陆 雯,任锦烨,何湘伟,唐 亮,李建明△

(长沙医学院：1.临床学院;2.神经变性病基础与临床湖南省高校重点实验室,长沙 410219)

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)以进行性的学习和记忆功能下降为主要临床表现[1],65岁以上人群AD的发病率约为5%[2]。AD的发病机制尚不明确,脑内局部炎症被认为是AD发生、发展的重要因素[3-4]。目前,神经胶质细胞尤其是小胶质细胞的活化在神经炎症中的作用已被广泛证实[5]。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在哺乳动物海马的发育、营养支持和神经可塑性中起着重要作用[6]。研究表明,BDNF或其受体酪氨酸激酶受体(tropomyosin-related kinase B,TrkB)水平降低的动物存在行为缺陷[7]。BDNF诱导缺失的小鼠涉及前脑包括皮质、海马体和杏仁核特异性缺失[8]。此外,研究表明BDNF与AD、帕金森病和神经退行病变相关[9-11]。AD和帕金森病患者BDNF mRNA和蛋白表达降低[12-13]。但在AD动物模型中,BDNF表达趋势说法不一致。本研究通过双侧脑室注射β-淀粉样蛋白25～35(amyloid β-protein 25-35,Aβ25～35)构建AD样小鼠模型,采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、ELISA、Western blot、免疫组织化学、实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,RT-qPCR)等方法,探讨Aβ25～35脑内注射对炎症因子及BDNF表达的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验动物及分组

动物实验均在长沙医学院神经科学与行为研究中心完成。动物实验过程遵循道德标准和《赫尔辛基宣言》,研究过程得到了长沙医学院动物伦理委员会的批准。取40只6周龄雄性昆明小鼠(长沙天勤生物科技有限公司),均置于可控条件下饲养,温度(23.0±0.6)℃,相对湿度(55±8)%,光暗周期12 h∶12 h。采用随机数字表法,将小鼠分为4组(各10只),均采用单次双侧脑室注射Aβ25～3520 mg/kg建立AD小鼠模型,注射后分别观察0 d(0 d组)、7 d(7 d组)、14 d(14 d组)和28 d(28 d组)。……