黄色短杆菌中L-异亮氨酸同位素丰度及分布的分析方法研究
2024-03-20赵雅梦范若宁
分析测试学报 2024年3期
关键词:方法
赵雅梦,范若宁,雷 雯*
(1.上海化工研究院有限公司,上海 200062;2.上海市稳定同位素检测及应用研发专业技术服务平台,上海 200062)
利用同位素标记技术将化合物中普通原子替换为同位素核素所合成的稳定同位素标记化合物,结合质谱技术,已在蛋白质组学、代谢组学、生物靶标发现、临床诊断等生命科学研究中发挥重要作用[1-4]。13C、15N标记赖氨酸、精氨酸等是细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记技术(SILAC)中必备的关键试剂[5-6],也是代谢流量分析中的常用示踪剂[7-8]。微生物发酵法是同位素标记氨基酸的主要合成方法,将培养基中的营养组分替换为稳定同位素标记化合物,经微生物发酵、提纯等即可得到同位素标记氨基酸[9-10]。同位素丰度是稳定同位素标记氨基酸产品的重要参数之一,决定了批次产品的质量水平,也是稳定同位素标记氨基酸在蛋白质定量、代谢流等下游应用研究中的重要考察指标。高丰度稳定同位素标记氨基酸产品的应用需求大,对试剂质量要求也较高。
目前,气体同位素质谱法和有机质谱法是同位素丰度分析的两种重要方法,前者通过高温燃烧等方式将C、N元素转化为CO2和N2,适用于检测纯度较高的同位素试剂[11]。后者则是基于化合物同位素质量数的差异完成丰度计算,如上海化工研究院开发的基于“质量簇”的有机质谱同位素丰度[12-13]。近年来,高分辨质谱仪因具有超高分辨率、高灵敏度等特点成为同位素丰度和分布分析的主流工具。……
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