田莉 辛娟

宫颈癌组织中Survivin表达及其对细胞增殖活性的影响

田莉 辛娟

宫颈肿瘤;增殖细胞核抗原;Survivin;免疫组织化学

宫颈癌是最常见的女性生殖系统肿瘤，其局部侵袭力强，其浸润和转移直接影响患者的治疗和预后。增殖细胞核抗原(PCNA)能反映细胞增殖活性。Survivin是迄今发现最强的凋亡抑制因子，研究表明Survivin与肿瘤的发生、发展密切相关［1］。我们应用免疫组织化学SP法检测宫颈癌组织中Survivin和PCNA基因的表达，为临床治疗及提高患者的生存率提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 取自郑大一附院病理科2009年存档的38例住院患者手术切除宫颈鳞状细胞癌组织石蜡标本，术前均未接受放疗和化疗。年龄30～74岁，平均53岁。参照国际妇产科联盟(FIGO)1995年修订的临床分期标准：Ⅰa期5例，Ⅰb期9例，Ⅱa期11例，Ⅱb期13例。其中淋巴结转移者25例，无转移者13例。病理分化程度：高分化16例，中分化11例，低分化11例;另取10例正常宫颈组织作为对照。

1.2 Survivin和PCNA检测 采用免疫组织化学SP法，SP试剂盒购于北京中山生物技术有限公司，用兔抗人Survivin多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)检测Survivin的表达，PCNA单克隆抗体(Zymed公司产品)检测PCNA的表达，严格按照说明书操作。已知阳性宫颈癌切片作为阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。结果判定：以细胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，400倍镜下计数500个细胞，≥10%为阳性，＜10%为阴性。

1.3 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件包进行分析。计数资料采用χ2检验，相关性分析采用Spearman相关分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

PCNA免疫组化阳性细胞为胞核着色，宫颈癌组PCNA标记指数(10.2% ～71.6%)高于正常组(＜5%)(P＜0.05)。在中、晚期组中PCNA的表达差异有统计学意义(P＜0.05)，分化程度越差，PCNA表达越高。Survivin蛋白阳性染色颗粒主要定位于肿瘤细胞胞浆内，宫颈癌组Survivin蛋白阳性表达率61.3%显著高于正常组0%，差异有统计学意义(P＜0.05)。Survivin蛋白阳性表达率：淋巴结转移组73.2%显著高于无淋巴转移组(46.3%)，Ⅰ期组(48.0%)高于Ⅱ组(70.4%)(均P＜0.05)。Survivin阳性表达与PCNA标记指数呈显著正相关(r=0.537，P＜0.05)。

3 讨论

多细胞生物体细胞数量恒定取决于细胞增殖与凋亡间的动态平衡，破坏平衡可导致肿瘤的发生。在恶性肿瘤病变中，细胞增殖和凋亡同时增加，但增殖速率明显大于凋亡速率［2］。Survivin具有强大的凋亡抑制功能，其异常表达与多种人类肿瘤的发生发展及预后密切相关［3］。本研究显示，Survivin在正常宫颈组织中不表达，宫颈癌中Survivin表达率显著高于正常宫颈组织，提示Survivin基因的表达发生在宫颈癌恶性转化的早期，表明Survivin基因与宫颈癌的发生有关。对Survivin蛋白的检测可作为早期宫颈癌的辅助诊断。本研究证实，淋巴结转移组Survivin蛋白阳性表达率显著高于无淋巴转移组，Ⅱ期组高于Ⅰ期组，随临床分期增加及淋巴结的转移，Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin基因不但参与原位肿瘤形成过程的调节，促进其发展，可能还参与癌细胞转移过程的调节，在转移过程中发挥作用。

PCNA是DNA聚合酶的辅助因子，参与DNA的合成并在细胞周期中起重要的调控作用。研究发现，PCNA与许多恶性肿瘤病理分级、临床分期及淋巴结或脏器转移有关，并可用于临床诊断、指导治疗以及预后评估［4］。本研究发现宫颈癌患者PCNALI与正常宫颈组相比有显著性差异，提示细胞的异常增殖对肿瘤的发生发展起了重要作用。本研究中PCNA的阳性表达与宫颈癌的浸润深度有关，分期越晚PCNA的表达越高。这提示宫颈癌一旦浸润转移后，癌细胞增殖活性大大增加，恶性程度明显增高。本研究发现Survivin、PCNA在宫颈癌组织中的表达中随着病理分期越高表达指数明显增高，两者呈正相关。PCNA蛋白检测可直接反映细胞合成代谢及增殖状态，Survivin基因在宫颈癌组织中的表达可能抑制了异常突变的细胞的凋亡，从而扰乱了细胞生长和凋亡途径，促使细胞逃离生长监控，两者相互协同，可能造成了宫颈癌浸润、转移，至于其详细机制还有待于进一步研究。

［1］ 张改凤.宫颈癌中Survivin基因表达及临床意义.山东医药，2006，46(29)：33-34.

［2］ 徐红梅，赵丽晶，梁作文.宫颈癌差异表达蛋白的相关性研究.中国实验诊断学，2010，14(10)：1535-1538.

［3］ 朱华，杨孝军，施铮铮.凋亡抑制基因Survivin在宫颈癌和癌前病变中的表达及其意义.中国医师杂志，12(4)：541-543.

［4］ 梁莹莹，李琦，李晶.Survivin和bcl-2蛋白在宫颈病变中的表达及其意义.中国癌症防治杂志，2010，2(3)：186-188.

450000 郑州澍青医学高等专科学校

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