张秋雨，于永军，回景芳，杨桂染，王梅

(沧州医学高等专科学校医学系，河北沧州 061001)

抑郁症属中医“郁证”范畴，中医对郁证的认识和治疗，几千年来积累丰富的经验。本病病机关键在于气阴两虚、虚火内扰，脏腑主要涉及心、肺、脾、肾。百合地黄汤和甘麦大枣汤均有用于抑郁症的临床报道［1-4］。根据“谨守病机，异病同治”的原则，本课题组临床常用百合地黄汤合甘麦大枣汤(百合、地黄、甘草、小麦、大枣)治疗此类病症，常获佳效。笔者在本研究以小鼠强迫游泳、悬尾应激及利血平拮抗等实验，观察百合地黄汤加甘麦大枣汤对小鼠抑郁模型的影响，为百合地黄合甘麦大枣汤临床上用于治疗抑郁症提供药效学依据，为临床开发方便适用的有效剂型奠定药效学基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 昆明种小鼠，河北医科大学实验动物中心提供，雄性，体质量(20±2)g。

1.1.2 药品与试药 百合地黄汤加甘麦大枣汤(BG)由经方百合地黄汤与甘麦大枣汤组成(生地黄12 g，百合21 g，炙甘草、大枣各6 g，小麦30 g煎煮)，所用中药饮片均购自河北天元药业有限公司，并经本校天然药物鉴定教研室鉴定，均为正品，符合药品标准。按常规方法水煎2次，合并2次水煎液，浓缩成含生药1.50和0.75 g·mL-1的药液，低温保存备用。盐酸氯米帕明片由湖南洞庭药业股份有限公司生产，每片含盐酸氯米帕明25 mg，批号:061015，临用时加温纯化水研磨均匀(含盐酸氯米帕明2.0 mg·mL-1)。利血平注射液由广东邦民制药厂有限公司生产，批号:060103。

1.1.3 仪器 电热恒温水浴锅为苏州威尔实验用品有限公司产品，秒表为山佳国际工贸有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与给药 昆明种小鼠40只，随机分成4组，分别为模型组、高剂量药物组、低剂量药物组及阳性对照组，每组10只。阳性对照组灌胃给予盐酸氯米帕明溶液0.04 g·kg-1，高、低剂量药物组分别给予 BG 30，15 g·kg-1，均按 20 mL·kg-1灌胃给予相应药物，模型组按给予同容量0.9%氯化钠溶液，连续灌胃给药7 d。

1.2.2 小鼠悬尾实验 参照文献［5］进行造模。末次给药后30 min，将其尾部2 cm处的部分贴在一水平木棍上，使动物成倒挂状态，其头部离台面约5 cm，悬挂两侧用板隔开动物视线，观察记录各组小鼠在6 min内的不动时间。

1.2.3 小鼠强迫游泳实验 参照文献［5］进行造模。末次给药30 min后，放入2 000 mL烧杯中(高20 cm，直径14 cm，水深10 cm)，并置于水浴锅内，调节水温23～25℃，每烧杯放入小鼠1只，置水中观察6 min，记录各组小鼠后4 min内累计不动时间。

1.2.4 利血平拮抗实验 参照文献［5］进行造模。末次给药30 min后，腹腔注射利血平4 mg·kg-1，观察小鼠眼睑下垂情况，准确记录眼睑开始下垂的时间，1 h时的眼睑下垂度。按Rubin分级标准，判断下垂度(完全开眼为0分，1/4闭眼为1分，1/2闭眼为2分，3/4闭眼为3分，完全闭眼为4分)。

1.2.5 统计学方法 所有数据资料用SPSS12.0统计软件包进行处理，均以均数±标准差(x±s)表示，数据处理组间比较采用单因素方差分析。

2 结果

2.1 BG对小鼠悬尾不动时间和游泳不动时间的影响结果见表1。从表1可以看到，BG和氯米帕明都能明显缩短悬尾不动时间和游泳不动时间，高、低剂量药物组与模型组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05)。

2.2 BG拮抗利血平作用 结果见表2。从表2可以看到，BG和氯米帕明都能明显延长眼睑下垂出现时间，减少眼睑下垂度，高、低剂量药物组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01);高剂量药物组与低剂量药物组比较，眼睑?开始下垂时间明显延长，存在一定的量效关系，差异有统计学意义(P＜0.01)。

表1 4组小鼠悬尾不动时间和游泳不动时间比较Tab．1 The com parisons of the immobility time of m ice in tail suspension test and forced sw imm ing test in 4 groups s，±s

表1 4组小鼠悬尾不动时间和游泳不动时间比较Tab．1 The com parisons of the immobility time of m ice in tail suspension test and forced sw imm ing test in 4 groups s，±s

与模型组比较，*1 P＜0.05，*2 P＜0.01Compared with themodel group，*1 P ＜0.05，*2 P ＜0.01

组别 剂量/(g·kg-1)小鼠/只悬尾不动时间游泳不动时间百合地黄汤加甘麦大枣汤高剂量药物组 30 10 49.80±39.52*1 78.00±37.92*1低剂量药物组 15 10 49.20±33.10*1 81.70±34.59*1阳性对照组 0.04 10 24.90±28.71*2 32.60±36.82*2模型组 …10 79.40±25.17 113.90±19.81

表2 4组小鼠眼睑开始下垂时间和眼睑下垂评分比较Tab．2 Comparison of the initial time and scores of ptosis among the 4 groups ofm ice ±s

表2 4组小鼠眼睑开始下垂时间和眼睑下垂评分比较Tab．2 Comparison of the initial time and scores of ptosis among the 4 groups ofm ice ±s

与模型组比较，*1 P＜0.01;与低剂量药物组比较，*2 P＜0.01Compared with the model group，*1 P ＜0.01;Compared with the low-dose group，*2 P ＜0.01

组别 剂量/(g·kg-1)小鼠/只眼睑开始下垂时间/s眼睑下垂评分/分百合地黄汤加甘麦大枣汤高剂量药物组 30 10 18.00±6.25*1*2 2.30±1.34*1低剂量药物组 15 10 10.30±2.87*1 2.50±1.08*1阳性对照组 0.04 10 12.40±4.67*1 2.50±1.65*1模型组 …10 6.20±3.00 4.00±0.00

3 讨论

据临床研究报道百合地黄汤加味治疗抑郁症疗效显著［3-4］。百合能清肺经气分热邪，养肺中阴气;地黄清心经营分之热，并益心肾之阴;甘草、小麦及大枣养心气以宁神，补脾土以生血。本复方中所用药物多为药食两用或保健食品可用药品，安全性高，长期使用不容易产生不良反应，因此具有良好的应用优势和开发前景。甘麦大枣汤主治情志不舒，肝郁化火伤阴，或思虑过度，临床报道具有抗抑郁疗效［2］，本课题BG由百合地黄汤联合甘麦大枣汤组成，通过研究该联合方剂对抑郁小鼠模型的影响，为临床用药提供实验依据。

强迫游泳实验由PORSOLT于1977年首先提出，并在此基础上提出了小鼠悬尾实验，这两个实验各提供了一个无可回避的压迫环境，实验中小鼠所体现出来的不动状态，被称之为“行为绝望”［6］。这两种行为绝望模型对抗抑郁药敏感，操作简单、快捷，被广泛用于研究药物的抗抑郁作用。实验结果表明，阳性对照组和高、低剂量药物组能缩短小鼠悬尾不动时间和游泳不动时间。

目前研究认为，抑郁症的发生与脑中去甲肾上腺素(noradrenaline，NA)不足和中枢神经系统中NA含量下降密切相关［7］。利血平可耗竭中枢单胺类神经递质NA、多巴胺(dopamine，DA)等，引起抑郁。抗抑郁药如单胺氧化酶抑制药和三环类抗抑郁药等均对抗利血平所引起的抑郁，能增加中枢NA的含量，提高NA神经的功能作用。研究结果表明，盐酸氯米帕明和高、低剂量BG能显著拮抗利血平所致的小鼠眼睑下垂度，延迟小鼠眼睑开始下垂的时间。高剂量药物组和盐酸氯米帕明组比较眼睑开始下垂的时间和眼睑下垂度差异无统计学意义，高剂量药物组与低剂量药物组比较眼睑开始下垂的时间差异有统计学意义，存在明显的剂量依赖性，高剂量药物组拮抗利血平所致的小鼠眼睑下垂效果优于低剂量药物组。

本实验结果表明，BG对小鼠行为绝望模型和利血平拮抗模型，表现出较好的抗抑郁作用，特别是利血平拮抗实验，BG抗抑郁作用存在明显的剂量依赖性。有关其抗抑郁机制，推测其可能与对抗中枢的NA减少，增强中枢NA神经的功能有关。

［1］ 白国生.百合地黄汤加味治疗更年期抑郁症20例［J］.江苏中医，1995，16(8):13.

［2］ 李道仪.甘麦大枣汤治疗抑郁症［J］.南京中医学院学报，1994，10(1)：21.

［3］ 张志亭，张彦平，李素水，等.甘麦大枣汤合百合地黄汤治疗神志病举隅［J］.河北中医，2006，28(3):203.

［4］ 张景凤，仝桂兰，侯庆，等.加味百合地黄汤对中风后焦虑状态的临床疗效观察［J］.中草药，2005，36(5):737.

［5］ 杨士友，黄世福，孙备，等.白芍解郁颗粒对小鼠抑郁模型的影响［J］.安徽医药，2004，8(2):87-88.

［6］ BORSINIF，VOLTERA G，MELIA.Does the behavioral despair testmeasure despair［J］.Physiology Behavior，1986，38(3):385-386.

［7］ VIOLETTA K，CRAIG S.Reduced levels of norepinephrine transporters in the locus coeruleus inmajor depression［J］.J Neuroscience，1997，17(21):8451-8458.