354±377

2.3 存活时间和死亡率结果 与模型组比较，中、高剂量和尼莫地平可以明显延长动物的平均存活时间，但无统计学差异。尼莫地平对大鼠死亡率也有明显降低作用，低、中、高剂量对大鼠死亡率呈梯度降低。见表3。

表3 大鼠死亡情况和死亡率( s ，n=20)

表3 大鼠死亡情况和死亡率( s ，n=20)

)〕模型组 37.2±12.3 6(30)组别 平均存活时间(d)死亡〔n(%低剂量组 37.8±14.9 5(25)中剂量组 39.7±8.3 3(15)高剂量组 40.3±2.0 2(10)尼莫地平 42.0±10.7 0(0)空白组 42.0±0.0 0(0)

2.4 体重变化 造模前，各组动物体重无组间差异。至给药前，大鼠体重均有所增高，但组间仍无差异。模型组和低剂量组给药一段时间后，平均体重基本维持不变。其余4组动物体重都略有升高。杜仲木质素中、高剂量组、尼莫地平组及空白组与模型组比较差异显著(P＜0.05;P＜0.01)。见表4。

表4 存活大鼠体重变化( s ，n=20，g)

表4 存活大鼠体重变化( s ，n=20，g)

14 162.4±14.7 209.6±28.9 207.7±19.9低剂量组 15 162.6±15.4 208.0±47.2 210.5±38.0中剂量组 17 159.2±16.6 204.2±31.6 227.4±34.61)高剂量组 18 161.5±18.2 205.0±35.1 236.8±37.71)尼莫地平 20 164.4±12.6 203.4±31.2 248.6±28.41)空白组 20 158.5±18.5 207.8±22.3 257.3±22.42)个月模型组组别 存活动物 造模前 给药前 给药1

3 讨论

脑卒中的发病原因与血压的骤然波动有关。随着我国逐渐进入老龄化社会，以高血压为主的心血管疾病呈逐年上升态势，脑卒中的发病率也在逐年上升。高血压是导致脑卒中发生的首要因素，收缩压和舒张压均与脑卒中呈正相关。

SHRsp为遗传性高血压动物模型，100%发生高血压，持续给予高浓度盐水会导致高血压并发症，80%会发生脑卒中，常用于心脑血管病药物的动物实验。该动物高血压症状严重，脑内血流速度低，小动脉坏死，血管壁损伤严重，产生血栓或脑出血而导致脑卒中。另外，SHRsp动物模型脑卒中发作后，神经功能也与局部或全脑性脑缺血动物模型有明显差别〔5〕。

本实验结果表明，杜仲木质素对SHRsp脑卒中具有一定的控制和治疗作用，并且这种作用呈剂量依赖性。相关研究表明，杜仲木质素可能通过影响Ka+通道活性，使动脉平滑肌细胞膜电位去极化或超极化，发挥舒张血管的作用，从而降低血压，实现对脑卒中的治疗作用〔7，8〕。

1 刘 慧，刘仲华，张 盛.杜仲中活性成分的研究进展〔J〕.农产品加工学刊，2011;8：12-8.

2 徐珞珊，徐国均.中国药材学〔M〕.北京：中国医药科技出版社，1996.

3 国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010版)〔M〕.北京：化学工业出版社，2010.

4 罗丽芳，吴卫华，欧阳冬生，等.杜仲的降压成分及降压机制〔J〕.中草药，2006;37(1)：150-2.

5 张丽英，冯亦璞.丁基苯酞对脑卒中型自发性高血压大鼠寿命及卒中后神经症状的影响〔J〕.药学学报，1996;31(1)：18-23.

6 Nagaoka A，Kakihana M，Fujiwara K.Effects of idebenone on neurological dificitis following cerebrovascular lesions in SHRsp stroke-prone spontaneously hypertensive rats〔J〕.Arch Gerontol Geriatr，1989;8(3)：203-12.

7 宋 研，许激扬.杜仲木脂素化合物降压药效学研究与机制初探〔J〕. 中医药学刊，2006;24(10)：1934-6.

8 许激扬，宋 妍，季 晖.杜仲木脂素化合物舒张血管作用机制〔J〕.中国中药杂志，2006;31(23)：1976-8.