陈昱君 ，王 勇 ，刘云芝 ，杨建忠 ，朱云飞

（1.文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.文山华信三七股份有限公司，云南 文山 663000）

名贵药材三七［Panax notoginseng（Burk.） F.H.Chen］经过数百年的人工驯化种植，形成现广植于云南文山的栽培种。由于长期规模化单一种植，加之三七喜阴特性，常导致各种病害的暴发流行，给三七生产带来巨大损失。三七黑斑病就是三七产区常年发生、流行的一个主要病害［1］，目前仍以施用杀菌剂为主进行防治。现代农药在减轻病、虫危害方面发挥了很大作用，但同时也会给环境带来污染［2］。本研究拟通过不同中药材对三七黑斑病病原Alternaria panax Whetz（人参链格孢）的控制作用研究，探讨生物多样性控制三七黑斑病的可行性。

1 试验方法

1.1 室内抑菌试验

选用本地生产的中药材品种紫丹参（Salvia miltiorrhiza Bge）、川芎（Ligustici chuanxiong）、麦冬（Ophiopogon japonicus）、鱼腥草（Houttuyniae cordata）、山奈（Kaempferia galanga L.）、泽兰（Lycopus lucidus Turcz.Var.hirtus Regel）、玉竹（Polygonatum Odoratum）及三七植株，每种植物取100 g，清水洗净，研磨成汁，经过滤后分别与琼脂（8 g）、水（500 mL）混合成培养基，同时设清水培养基（清水500 mL+琼脂8 g）为对照，灭菌备用。

在无菌条件下，取人参链格孢纯化培养菌落，用打孔器等距离截取菌块（φ=5 mm）接种于各中药材和清水培养基上，每处理重复4次。接种后的培养基置于25 ℃光照培养箱中培养，并于接种后 1、3、5、7 d观察菌丝生长情况，记录菌落直径，最后统计分析各处理菌丝日均生长量。

1.2 病原致病性测定

将三七、紫丹参、川芎、麦冬、鱼腥草、山奈、泽兰、玉竹等中药材各50株按10株/盆种植于30×40 cm花盆中，待成活后，用浓度为6×106-7个/mL Alternaria panax Whetz 孢子悬浮液进行喷雾接种，套袋保湿24 h。

于接种后第9 d检查各处理是否感病，观察不同中药材感病症状，统计发病株数，计算发病率。同时将表现病状的植株带回实验室内进行病原分离鉴定。

2 试验结果

2.1 室内抑菌试验

由表1可看出，虽然参试中药材菌丝生长速度均不同程度低于三七培养基，但川芎、紫丹参培养基的菌落扩展速度均达1.2 cm/d以上，其生长量与对照清水相比达极显著水平，说明川芎、紫丹参的内含物质可满足菌丝生长要求。鱼腥草菌丝生长量略高于对照，但未达显著水平，说明鱼腥草对菌丝生长促进作用不明显。而菌丝生长速度最慢的是泽兰、山萘，菌落扩展分别仅为0.42 cm/d、0.43 cm/d；其次是麦冬和玉竹，分别为0.88 cm/d、0.98 cm/d。说明泽兰、山萘、麦冬和玉竹具有仰制菌丝生长的物质，其中泽兰、山萘抑制作用最为明显，与对照相比达极显著水平。

表1 不同中药材与Alternaria panax Whetz菌丝生长关系（单位：cm/d）

2.2 病原致病性测定

由表2看出，三七、紫丹参、川芎、鱼腥草接种后可表现感病症状。经室内分离培养鉴定，在三七、川芎、紫丹参病组织中检出Alternaria panax Whetz，说明Alternaria panax Whetz可侵染三七、川芎、紫丹参。在鱼腥草上未检出Alternaria panax Whetz，说明该菌在鱼腥草上虽然可侵入，但侵入后遇到寄主强烈的抑制反应（亦称过敏反应），以致其不能进一步扩展，并随着侵入组织的迅速崩解而死亡。玉竹、麦冬、山萘、泽兰接种后未表现任何症状，说明该菌对上述植物未构成侵染。

表2 Alternaria panax Whetz致病性测定

3 结论

（1） Alternaria panax Whetz具有一定的寄主专化性，可侵染三七、川芎、紫丹参，导致形成典型病斑；可在鱼腥草上形成拮抗性坏死斑。但该菌不能侵染泽兰、山萘、麦冬、玉竹。 同时，室内抑菌试验表明泽兰、山萘、麦冬、玉竹所含物质均可抑制Alternaria panax Whetz，其中泽兰、山萘抑制作用最强。

（2） 泽兰、山萘、麦冬、玉竹均为多年生草本植物。泽兰具有活血，益气，消水功效，主治吐血，衄血，产后腹痛，并可菜药兼用。山萘具有行气温中，消食，止痛功效，主治胸隔胀满，脘腹冷痛，饮食不消，并可作烹饪调料。麦冬具有养阴生津，润肺清心的功效，主治肺燥干咳，虚痨咳嗽，心烦失眠，肠燥便秘。玉竹具有养阴，润燥，除烦，止渴功效，主治热病阴伤，咳嗽烦渴，虚劳发热，消谷易饥，小便频数。4种药材均为常用大宗药材，有较好的开发应用前景。

（3） 利用生物多样性持续控制农作物病害，已成为近年来国内外研究热点，并取得了明显成效［3-4］；但中药材利用生物多样性持续控制病害鲜有学者研究。本研究针对三七黑斑病的防治，筛选出可与三七间（套）种中药材泽兰、山萘、麦冬、玉竹，为进一步探索三七多样性控病技术奠定了基础。

［1］陈昱君，王勇.三七病虫害防治［M］.昆明：云南科技出版社，2005：40-48.

［2］何光好.我国农药污染的现状及对策［J］.现代农业科技，2005（6）：57.

［3］朱有勇.生物多样性持续控制作物病害理论与技术［M］.昆明：云南科技出版社，2004：48-68.

［4］胡新，许艳丽，李春杰.利用作物多样性控制病害研究进展［J］.农业系统科学与综合研究，2011（1）：118-122.