冯叙桥，关筱歆，张 鹏，张 平，李江阔，*

（1.沈阳农业大学食品营养质量与安全研究所，辽宁沈阳110866;

2.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110866;3.国家农产品保鲜工程技术研究中心，天津农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室，天津 300384）

1- MCP结合ClO2处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄生理和品质的影响

冯叙桥1，2，关筱歆1，2，张 鹏3，张 平3，李江阔3，*

（1.沈阳农业大学食品营养质量与安全研究所，辽宁沈阳110866;

2.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110866;3.国家农产品保鲜工程技术研究中心，天津农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室，天津 300384）

以玫瑰香葡萄为试材，通过对不同处理方式果实在贮藏期间品质和生理生化指标的变化分析，探讨冰温贮藏（－0.5～－0.2℃）条件下，1－MCP 和 ClO2处理对果实的保鲜效果。结果表明，1.0μL/L 1－MCP 结合1.0μL/L ClO2处理比1.0μL/L 1－MCP、1.0μL/L ClO2单独处理更能有效保持葡萄贮藏过程中的品质，并降低与衰老相关的生化反应，贮藏45d时1－MCP+ClO2处理的腐烂率和果梗褐变指数分别比对照低36.23%、12.50%，果实硬度仅下降了2.93kg/cm2，可溶性固形物含量和VC含量分别高于对照0.50%、2.52mg/100g;丙二醛含量低于对照5.86μmol·g－1，POD、SOD活性较对照增强，有效延缓了葡萄在贮藏过程中的衰老进程。

玫瑰香葡萄，冰温贮藏，1－MCP，ClO2

玫瑰香葡萄（VitisviniferaL.CV.Muscat Hamburg），也叫麝香葡萄，欧亚种，原产英国，在我国已有一百多年的栽培历史［1］。未熟透时是浅浅的紫色，有浓郁的玫瑰香味，糖酸比较高，可口，品质极上，深受消费者的欢迎［2］。玫瑰香葡萄属于中熟品种，而且较之于其它品种具有皮薄、含汁量大等特点，用于贮藏保鲜，技术难度极大［3］。1－甲基环丙烯（1－methylcyclopene，1－MCP）是环丙烯类化合物，是近年来发现的一种新型乙烯受体抑制剂［4］，它能作用于乙烯受体，从而阻断受体与乙烯的正常结合，抑制其所诱导的与果实后熟相关的一系列生理生化反应［4－5］。美国已批准 1－MCP 作为花卉保鲜剂，并得到广泛应用，1－MCP应用在果蔬贮藏也取得了很好的效果［6］。1－ MCP 能够较好地维持苹果［7］、梨［8］等果实可滴定酸和可溶性固形物的含量，利于提高果实的品质;明显诱导了台湾青枣［9］和香蕉［10］果皮POD活性的提高，并在整个贮藏过程中维持较高水平。1－MCP可明显提高无核白葡萄［11］的果粒耐拉力并提高贮藏后期的可溶性固形物含量。1－MCP稳定性高、活性强、使用浓度低，能强烈地阻断内源乙烯的生理效应，在果蔬贮藏保鲜上有着广阔的发展前景［12］。ClO2是一种强氧化剂，具有很强的杀菌能力，可有效杀死微生物，但对动植物机体不产生毒效［13］;ClO2处理无气味残留，不改变果蔬原有的风味［14］;ClO2可以阻止蛋氨酸生成乙烯，破坏已生成的乙烯，延缓果蔬衰老与腐烂。20世纪80年代开始，已被众多国家批准用于食品领域。2004年美国FDA将ClO2批准为果蔬杀菌剂，是目前国际上公认的性能优良、效果好的食品保鲜剂［15］。ClO2有利于保持无核白葡萄［16］和藤稔葡萄［17］果粒的颜色、形态、硬度，减少葡萄的腐烂率，保持果实中可滴定酸、VC和总酸的含量。目前1－MCP和ClO2单独处理葡萄保鲜效果有相关报道［11，16－17］，本实验以玫瑰香葡萄为对象，研究1－MCP结合ClO2处理对冰温贮藏葡萄的品质和生理的影响，探索葡萄贮藏保鲜的更好方法。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

葡萄采自天津市汉沽区茶淀镇，果实于2010年9月26日采收，当天运回实验室，挑选成熟度一致，无病虫害和机械损伤的果实;PE袋、1－MCP、ClO2

由国家农产品保鲜工程技术研究中心（天津）提供。

TA.XT.Plus物性测定仪 英国;PAL－1便携式手持折光仪 日本爱宕;LP1200S千分之一天平、BP210S万分之一天平 德国赛多利斯;GENESYS 5紫外－可见分光光度计 美国;D－37520高速冷冻离心机 德国;电热恒温水浴锅 北京科威;SC－182A冷藏柜，海尔冰柜 青岛海尔。

1.2 葡萄的处理方法

对照（CK）:不进行任何处理;

1－MCP处理:将果实置于1－MCP气体浓度为1.0μL/L的1m3密闭塑料帐内，常温（18～20℃）下处理18h;

ClO2处理:将果实置于ClO2气体浓度为1.0μL/L的1m3密闭塑料帐内，常温下处理10min;

1－MCP+ClO2处理:将果实置于1－MCP气体浓度为1.0μL/L的1m3密闭塑料帐内，常温下处理18h后，再将果实置于ClO2气体浓度为1.0μL/L的1m3密闭塑料帐内，常温下处理10min。

实验药剂的配制参考孙希生等［18］的方法，将处理后的葡萄用 PE袋包装，每种处理18袋，每袋2.5kg，置于冰温库（－0.5～－0.2℃）贮藏。贮藏期间每15d各处理取出3袋葡萄作为重复，进行相关指标测试，每种指标做3次平行测定。

1.3 测定项目与方法

1.3.1 感官品质指标 其中，果梗褐变级数为:0级:果梗、穗轴部位均没有褐变;1级:果梗或穗轴部位出现褐变现象，但面积不超过总面积的1/4;2级:果梗或穗轴部位出现褐变现象，且面积占总面积的1/4～1/2;3级:果梗或穗轴部位出现褐变现象，且面积占总面积的1/2～3/4;4级:果梗和穗轴部位褐变面积超过3/4或全部褐变。

1.3.2 生理指标 带皮硬度:采用英国产TA.XT.Plus物性测定仪测定。每个处理取10个果，分别在对角线取2个点，取平均值，单位为kg/cm2。测定参数为:探头型号P/2，直径2mm，测试速度2.00mm/s;测定深度6mm;最小感知力5g。

可溶性固形物（TSS）、可滴定酸（TA）、维生素C（VC）、丙二醛（MDA）:在葡萄果穗的不同部分均匀取样约35～40粒，去皮、打浆，测定以上四个指标。可溶性固形物含量（TSS）:采用PAL－1便携式手持折光仪测定;可滴定酸含量（TA）:酸碱中和滴定法［19］;维生素 C 含量（VC）:钼蓝比色法［20］;丙二醛含量（MDA）:硫代巴比妥酸比色法［21］。

呼吸强度和乙烯生成量:在葡萄果穗不同部位剪取小串葡萄约500g后放置于2L的密闭干燥罐中，密封3h后用便携式O2/CO2测定仪测定容器内CO2浓度，并计算呼吸强度，单位为 CO2mg·kg－1·FW·h－1。再以注射器抽取罐内气体约20mL，用岛津2010气相色谱仪程序升温法测定乙烯含量，采用面积外标法计算，标样的体积分数为50μL·L－1。

超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性:在葡萄果穗的不同部分均匀取样约15～20粒，去皮后切成小块用液氮冻样，放入－70℃冰箱内保存，分别用NBT光还原比色法、愈创木酚比色法［22］测定以上两种指标。

1.3.3 数据统计 数据分析采用DPS7.50软件进行Duncan’s新复极差法分析，检验其差异显著性。文中图表用EXCEL软件绘制。

2 结果与分析

2.1 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄感官品质的影响

葡萄在贮藏过程中，随着贮藏时间的延长，营养物质不断损失，果刷对果粒的束缚能力不断减小，造成葡萄果粒脱落，1－MCP+ClO2处理明显降低了葡萄的落粒率（表1）。贮藏30d，ClO2处理的果实落粒率为10.56%，较15d时的0.20%上升幅度很大，与其他处理的差异极显著（p＜0.01）;贮藏45d，1－MCP+ClO2处理的落粒率为7.75%，极显著低于其他处理果实。葡萄在贮藏过程中随着贮藏时间延长，果实和果梗会有霉菌产生，造成果实腐烂变质。1－MCP和ClO2处理均降低了果实的腐烂率，贮藏45d时，对照果实的腐烂率接近50%，1－MCP和ClO2处理分别比对照低 25.20%、32.77%，1－MCP+ClO2处理较ClO2单独处理更好地抑制了葡萄的落粒率。因此1－MCP+ClO2处理能更好地降低葡萄贮藏过程中的落粒率和腐烂率。

表1 玫瑰香葡萄冰温贮藏过程中感官品质的变化Table 1 Change of the external quality attributes of muscat hamburg grape during controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）

表2 玫瑰香葡萄冰温贮藏过程中营养品质的变化Table 2 Change of the nutritional quality of muscat hamburg grape during controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）

贮藏15d时，各种处理的葡萄果梗均出现轻微褐变现象，1－MCP和ClO2处理的果梗褐变指数分别低于对照1.70%、3.40%，1－MCP+ClO2处理的果梗褐变程度最轻微;贮藏45d时，对照处理的葡萄果梗褐变指数上升到37.5%，1－MCP+ClO2处理的葡萄果梗褐变指数25%，极显著（p＜0.01）低于1－MCP处理和ClO2处理的33.3%和31.5%。可见，1－MCP+ClO2处理能更好地减轻冰温贮藏玫瑰香葡萄的果梗褐变程度，使葡萄果实在贮藏过程中维持良好的品质状态。

2.2 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄营养品质的影响

硬度反映果实抗压力的强弱，是果实软化的直接表现。果实的硬度与细胞之间原果胶的含量正相关，由于果实中胶层细胞之间的原果胶在原果胶酶（PE）或多聚半乳糖醛酸酶（PG）的作用下转变为果胶和果胶酸，果胶再进一步变成小分子的糖以至细胞分离，引起果实组织变软，因此在贮藏过程中，硬度随着贮藏时间的延长逐渐降低［23－24］。由表2可知，在整个冰温贮藏过程中，对照处理的果实硬度下降得最快，1－MCP和ClO2处理分别在不同程度上减缓了贮藏期间果实硬度的下降，ClO2比1－MCP处理更好地抑制了果实硬度的下降，其中1－MCP+ClO2处理的果实效果最好。贮藏45d时，对照果实的硬度从贮前的12.52 kg/cm2下降为8.01kg/cm2，而1－MCP+ClO2处理比对照极显著地下降了1.58kg/cm2（p＜0.01）。

TSS是指细胞液内所含的一些可溶性的氨基酸、维生素、矿物质、糖类等，其中以糖类为主，是评价果实品质的重要指标之一［25］。随着贮藏时间的延长，TSS含量有显著的下降趋势，1－MCP和ClO2处理分别不同程度地减缓了TSS下降的速率。贮藏前果实TSS含量为18.26%，贮藏45d后，1－MCP和 ClO2处理的果实TSS含量分别下降为17.26%、17.57%，均高于对照处理的16.94%，各处理之间的差异极显著（p＜0.01）。

随着贮藏时间的延长，葡萄中的TA含量呈下降的趋势，有机酸通过生理代谢转化成其它物质。本实验结果也说明，贮藏期间，几种处理的果实TA含量均降低，由快到慢依次为:对照、1－MCP、ClO2、1－MCP+ClO2处理，但各处理间没有显著性差异（表2）。

在贮藏过程中，葡萄果实中VC含量呈下降趋势，贮至 45d 时，1－MCP、ClO2、1－MCP+ClO2处理果实VC含量分别比对照高出1.54、1.80、2.52mg/100g，此时1－MCP+ClO2处理的VC含量极显著（p＜0.01）高于1－MCP和ClO2分别单独处理。在冰温贮藏过程中，ClO2处理抑制葡萄果实中VC含量下降的效果优于1－MCP处理，1－MCP+ClO2处理的效果优于两者分别单独处理（表2）。

2.3 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄生理指标的影响

2.3.1 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄MDA的影响 MDA是植物衰老过程中膜脂过氧化最重要的产物之一，膜脂过氧化能增加细胞透性，导致细胞内容物外渗，常用MDA来评价脂质过氧化程度和细胞膜系统受伤害的程度［26］。由图1可知，在整个冰温贮藏过程中，葡萄果实的MDA含量逐渐增加，三种处理较对照均不同程度抑制了MDA含量的积累，延缓了果实的衰老。贮藏45d时，1－MCP和ClO2处理的MDA 含量分别为比对照低4.32、3.06μmol·g－1;此时1－MCP+ClO2处理的 MDA含量比1－MCP处理低1.54μmol·g－1，效果更明显。

图1 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄MDA含量的影响Fig.1 Change of contents of MDA of muscat hamburg grape during controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）

2.3.2 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄POD和SOD的影响 POD催化以H2O2为电子受体的氧化反应，能将SOD作用产物H2O2分解为对细胞无伤害的H2O和O2，从而使机体免受H2O2伤害，所以在清除细胞活性氧上有着协同作用，故POD活性同样可以反映系统清除自由基的能力［27］。由图2可知，在整个贮藏过程中，葡萄果实POD活性呈先增大后减小的变化，但活性高峰略有不同。对照、1－MCP、ClO2处理的POD活性缓慢上升，30d时1－MCP和ClO2处理的 POD 活性分别为 20.07、21.81U·g－1，极显著（p＜0.01）高于对照的 18.81U·g－1，1－MCP 和 ClO2处理均有效地抑制了POD酶活性的下降，其中ClO2处理的效果优于1－MCP处理;1－MCP+ClO2处理的POD活性在15d时迅速上升达到活性高峰，在整个贮藏期间一直极显著（p＜0.01）高于其他处理。

图2 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄POD活性的影响Fig.2 Change of POD activity of muscat hamburg grape during controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）

SOD是一种含金属辅基的酶，其主要功能是催化超氧自由基发生歧化发应，生成H2O2和O2，从而清除超氧自由基对果实细胞的伤害［27］。由图3可知，在整个贮藏期间，葡萄果实SOD活性先上升达到活性高峰后逐渐下降。贮藏15d时，1－MCP、ClO2和1－MCP+ClO2处理的SOD活性分别上升至62.34、63.79、65.48U·g－1，极显著（p ＜0.01）高于对照果实的60.37U·g－1;贮藏45d时，1－MCP和 ClO2处理的SOD 活性分别为8.73、9.97U·g－1，较对照的7.22U·g－1极显著地抑制了SOD活性的下降，1－MCP+ClO2处理的SOD活性为10.85U·g－1，更有效地抑制了SOD活性的降低。

图3 不同处理对冰温贮藏玫瑰香葡萄SOD活性的影响Fig.3 Change of SOD activity of muscat hamburg grape during controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）

3 讨论

葡萄采后贮藏过程中，极易出现果实脱落现象和真菌侵染导致的腐烂，从而引起品质的下降，因此葡萄贮藏过程中应尽可能地避免落粒和腐烂现象的发生。由本实验结果可看出，贮期结束时，对照果实的落粒率和腐烂率分别为11.57%、48.72%，ClO2处理分别为11.42%、15.95%，有效地抑制了果实表面致病菌和微生物的生长，1－MCP+ClO2处理在贮期结束时的落粒率和腐烂率分别为7.75%、12.49%，效果明显优于单一ClO2处理（表1）。葡萄贮藏过程中，除了果实品质会发生变化，果梗也会逐渐干枯、褐变。45d时，对照葡萄的果梗褐变指数上升到37.5%，1－MCP、ClO2处理均有效地降低到33.3%、31.5%。此时1－MCP+ClO2处理的果梗褐变指数仅为25%（表1）。因此，1－MCP+ClO2处理能更有效地减少葡萄贮藏过程中落粒和腐烂现象的发生，更有效地抑制葡萄果梗褐变的程度，更好地保持了葡萄的感官品质及其商品价值。

目前1－MCP、ClO2处理对果蔬贮藏品质影响的研究较多，1－ MCP 能够延缓苹果［28－29］、梨［30］和桃［31］硬度的下降以及TSS和TA含量的降低，提高果实的贮藏质量。ClO2处理有利于果实硬度及口味的维持，并防止TSS的减少，提高贮藏杏的商品品质和营养价值［32］。本实验对葡萄贮藏过程中的品质变化的研究也说明，1－MCP和ClO2处理均不同程度的保持了葡萄果实的硬度，减缓了TSS和VC含量的下降，1－MCP+ClO2处理结合了两者的优点，贮期结束时果实的硬度分别高于1－MCP、ClO2处理，TSS和VC含量也较两种处理有了明显的提高，更有效地保持了果实中的营养成分（表2）。

在逆境胁迫或衰老过程中，植物细胞内活性氧的产生和清除平衡受到破坏，膜脂过氧化而导致膜系统伤害［33］。SOD能清除超氧自由基对生物大分子的伤害，POD具有协同作用，二者对衰老有延缓作用［27］。本实验结果可以看出，1－MCP和 ClO2处理均可明显抑制葡萄果实的乙烯释放和MDA含量的积累并提高 SOD和 POD的活性，延缓果实的衰老（图1～图4），而且，1－MCP结合 ClO2处理对减缓葡萄冰温贮藏过程中的成熟和衰老的作用更好。

4 结论

1－MCP和ClO2处理的葡萄贮藏品质较对照相比均有了明显的提高，ClO2处理抑制腐烂率的效果明显，1－MCP能够有效地延缓葡萄的成熟衰老。1－MCP+ClO2处理结合了 1－MCP、ClO2处理的优点，能更有效地保持葡萄贮藏过程中的品质，延缓葡萄的衰老。

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Effect of 1－MCP and ClO2treatments on postharvest quality and physiology of muscat hamburg grape under controlled freezing point storage

FENG Xu－qiao1，2，GUAN Xiao－xin1，2，ZHANG Peng3，ZHANG Ping3，LI Jiang－kuo3，*
（1.Institue of Food Nutrition，Quality and Safety，Shenyang Agricultural University，Shenyang 110866，China;2.College of Food Science，Shenyang Agricultural University，Shenyang 110866，China;
3.National Engineering and Technology Research Center for Preservation of Agricultural Produces，Tianjin Key Laboratory of Postharvest Physiology and Storage for Agricultural Produces，Tianjin 300384，China）

The effect of 1－MCP and ClO2treatments on muscat hamburg grape under controlled freezing point storage（－0.5～－0.2℃）was evaluated by investigating fruit quality and physiological and biochemical changes.The results showed that treatment with 1.0μL/L 1－ MCP plus 1.0μL/L ClO2delayed the fruit quality decrease and reduced the senescence－related biochemical changes compared with treatment with just 1－MCP or ClO2.After 45d storage，the decay rates and stems browning index of fruits treated with 1－ MCP plus ClO2were 36.23%and 12.50%lower than control，respectively，while contents of fruit firmness，TSS and VCwere 0.50%and 2.52mg/100g higher than control，respectively.However，the contents of MDA was 5.86μmol·g－1lower than control and the activity of POD and SOD enhanced as well.Thus，treatment with 1－MCP plus ClO2effectively delayed the aging process of muscat hamburg grape during postharvest storage.

muscat hamburg grape;controlled freezing point storage;1－MCP;ClO2

TS255.3

A

1002－0306（2012）17－0333－06

2012－02－15 *通讯联系人

冯叙桥（1961－），男，教授，博士，主要从事农产品贮藏保鲜研究工作。

国家自然科技基金资助（30972064）;国家葡萄产业技术体系资助（CARS－30）;天津市农业科技成果转化与推广项目（201002020）。