北京市朝阳区药品检验所（100028）肖宏华 甄诚 许佳

血竭为我国传统伤科用药，现版《中国药典》规定为棕榈科植物麒麟竭果实渗出的树脂制成的加工品[1]，龙血竭是我国研制的血竭替代品，于1999年获批局颁标准WS3-082(Z-016)-99(Z)，原植物为百合科剑叶龙血树。两者功效相似，但价格相差较大，从性状来看二者极其相似，有些药品生产企业在购进时如果把关不严，可能以龙血竭代替血竭投料。我们在日常检测中发现，处方标明为血竭的通络活血胶囊[国家食品药品监督管理局标准（试行）WS-5574(B-0574)-2002]就存在这种现象。照该制剂质量标准，采用薄层色谱法进行鉴别，无法准确地对血竭与龙血竭区别和定性。本文参考[2～4]相关文献，以特征成分龙血素A、龙血素B和血竭对照药材为参照物建立了HPLC鉴别方法，可以准确识别通络活血胶囊中是否含有以上两种药味。该法灵敏准确，重现性良好，可有效地对通络活血胶囊和同类含血竭或龙血竭的制剂进行鉴别。

1 仪器与试药

Waters 2695高效液相色谱仪（2698 PDA 检测器，Epower2工作站），Sartorius BT25S电子天平，Mettler-TOLEDOXS 204 电子天平， 龙 血 素A 对照品（ 11660 -200402）、龙血素B对照品（111558-200405）和血竭对照药材（120906-200609）均购自中国食品药品检定研究院，乙腈（色谱纯，J.T.Baker公司），冰醋酸、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷（分析纯，北京化工厂），实验用纯化水（自制），通络活血胶囊（市售）。

附图1 HPLC色谱图

2 方法与结果

2.1 色谱条件 Waters SunFireTMC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为1%冰醋酸溶液-乙腈（58:42）；检测波长280nm；3D扫描（210nm～400nm）；柱温30℃；流速1.0ml/min。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取龙血素A对照品6.80mg、龙血素B对照品5.42mg，分别置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度。分别精密量取上述两种对照品溶液各5ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

2.3 供试品溶液的制备 取供试品粉末1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入二氯甲烷25ml，密塞，称定重量。超声处理30分钟，放冷，再称定重量。用二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

2.4 血竭对照药材溶液的制备 取血竭对照药材0.2g，精密称定，照2.3项制成对照药材溶液。

2.5 结果 从附图1中可见，龙血竭的特征成分龙血素A、龙血素B与血竭对照药材的特征峰均分离良好，且相互无干扰。0～11min主要是处方中其他药味的特征峰，11～17min主要是血竭的特征峰，比较明显的有色谱峰1和2，17～25min主要是龙血竭的特征峰，3、4号峰分别对应龙血素A和B。本文建立的方法可以准确区分所投原料是血竭抑或龙血竭，甚至两者混合投料也可以识别。我们还采集了这4个成分对应的紫外光谱图，结果表明供试品峰的光谱图与对照品和对照药材一致，进一步佐证了我们的推测，见附图2。

3 讨论

附图2 成分1～4对应紫外光谱图

3.1 制备供试品溶液时比较了甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷三种溶剂的提取效果，其中甲醇提取杂质最多，二氯甲烷与三氯甲烷提取无明显差异，但三氯甲烷毒性较大，故选择二氯甲烷。

3.2 试验中考察了不同品牌的高效液相色谱仪和色谱柱，结果表明色谱峰的保留时间稍有差异，但整体分离效果较为一致，均可区分血竭特征区和龙血竭特征区。

3.3 本方法除了对通络活血胶囊进行鉴别外，对其他含血竭或龙血竭类似的制剂均有参考价值和意义。