陈景彦 陈炳宏 张树峰 范洪亮 于海荣 任立群 梅爱敏 景文莉

(承德医学院，河北 承德 067000)

众所周知，长期高血压可导致心、脑、肾靶器官的损害。肾脏既是血压调节的重要器官，同时又是高血压损害的主要靶器官之一。高血压是肾损害的促进因素之一〔1〕。由于在肾损害的早期，患者没有明显的症状，即使发展到相当严重的阶段，症状也不明显，单纯用血清肌酐和尿素氮来评估高血压患者的肾功能易延迟诊断〔2〕。因此，适当的控制血压和利用敏感的检测手段检测肾功能指标是防治肾损害的主要措施之一。本研究旨在观察泽泻汤加味方对高盐高血压大鼠的降压疗效及肾功能的保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 3周龄雄性Wistar大鼠180只体重为50～60 g，SPF级，由天津市山川红实验动物科技有限公司提供，动物合格证号：SCXK(津)2009-001。

1.2 主要仪器及试剂 BP-6动物套尾无创血压仪(成都泰盟科技有限公司);日立7180全自动生化分析仪;FT-630G放免仪(北京核仪器厂);尿β2-MG放射免疫分析药盒(北京原子高科股份有限公司)。

1.3 实验药物 泽泻汤加味方：泽泻21 g、白术9 g、泽兰15 g、石菖蒲15 g(购自承德医药集团责任有限公司，批号0712002，一等);缬沙坦胶囊(商品名：代文，北京诺华制药有限公司生产，批号X0796)。

1.4 实验方法

1.4.1 高盐高血压动物模型的制备 在文献报道〔3〕的基础上，我们对其造模方法加以改进，并根据预实验造模结果，高盐造成高血压的周期长，并且成模率低，故用3周龄雄性Wistar大鼠180只，选取尿蛋白和尿红细胞均为阴性者作为观察对象，预留10只作为正常对照组，其余170只通过连续22 w，8%高盐饲料自然饲养，并从喂养第8周开始每周一次进行血压测量。在喂养第18～22周时进行血压达标(SBP＞130 mmHg)筛选(用鼠尾动脉测压仪测清醒状态下大鼠的血压)。模型筛选方法：①从血压已达标的大鼠中随机抽出10只取肾组织行病理切片观察，尚未发现病理改变者;②在大鼠分组前，3 d测1次血压，连测3次，每次每只大鼠测3遍，血压均＞130 mmHg者为造模成功。最后选用40只成模大鼠行8 w干预措施。

1.4.2 分组方法 从造模成功的大鼠中筛选40只，根据血压值随机分为模型组、缬沙坦组、泽泻汤加味方高剂量组、泽泻汤加味方中剂量组，每组各10只，加上预留的10只正常组，共5组。

1.4.3 给药方法 正常组：普通饲料，灌蒸馏水;模型组：灌蒸馏水;缬沙坦组：14.4 mg·kg-1·d－1(研磨，蒸馏水溶解;成人剂量的10倍);泽泻汤加味方高剂量组：16.2 g·kg－1·d－1(成人剂量的15倍);泽泻汤加味方中剂量组：10.8 g·kg－1·d－1(成人剂量的10倍)。所有实验大鼠均灌胃8 w;除正常对照组外，其余各组大鼠继续8%高盐饲料喂养8 w。

1.4.4 血压测量 采用无创性套尾法测定清醒大鼠收缩压(SBP)，每次测量时记录3次，取其平均值。给药前、2、4、8 w末各测一次血压，每次服药后2 h开始测量。

1.4.5 血中指标检测 治疗8 w后，用10%水合氯醛腹腔内给药麻醉，目内眦取血约 3 ml，放入肝素钠管中，离心(4 000 r/min，5 min)取血浆，放置 －80℃冰箱备用。用日立7180全自动生化分析仪检测BUN、Scr。

1.4.6 尿中指标检测 在治疗8 w后，将每只大鼠分别置于代谢笼中，收集24 h尿量(自由饮水、禁食)。24 h尿ALB定量用全自动生化分析仪;尿β2-MG用放射免疫法。

1.5 统计学分析 采用SPSS16.0统计软件进行数据分析。实验数据计量资料用s表示，多组间比较采用单因素方差分析。

2 结果

2.1 各组实验大鼠不同时间段收缩压的变化 表1示，给药前，与正常组比较，模型组、泽泻汤加味方高、中剂量组和缬沙坦组大鼠的收缩压明显增高(P＜0.01)。2、4和8 w末，与模型组比较，正常组、缬沙坦组、泽泻汤加味方高、中剂量组大鼠的收缩压明显降低(P＜0.01)。

2.2 各组实验大鼠干预8 w后BUN、Scr的变化 表2示，与正常组比较，缬沙坦组、泽泻汤加味方高、中剂量组、模型组血BUN升高(P＜0.01)。与正常组比较，缬沙坦组、泽泻汤加味方高、中剂量组、模型组Scr无显著性差异(P＞0.05)。

表1 实验各时间段大鼠收缩压的变化(s，mmHg，n=10)

表1 实验各时间段大鼠收缩压的变化(s，mmHg，n=10)

与正常组比较：1)P＜0.01;与模型组比较：2)P＜0.01

2 w 4 w 8 w正常组 118.87±10.00 118.87±10.002) 114.87±9.702) 111.60±8.512)组别 给药前模型组 145.94±11.531) 151.43±8.67 145.57±12.11 142.33±9.49缬沙坦组 145.78±9.871) 123.57±5.992) 131.13±10.712) 122.40±4.602)泽泻汤加味方高剂量组 144.64±7.421) 126.80±7.912) 122.70±11.192) 126.40±14.802)泽泻汤加味方中剂量组 144.93±6.611) 135.86±6.882) 126.87±6.742) 124.20±7.682)

表2 各组实验大鼠相应干预8 w后，BUN、Scr的变化( s ，n=10)

表2 各组实验大鼠相应干预8 w后，BUN、Scr的变化( s ，n=10)

与正常组比较：1)P＜0.01

组别 BUN(mmol/L)Scr(μmol/L)7.614 0±1.129 28 36.800 0±10.379 47模型组 12.407 0±1.718 761) 35.300 0±5.271 52缬沙坦组 11.972 0±3.108 551) 32.600 0±7.574 81泽泻汤加味方高剂量组11.989 0±2.465 441) 32.000 0±4.737 56泽泻汤加味方中剂量组11.754 0±1.692 441)正常组35.000 0±6.599 66

表3 实验各组大鼠相应干预8 w后尿ALB、尿 β2-MG的变化( s ，n=10)

表3 实验各组大鼠相应干预8 w后尿ALB、尿 β2-MG的变化( s ，n=10)

与模型组比较：1)P ＜0.01，2)P ＜0.05

组别 24 h ALB(g/24 h)β2-MG(mg/L)正常组 0.101±0.071) 0.116 ±0.1032)模型组 0.272±0.08 0.226±0.164缬沙坦组 0.192±0.08 0.153±0.113泽泻汤加味方高剂量组 0.145±0.111) 0.154±0.095泽泻汤加味方中剂量组 0.178±0.112) 0.119±0.1042)

2.3 各组实验大鼠干预8 w后尿ALB、尿β2-MG的变化 表3示，与模型组比，泽泻汤加味方高剂量组的24 h尿ALB明显降低(P＜0.01);泽泻汤加味方中剂量组的尿ALB降低(P＜0.05)。与模型组比，正常组和泽泻汤加味方中剂量组的尿β2-MG降低(P＜0.05)。

3 讨论

中医学虽无高血压肾损害这一病名，但按其不同的病理阶段和主要临床表现大致属于“眩晕”、“头痛”、“腰痛”、“水肿”、“尿浊”等范畴。我们依据中医“久病不愈，非痰则瘀”及“水能病血，血能病水”的理论，提出了具有“利水为主，利水活血化痰”之功的泽泻汤加味方。泽泻汤加味方由《金匮要略》泽泻汤加泽兰、石菖蒲组成。泽泻：甘淡，寒。归肾、膀胱经;能利水渗湿，清湿热。现代药理研究认为，泽泻有利尿作用，能促使尿素和氯化物的排泄，还可降血压。白术：苦、甘，温。归脾、胃经;能健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。《汤液本草》认为：白术入少阴经，利腰脐间血，通水道，上而皮毛，中而心胃，下而腰脐，在气主气，在血主血。泽兰：苦、辛，微温。归肝、脾经;能活血祛瘀，利水消肿。曹赛霞等〔4〕研究认为，适宜剂量的泽兰对大鼠慢性肾衰竭有改善作用;其机制与泽兰纠正肾衰竭时的贫血、低钙高磷现象、氮质血症，减少肿瘤坏死因子对肾脏的纤维化损害有关。石菖蒲：辛、温。归心、胃经;能祛痰开窍，化湿开胃，宁神益智。研究证明，石菖蒲对小鼠具有抗氧化作用和提高机体的免疫功能〔5〕。

研究认为，以血压＜120/80 mmHg为参照，血压为130～139/85～89 mmHg、140～159/90～99 mmHg时的终末期肾脏病变相对危险度分别为1.9和11.2，而血压为210/120 mmHg时其危险度高达22.1〔6〕。高血压是肾损害的促进因素之一，适当控制血压是延缓肾脏病进展的重要措施之一〔1〕。本实验结果显示：泽泻汤加味方高剂量组和缬沙坦组降压疗效相当;在某种程度上泽泻汤加味方在降压方面存在一定的量效关系。

高血压肾损害的早期也就是良性小动脉硬化出现临床症状前，常规的血液及尿液检查都正常，但用敏感的检查手段仍能发现异常，如尿ALB、尿β2-MG的排出增加均可视为原发性高血压早期肾损害的存在〔7〕。尿ALB是反映肾小球功能的主要指标，正常情况下肾小球滤过膜存在电荷选择性屏障，绝大部分尿ALB不能通过滤过膜。当尿ALB含量升高时，就标志着肾小球滤过膜电荷选择性屏障损伤〔8〕。β2-MG是低分子蛋白，由肾小球自由滤过，99.9%以上再由近端肾小管重吸收，尿中排出甚少。尿β2-MG是目前公认的测定肾小球滤过率和近端肾小管重吸收功能的敏感指标〔8〕。本实验结果显示，高盐饮食可导致大鼠血BUN升高;泽泻汤加味方在高盐高血压大鼠早期肾功能的损害方面具有保护作用。

综述所述，泽泻汤加味方可以降低高盐高血压大鼠的血压，并且其对肾功能具有一定的保护作用。另外，关于泽泻汤加味方对高盐高血压大鼠的降压起效时间和最佳降压时间及血压值与肾功能指标的相关性分析有待研究。

1 阳 晓.慢性肾脏病进展的危险因素及延缓策略〔J〕.中国实用内科杂志，2008;28(1)：79.

2 黎磊石，刘志红.中国肾脏病学上册〔M〕.北京：人民军医出版社，2008：846.

3 王 琰，余 毅，周丽娜.坎地沙坦抑制盐负荷高血压大鼠大脑尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶基因的表达〔J〕.中华高血压杂志，2009;17(3)：222-5.

4 曹赛霞，赵直光，孙德珍.泽兰防治慢性肾衰竭的实验研究〔J〕.中国中西医结合肾病杂志，2008;9(8)：712-4.

5 李艳菊，刘 辉，郭月秋.石菖蒲对小鼠免疫功能调节作用的研究〔J〕. 中国中医药科技，2007;14(2)：95-6.

6 黄颂敏，欧三桃.高血压肾损害的诊断及治疗〔J〕.中华肾脏病杂志，2005;21(10)：566.

7 王海燕.肾脏病学〔M〕.第2版.北京：人民卫生出版社，1995：1150-1.

8 李树青，于江月，王维忠.丹参对自发高血压大鼠早期肾损害干预研究〔J〕.中西医结合心脑血管病杂志，2008;6(1)：47.