孙玉琴，黄天卫，杨 莉，韦美丽，王朝梁，陈中坚

（1.文山学院 三七研究院，云南 文山 663000；2.文山华信三七股份有限公司，云南 文山 663000）

花粉是种子植物的雄配子体，在有性繁殖中发挥着重要作用。采集的花粉和贮存的花粉，在使用之前必须作生活力的鉴定，以估价花粉是否有授精能力。在农业和林业的常规育种工作中，为了进行人工辅助授粉和杂交授粉，通常需要早期采集和储藏花粉，尤其是在杂交育种工作中，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，更需要保存生活的花粉［1］。

三七［Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen］及屏边三七（P.stipuleanatus）属五加科人参属植物，三七由于长期的人工栽培，病虫害比较严重［2］，屏边三七为三七的近源野生种，具有较强的抗病性。但人工栽培三七与屏边三七花期不遇，为探寻是否可以利用杂交育种手段选育三七抗病新品种，为三七的育种工作提供一条新途径，笔者对不同贮藏条件下二者的花粉生活力进行测定，以便了解二者的花粉贮藏寿命。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料采自文山学院三七研究院砚山试验场内种植的二年生三七，三年生三七及种质资源圃内的多年生屏边三七的花粉，采样后分别保存在普通冰箱的4 ℃保鲜层及-20 ℃冰冻层中。

1.2 方法

1.2.1 染色液的配制

花粉测定采用噻唑蓝（MTT）染色法，称取0.1 g MTT，溶解于10 mL配置好的5%的蔗糖溶液中，摇匀置于冰箱中避光保存。

1.2.2 染色测定操作过程

（1）取少数花粉置于载玻片上，加1～2滴MTT溶液，盖上盖玻片

（2）将制片在室温下放置15 min，然后在低倍镜下观察。凡是染成红色的花粉，其生活力为强，淡红的次之，无色的为不具活力的花粉或不育花粉。

（3）观察3个制片，每片取5个视野，统计100粒，然后计算花粉的活力百分率。

2 结果与分析

2.1 不同贮藏条件下三七花粉寿命比较

不同贮藏条件下二年生三七、三年生三七花粉寿命比较情况见表1。由表1可以看出，三年生三七花粉贮藏寿命长于二年生三七花粉。三七花粉在冰冻条件保存，花粉从有活力至活力完全丧失的时间约80 d，保鲜条件下，二年生三七花粉活力维持时间约45 d左右，三年生三七花粉活力维持时间约60 d左右。二年生花粉保鲜贮藏23 d，花粉活力降低了49.42%，冰冻贮藏30 d，花粉活力降低了53.85%（见图1），而三年生三七花粉保鲜贮藏45 d，花粉活力降低了59.53%，冰冻贮藏35 d，花粉活力降低了47.03%（见图2）。

表1 二年生、三年生三七花粉贮藏寿命表

图1 二年生三七花粉寿命

图2 三年生三七花粉寿命

2.2 不同贮藏条件下屏边三七花粉寿命

不同贮藏条件下屏边三七花粉生命情况见表2。

由表2可以看出，屏边三七花粉在保鲜条件下贮藏的时间较冰冻条件下要长，在保鲜条件下屏边三七花粉从有活力至活力完全丧失的时间约60 d左右，而冰冻条件下贮藏时间仅为35 d左右。屏边三七花粉在冰冻条件下保存3 d左右时间，花粉活力开始迅速下降，保存一个星期后，花粉活力降低了59.43%（见图3）。

表2 屏边三七贮藏寿命表

图3 屏边三七花粉寿命

3 结论与讨论

（1）栽培三七刚采获后的花粉活力基数比屏边三七花粉活力基数低，这与每个花序上的小花数目多少有关，栽培三七平均一个花序上的小花数目远远多于屏边三七，其营养供应远不如屏边三七，致使小花采获的花粉活力基数大大低于屏边三七。

（2）栽培三七一般人工种植三年即可收获，三七从栽种的第二年就可以开花结果，故在三七的一个生长周期内同时采收二年生三七花粉和三年生三七花粉比较它们的贮藏时间。比较结果显示，在保鲜条件下，三年生三七花粉较二年生三七花粉耐贮藏时间稍长，在冰冻条件下，二者相差不大。

（3）屏边三七花粉的耐贮藏性比栽培三七时间短，虽然花粉活力基数高但经过一段时间贮藏花粉活力迅速降低，可能与栽培三七经过400多年的人工驯化，对环境的适应性增强，而屏边三七是从原始森林收集到三七研究所种质资源圃的，人工栽培时间短，对环境的适应性弱有关，但其生机理制还需进一步研究。

［1］王钦丽，卢龙斗，吴小琴，等.花粉的保存及其生活力测定［J］.植物学通报，2002（ 3）：365-373.

［2］陈昱君，王勇，冯光泉，等.三七病虫害防治［M］.昆明：云南科技出版社，2006：1-3.