黄 华，郑 明，何志刚，程 闯△

（1. 浙江省衢州市食品药品检验研究院，浙江 衢州 324000； 2. 浙江龙游聚兴医药科技有限公司，浙江 衢州 324400）

注射用芝麻油为药用辅料，主要作为生产注射液的制药溶剂，用量较大。其由芝麻油通过碱炼、水洗、脱色、脱臭等精制过程除去系列杂质得到。生产过程中，原料、辅料、生产设备等均可能引入元素杂质，诱导药物降解，并存在潜在毒性［1］，故需控制其残留量，并评估产品风险［2-6］。由于我国审评审批制度改革中药用辅料关联审评制度的实行及药物注射剂审评审批有关要求更加严格，应对注射剂所用辅料建立完善的质量保证体系，并在元素杂质等方面建立严格的控制措施和标准。基于此，本研究中参照人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）Q3D 元素杂质指导原则［7-8］，结合注射用芝麻油的生产工艺及给药途径，确定需对其中1 类［铅（Pb）、镉（Cd）、砷（As）、汞（Hg）］、2A类［钴（Co）、钒（V）、镍（Ni）］和3 类［锂（Li）、锑（Sb）、铜（Cu）］元素进行风险评估和控制，并参考文献［9 - 15］，建立了电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定注射用芝麻油中无机元素的含量，为评估和控制其中的无机元素提供数据支持。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

7900 型ICP - MS 仪（美国Agilent 公司）；XP205 型电子天平（瑞士Mettler Toledo 公司，精度为0.01 mg）；Elix Essential 5 型超纯水机（法国Millipore 公司）；Multiwave Pro微波消解仪（奥地利Anton Paar公司）。

1.2 试药

注射用芝麻油（浙江龙游聚兴医药科技有限公司，批号分别为20190901，20210401，20210701）。Pb，Cd，Co，V，Ni，Li，Sb，Cu 单元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，质量浓度为1 000 μg/mL）；As单元素标准溶液（上海安谱实验科技股份有限公司，质量浓度为1 000 μg/ mL）；金（Au）单元素标准溶液（美国AccuStandard 公司，质量浓度为1 000 μg/mL）；Hg 单元素标准溶液（质量浓度为10 μg/ mL），内标溶液［Li、钪（Sc）、锗（Ge）、铟（In）、铋（Bi）等，质量浓度为100 μg/mL］，均购于美国Agilent 公司；硝酸、盐酸均为优级纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 试验条件

射频功率：1 500 W；雾化室温度：2 ℃；等离子气流速：15.0 L/ min；辅助气流速：0.8 L/ min；载气（氩气）流速：0.8 L/min；氦碰撞模式（流速：3.0 mL/min）。

2.2 溶液制备

混合元素标准系列溶液：分别精密量取上述10种待测元素标准溶液各适量，用5%硝酸溶液稀释，制成每1 mL中分别含Pb，Cd，As，Hg，Co，V，Ni，Li，Sb，Cu 0.25，0.1，0.8，0.15，0.25，0.5，1，12.5，4.5，15 μg的混合元素标准贮备液（含5%盐酸溶液）；精密量取0.25，0.5，1.0，2.0，2.5 mL，加入Au单元素标准溶液（1 μg/mL）0.2 mL，置50 mL容量瓶中，用5%硝酸溶液定容，即得（见表1）。

表1 混合元素标准系列溶液（ng/mL）Tab.1 Standard series solution of mixed elements（ng / mL）

内标溶液：精密量取1.2项下内标溶液适量，用5%硝酸溶液稀释，制成质量浓度为1 μg/mL的溶液。

供试品溶液及空白溶液：取样品0.5 g，精密称定，置聚四氟乙烯消解管中，加硝酸4 mL，120 ℃预消解30 min，放置过夜，加过氧化氢溶液1 mL，混匀，密闭，置微波消解仪中，程序升温消解（消解程序见表2）；消解完成后，冷却至室温，将溶液定量转移至50 mL 容量瓶中，用少量水洗涤3次，合并洗涤液至容量瓶中，再加入Au 单元素标准溶液（1 μg/mL）0.2 mL，用水定容，摇匀，即得。不取样品，同法制备空白溶液。

表2 微波消解程序Tab.2 Procedure of microwave digestion

2.3 方法学考察

系统适用性试验：取混合元素标准系列溶液（编号3），按2.1 项下试验条件进样测定，共4 次，计算信号漂移值。结果10 种待测元素的漂移值为0.91%～10.62%，均未超过15%，符合要求。

专属性试验：取稀释液（5%硝酸溶液）、空白溶液和混合元素标准系列溶液（编号1）各适量，分别按2.1 项下试验条件进样测定，结果稀释液和空白溶液中各元素的仪器响应值均较低，且远小于定量限溶液，说明稀释液和空白溶液对测定影响小，专属性良好。

线性关系考察：取稀释液（5%硝酸溶液）和2.2 项下混合元素标准系列溶液各适量，按2.1项下试验条件依次进样测定，采用内标标准曲线法，以各元素与内标仪器响应值比值（Y）为纵坐标、待测元素质量浓度（X，ng/mL）为横坐标进行线性回归。结果见表3。

表3 线性关系及检测限考察结果Tab.3 Results of the linear relation test and LOD investigation

检测限考察：取2.2项下空白溶液适量，按2.1项下试验条件连续进样测定11 次，以空白溶液仪器响应值的3倍标准偏差对应质量浓度为检测限，结果见表3。

定量限考察：取混合元素标准系列溶液（编号1）适量，共3 份，按2.1 项下试验条件进样测定，计算各待测元素的质量浓度和加标回收率，结果Pb，Cd，As，Hg，Co，V，Ni，Li，Sb，Cu 的定量限分别为0.125，0.05，0.4，0.075，0.125，0.25，0.5，6.25，2.25，7.5 μg/g，加标回收率为75.1%～108.0%，表明各元素定量限测定结果符合准确度和精密度的要求。

重复性试验：取样品（批号为20190901）0.5 g，精密称定，按2.2 项下方法制备供试品溶液，加混合元素标准贮备液1.0 mL，平行6份，按2.1项下试验条件进样测定。结果各元素含量的RSD为1.53%～2.28%（n= 6），表明方法重复性良好。

中间精密度试验：由另一分析人员在不同时间，按重复性方法进行试验，共测定12次。结果各元素含量的RSD为2.28%～9.74%（n= 12），表明方法的中间精密度良好。

加样回收试验：取样品（批号为20190901）0.5 g，精密称定，按2.2 项下方法制备供试品溶液，各9 份，按限度浓度的80%，100%，120%加入各待测元素标准溶液，计算各元素与内标仪器响应值比值，并计算加样回收率。结果见表4。

表4 加样回收试验结果（n=9）Tab.4 Results of the recovery test（n = 9）

2.4 样品中10 种无机元素含量测定

取3 批样品各适量，按2.2 项下方法制备供试品溶液，按2.1 项下试验条件进样测定。根据注射用芝麻油生产工艺流程，参考ICH Q3D 指导原则［7］，以供注射用辅料中此10 种元素的允许质量浓度为本试验的元素杂质限度。3 批样品中仅批号20190901 可检出Co（0.025 5 μg/g）、Sb（0.043 0 μg/g），批号20210701 可检出Co（0.001 2 μg/ g）。Pb，Cd，As Hg，Co，V，Ni，Li，Sb，Cu的限度值分别为0.5，0.2，1.5，0.3，0.5，1，2，25，9，30 μg/g。可见，各批样品无机元素含量远小于限度值。

3 讨论

3.1 前处理条件

本试验中以微波消解法行样品前处理，因芝麻油为含高碳链化合物，难消解，故预试验中考察了硝酸+双氧水、硝酸+ 盐酸和硝酸+ 硫酸不同组合的消解效果，结合本课题组前期研究结果得出最佳消解条件，使样品消解完全，符合检测要求，满足方法学验证要求。

3.2 内标元素选择

本研究中采用内标标准曲线法进行分析，能减少工作条件变化对分析结果的影响，还能消除基质干扰，从而提高定量分析的准确度。前期试验显示，7Li选用其他内标元素测定时，内标液中的6Li 有一定的干扰作用，而选用6Li作为7Li的内标元素测定时，结果符合方法学要求。

3.3 方法评价

药用辅料的质量对药品的安全性、有效性、稳定性有重要影响。本研究中建立了测定注射用芝麻油中10种无机元素含量的ICP-MS法，方法灵敏，结果准确可靠，符合国际国内最新药典及法规要求，以此对3批注射用芝麻油中各无机元素含量进行测定，结果均远小于ICH Q3D中注射用辅料元素杂质规定的限度值，表明注射用芝麻油中元素杂质风险低，安全系数较高。该结果还能为评估和控制产品中元素杂质的含量提供数据基础。