张泉龙，邱建国，李茂星，尉丽力，何希瑞，贾正平

(兰州军区总医院药材科，全军高原环境损伤防治重点实验室，兰州 730050)

藏药独一味［Lamiophlomis rotata(Benth．)Kudo］为唇形科独一味属植物［1］，其具有活血镇痛、化瘀止血之功效，用于治疗各种外科手术后的刀口疼痛、出血，外伤骨折，筋骨扭伤，风湿痹痛以及崩漏、痛经、牙龈肿痛、出血等［2-4］。现代药理学研究显示，独一味具有止血、镇痛、抗炎、促进伤口愈合以及保护神经元的作用［5-7］，并且发现独一味总环烯醚萜苷为其止血作用有效部位［8］。目前获得国家药品批准文号的独一味制剂剂型有片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、分散片、咀嚼片、滴丸剂等口服剂型，独一味的外用制剂很少，但临床已有将独一味胶囊外用于治疗鼻出血，拔牙后出血的应用报道，且止血疗效显著［9-10］。笔者在本课题组前期研究的基础上，将独一味水提物及其有效部位总环烯醚萜苷制成外用散剂，考察其外用止血效果，为新型止血药物的研制提供药效学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试药 独一味水提物购自甘肃省玛曲县黄河首曲药源开发有限公司;独一味总环烯醚萜苷由本实验室制备，纯度＞56%;云南白药(云南白药集团股份有限公司，批号:20040320);淀粉。

1.1.2 实验动物 昆明种小鼠80只，雄性，体质量20～25 g，购自甘肃省生物制品研究所;健康SD大鼠30只，雄性，体质量200～250 g，单笼饲养，自由饮水进食，由兰州大学动物中心提供，动物合格证号:SCXK(甘)2009-0004。新西兰大耳白兔，雌雄各半，由兰州生物制品所提供，动物合格证号:SCXK(甘)2009-0012。

1.2 实验方法

1.2.1 小鼠断尾出血模型 参考文献［11］的方法。将昆明种小鼠随机分为4组，即淀粉组、独一味水提物组、总环烯醚萜苷组、云南白药组，每组20只。禁食12～16 h后，将小鼠置于固定器中，使其尾部垂直，在距尾尖1 cm处剪断，待有血流出时，将尾巴插入受试药散中浸没30 s，然后每隔10 s用滤纸轻轻吸去血滴1次，至血液自然停止(滤纸吸时无血)，计算从剪断尾巴至止血的时间。若出血量多，可以称滤纸的质量以计算出血量。

1.2.2 兔腹主动脉、耳中动脉出血模型 参考文献［12］的方法。将新西兰大耳白兔随机分为4组，即淀粉组、独一味水提物组、总环烯醚萜苷组、云南白药组，每组8只。将已禁食24 h的动物用3%戊巴比妥钠0.9%氯化钠溶液9 mL耳缘静脉麻醉，固定，手术暴露腹主动脉，眼科剪于腹主动脉纵向剪开创口约2 mm。将药物粉末0.5 g均匀涂洒在创口表面及四周，上铺一层纱布5 cm×10 cm，将砝码200 g外包薄塑料膜压于创口之上，2 min后移除砝码，观察是否止血，若未止血则继续以砝码压住创面，直到止血为止，记录止血时间。将已禁食24 h的动物麻醉后，固定于兔固定架上，固定耳朵并暴露耳中动脉，手术刀割开约2 mm长创口，将药物粉末0.5 g均匀涂洒在创口表面及四周，上辅一层纱布5 cm×10 cm，将砝码200 g外包薄塑料膜压于创口之上，2 min后移除砝码，观察是否止血，若未止血则继续以砝码压住创面，直到止血为止，记录止血时间。

1.2.3 大鼠肝损伤模型 参考文献［12］的方法。SD大鼠28只，随机分为淀粉组、独一味水提物组、总环烯醚萜苷组、云南白药组，每组7只。大鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg·kg-1，麻醉后仰面固定于手术台上。腹部去毛，用酒精棉球消毒。沿腹中线打开腹腔，取出肝左下叶，用10号手术刀造创面0.8 cm×0.2 cm，擦去血液，立即将药物0.05 g撒于创口，不进行任何处理，观察10 min，以不再渗血为“止血”，记录止血时间。

2 结果

2.1 小鼠断尾出血时间 实验结果表明，独一味总环烯醚萜苷组停止出血时间为(64.8±25.0)s，独一味水提物组为(97.2±44.0)s，云南白药组为(105.1±65.0)s，淀粉对照组为(124.8±43.2)s。独一味总环烯醚萜能明显缩短小鼠断尾出血时间，与淀粉对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，独一味水提物组和云南白药组与淀粉对照组比较差异无统计学意义(P ＞0.05)。

2.2 兔腹主动脉和耳中动脉出血时间 兔腹主动脉和耳中动脉切口模型用4种不同方法处理后，止血时间结果见表1。独一味总环烯醚萜苷在大动脉、大量出血时的止血作用更好。

表1 4组兔腹主动脉和耳中动脉创伤止血实验结果Tab．1 The hemostatic effects on the trauma of rabbit abdom inal aorta and ears artery in 4 groups ±s

表1 4组兔腹主动脉和耳中动脉创伤止血实验结果Tab．1 The hemostatic effects on the trauma of rabbit abdom inal aorta and ears artery in 4 groups ±s

与淀粉对照组比较，*1 P＜0.01;与云南白药组比较，*2 P＜0.01，*3 P ＜0.05Compared with starch group，*1 P ＜ 0.01;Compared with yunnan baiyao powder group，*2 P ＜0.01，*3 P ＜0.05

组别 兔/只兔腹主动脉创伤止血时间/min兔耳中动脉创伤止血时间/s独一味水提取物组 8 5.7±3.9*1*2 159.9±48.7*1独一位总环烯醚萜苷组 8 3.2±1.9*1*3 110.0±37.1*1*2云南白药组 8 8.9±4.7*1 185.6±57.3*1淀粉对照组8 20.3±6.5 378.2±60.3

2.3 大鼠肝脏损伤出血时间 实验结果表明，总环烯醚萜苷组平均止血时间为(93.8±39.5)s，独一味水提物组为(101.1±25.9)s，云南白药组为(74.0±26.3)s，淀粉对照组为(152.8±47.1)s。肝组织止血实验结果显示，独一味总环烯醚萜苷、云南白药和独一味水提物对肝脏的止血时间均明显缩短，与淀粉对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。云南白药的平均止血时间明显短于独一味总环烯醚萜苷。

3 讨论

独一味为藏区重要的止血、镇痛良药，目前将其开发成片剂、胶囊等剂型应用广泛。其主要含包括黄酮类、环烯醚萜类、苯乙醇苷类、挥发油及其他类［13］。独一味水提物及其有效部位总环烯醚萜苷显示出很好的止血作用，能够提高血浆纤维蛋白原含量［8］。据其他研究结果显示，独一味还具有促进伤口愈合、镇痛抗炎的作用，因此具有很好的开发价值。

研究结果表明，与对照组相比，外用独一味总环烯醚萜苷或水提物，无论是对小鼠断尾、兔耳中动脉、腹主动脉，还是对肝组织出血都能明显缩短出血时间，但总环烯醚萜苷组优于水提物。由于云南白药组出血时间明显长于两个给药组，故止血作用很可能是由于独一味的成分，而不是粉剂本身。在使用中发现，独一味总环烯醚萜苷具有很强的吸水性，可促进血液凝固，且吸水后呈糊状，黏附性增强，能很好黏附在伤口，从而达到止血目的。但作为外用制剂，其止血机制是否还与提高血小板聚集率、收缩血管有关有待进一步研究。

［1］ 江苏新医学院.中药大辞典(上册)［M］.上海:上海人民出版社，1977.

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［3］ 朱剑文，张艳，万盈璐.独一味胶囊治疗顽固性细菌性阴道病［J］.医药导报，2003，22(7):453.

［4］ 万光华.独一味胶囊对巩固药物流产的疗效［J］.医药导报，2003，22(7):449.

［5］ 梁重栋.藏药独一味的基础与临床研究［J］.兰州大学学报:医学版，1987，40(2):47.

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［11］ WHITE C M，FAN C，CHOW M.An evaluation of the hemostatic effect of externally applied notoginseng and notoginseng total saponins［J］．J Clin Pharmacol，2000，40:1150-1153.

［12］ 李仪奎.中药药理实验方法学［M］.2版.上海:上海科学技术出版社，2006:843-846.

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