林 青，梁晓涵，王 丹，杨兹伟，伍立锋

（海南省食品检验检测中心·国家市场监管重点实验室<热带果蔬质量与安全>，海南 海口 570314）

百香果又名鸡蛋果，学名西番莲Passion fruit，为西番莲科、西番莲属草质藤本植物，是常见的热带水果，品种主要有紫果、黄果和杂交品种，广植于热带和亚热带地区［1］，在我国的广东、海南、福建、云南、台湾等地大量栽培［2］。目前，百香果主要用作新鲜食品、保健品或药物配方等［3］。百香果果皮厚而坚硬，可用作饲料和提取果胶、色素等［4-5］；种子榨油，可供食用、制皂、制油漆等［6-7］；果实富含丰富的蛋白质、脂肪、糖类和多种维生素、氨基酸及微量元素［8］；果瓤可鲜食和加工，其加工制品主要为果酱、果冻、果露、果汁、口含片、水果酵素等［9-11］。百香果不同部位的提取物具有多种药理学活性，包括抗氧化、镇痛抗炎、抗菌、抗高血压、护肝、护肺、抗肿瘤、抗抑郁、抗焦虑等［12］。由于百香果的市场前景较好，热带地区大量引进种植［13］和长期连作导致百香果病虫害问题频发［14］。为有效防治病虫害，百香果种植常按园地规划、水分管理、生草栽培、药物防治等方式进行联合防治，其中药物防治是防治病虫害的重要手段［15-16］。目前，国外对农药检测的范围更广泛，国内对百香果中农药残留的分析和膳食摄入风险评估的文献较少，百香果的果皮、果肉和整果中的农药残留情况研究仅检索到4篇文献［17-20］，涉及农药仅有甲拌磷、乙酰甲胺磷、敌敌畏、灭线磷、氧乐果等有机磷类农药，无法反映生产过程中的实际用药情况。为此，本研究中采用气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）法和超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）法检测百香果的果肉、果皮和整果中的农药残留量，并评估其膳食摄入风险和联合暴露风险，为百香果的质量安全提供科学依据。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

MS1602TS 型电子天平（瑞士Mettler 公司，精度为百分之一）；HR2168 型搅拌机（荷兰Philips 公司）；BC-1000型多管旋涡混匀仪（深圳逗点生物技术有限公司）；320R 型台式高速冷冻离心机（德国Hettich 公司）；Milli-Q Advantage A10 型超纯水系统（德国Merck-Millipore 公司）；7000C 型GC-MS/MS 仪（美国Agilent公司）；TQ-S 型UPLC-MS/MS 仪（美国Waters公司）。

1.2 试药

72 种农药标准品（农业农村部环境保护科研监测所，纯度不低于99%）；乙酸乙酯、乙腈、甲苯（色谱纯，德国Merck 公司）；Cleanert MAS-Q 提取盐包（美国Agela 公司）；百香果（共37 批，编号分别为H1-H5，H8，B3，B5-B6，B9-B10 <海南>，B2，B11-B13，B15，H9<广西>，B1，B4，B7-B8，B16，B23-B25<云南>，B14，B17，B19，B21，H10 <贵州>，H6，H12-H15，B22<福建>，H7<江西>）。

2 方法与结果

2.1 样品制备

百香果样品用搅拌机匀浆5 min，分别制成百香果的果肉、果皮和整果，-20 ℃冻存，备用。

2.2 农药残留量测定

2.2.1 试验条件

参照《食品安全国家标准植物源性食品中331 种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》GB 23200.121-2021 和《食品安全国家标准 植物源性食品中208 种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法》GB23200.113-2018 中的方法建立试验条件，共检测72种农药。

1）UPLC-MS/MS条件。（1）色谱条件。色谱柱：Acquity UPLC HSS T3 柱（100 mm × 2.1 mm，1.8 µm）；流动相：0.1%甲酸水（A）-甲醇（B），梯度洗脱（0～0.5 min 时95%A，0.5～3.5 min时95%A→5%A，3.5～4.5 min时5%A，4.6～6 min 时95%A）；流速：0.4 mL/min；柱温：40 ℃；样品室温：15 ℃；进样量：1µL。（2）质谱条件。离子源：电喷雾电离（ESI）；扫描模式：正离子、多反应监测模式；毛细管电压：1 kV；雾化气温度：500 ℃；去溶剂气流量：800 L/h；碰撞气流量：0.1 mL/min；离子源温度：120 ℃。

2）GC-MS/MS 条件。（1）色谱条件。色谱柱：DB-5msUI 柱（30 m×0.25 mm，0.25µm）；柱温：程序升温，升至60 ℃，保持1 min，然后以40 ℃/min 的速率升至170 ℃，再以10 ℃/min 的速率升至310 ℃，保持3 min；进样量：1.0µL；载气流速：1.0 mL/min。（2）质谱条件。离子源：电轰击电离（EI）；离子源电压：70 eV；离子源温度：300 ℃；多反应监测模式；四极杆温度：180 ℃；碰撞气：氮气；载气：氦气。

2.2.2 农药整体检出情况

结果共检出农药37 种，其中杀虫剂19 种，杀菌剂15 种，杀螨剂2 种，植物生长调节剂1 种，杀菌剂和烟碱类杀虫剂在整果、果皮、果肉中检出率均较高（表1）。31 批（83.78%）整果样品中检出农药，共检出33 种农药残留，检出率排前5 位的农药分别为吡唑醚菌酯（91.89%），噻虫嗪（86.49%），多菌灵（81.08%），苯醚甲环唑（72.97%），噻虫胺（72.97%）；35 批（94.59%）果皮样品中检出农药，共检出35种农药残留，检出率排前5 位的农药分别为吡唑醚菌酯（97.30%），噻虫嗪（94.59%），多菌灵（86.49%），异菌脲（81.08%），苯醚甲环唑（78.38%）；23 批（62.16%）果肉样品中检出农药，共检出23 种农药残留，检出率排5 位的农药分别为噻虫嗪（81.08%），吡唑醚菌酯（54.05%），吡虫啉（54.05%），多菌灵（35.14%），腐霉利（29.73%）。阿维菌素、丙溴磷、哒螨灵、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、甲基硫菌灵、腈苯唑、克百威、涕灭威、溴氰菊酯在整果和果皮中均有检出，在果肉中均未检出。联苯菊酯、唑虫酰胺、戊唑醇、异菌脲在果肉中的检出率低于整果和果皮。在检出的农药中，我国尚缺少百香果中最大残留限量标准的农药有联苯菊酯、毒死蜱、氯氰菊酯、氰戊菊酯、唑虫酰胺、丙溴磷、氟氯氰菊酯、阿维菌素、溴氰菊酯、吡唑醚菌酯、腐霉利、戊唑醇、甲霜灵、霜霉威、烯酰吗啉、异菌脲、甲基硫菌灵、腈苯唑、百菌清、哒螨灵、乙螨唑、氯吡脲。

表1 百香果整果、果皮和果肉中农药检出率（%）Fig.1 Detection rate of pesticides in whole fruit，peel and pulp of passion fruit（%）

2.2.3 不同地区百香果整果中农药检出情况

6 个地区的百香果中杀菌剂和杀虫剂使用较多，杀螨剂使用相对较少，详见图1。百香果的常见病害有霜霉病、叶斑病、果腐病、茎基腐病、食心虫、白粉虱等，杀菌剂吡唑醚菌酯、嘧菌酯、异菌脲及杀虫剂噻虫嗪、啶虫脒、吡虫啉等能起到防治作用。由于各地区采样量不同，各种农药检出量也不同。

图1 6个地区百香果整果中农药检出情况Fig.1 Kinds of various pesticides detected from whole passion fruit from six regions

2.2.4 不同部位农药检出情况

采样的整果、果皮、果肉中均有检出且数量大于1的农药残留分布见表2。可见，整果中农药残留平均值、中位值、99 分位值基本符合标准，且整体高于果肉；但毒死蜱、甲霜灵残留平均值、99 分位值低于果肉；联苯菊酯、嘧霉胺残留99分位值低于果肉。果皮中农药残留平均值、中位值、99 分位值普遍高于整果，但氰戊菊酯残留平均值和中位值均低于整果，联苯菊酯、毒死蜱残留中位值均低于整果；果皮中农药残留平均值、中位值、99 分位值普遍高于果肉，但甲霜灵残留平均值、中位值、99分位值均低于果肉。

表2 百香果整果、果肉和果皮中农药残留量（mg/kg）Ta.2 Pesticide residue level in whole fruit，peel and pulp of passion fruit（mg/kg）

6 个地区采购的百香果中农药检出总数见图2。可见，所有地区百香果中果皮和整果中的农药检出量较高，这是由于农药主要附着于百香果外部，果农普遍采用喷洒方式进行农药投放。农药进入果实中，一是通过喷洒附着于果实；二是通过植物根、茎、叶的吸收进入植物体内，再通过植物体内循环进入果实内部。果实表面一般会附有一层蜡质，具有疏水性，可确保水溶性污染物不易通过表皮进入果实内部。因此，水洗可去除部分附着于果实表面的水溶性药物。但疏水性农药依然可通过果皮的蜡质层进入果实内部。毒死蜱、甲霜灵、苯醚甲环唑、腐霉利、烯酰吗啉为有机化合物，兼具内吸性，可通过果皮的蜡质层及植物根系、茎、叶等部位的吸收进入果实内部。在果实套袋情况下，农药仍可通过枝叶运输，经果柄进入果实［21］。

2.3 膳食摄入和农药多残留联合暴露风险评估

2.3.1 膳食摄入风险评估

根据《食品中农药最大残留限量》GB 2763-2021中规定的农药最大残留限量（MRL）判定农药残留超标情况；采用长期膳食摄入风险评估法进行食品安全风险评估；采用目标风险系数（THQ）法评估单一农药残留的膳食摄入风险。THQ ≤1，表明慢性摄入风险在可接受范围；THQ >1，表明存在不可接受的慢性摄入风险［22］。计算公式如下。

式中，NEDI 为某种农药的国家估算每日摄入量；STMRi为农药在某一食品中的规范残留试验中值，用MRL计算；Fi为一般人群某一食品的消费量（每人0.65 kg/d）；bw为消费者平均体质量，《中国居民营养与慢性病健康状况报告（2020）》显示，中国18岁以上的居民男性平均体质量为69.6 kg，女性平均体质量为59 kg，取平均值（按64 kg计算）；ADI为每日允许摄入量；THQ为慢性膳食摄入风险。果肉、果皮和整果中均有检出的且有参考限量的农药14 种，其THQ 值均远小于1，表明百香果的慢性膳食摄入风险较小。详见表3。

表3 百香果中膳食摄入风险Tab.3 Dietary intake risk of passion fruit

2.3.2 农药多残留联合暴露风险评估

多种化合物的联合暴露风险评估在不同国家有不同的定义，美国环境保护署（EPA）将多种化合物的联合暴露称为“累积风险”，世界卫生组织（WHO）在讨论多种农药残留联合暴露风险时采用“多种化合物的联合暴露”，我国的食品/农产品中多种农药残留的风险根据其对人体健康的风险分析称为农药多残留联合暴露风险［22］。本研究中采用危害指数（HI）评价农药多残留联合暴露风险。HI <1，表明对暴露人群无明显健康风险；HI>1，表明存在明显健康风险。HI 值越大，风险越大。按公式HI=计算。结果农药多残留联合暴露风险的HI=0.884 7 <1，表明暴露人群无明显的健康风险。

3 讨论

本研究结果显示，全国6 个地区的37 批百香果中均存在多种农药残留现象，果皮中农药检出量最高，果肉最低。37 种农药的残留水平总体上符合果皮>整果>果肉的规律，但对于一些新烟碱类且有较强内吸性的农药，有少部分的百香果样品果肉中的残留量高于整果，或仅在果肉中检出；个别农药仅在果皮中检出，果肉和整果中均无检出，可能是由于百香果果皮较厚，果皮质量约占整果的60%。一些附着于果皮不具有内吸性的农药，在同样浓度情况下，整果的样品中检出量会因果肉而稀释，导致个别残留浓度较低的农药在果皮中有检出，但在果肉和整果中无检出。根据GB2763-2021 中的MRL 参考限量计算，百香果对慢性膳食摄入风险的贡献较小，农药的累积暴露风险较低。

农药在百香果中的分布受药物性质、施药方式、种植环境、天气情况等影响。本研究结果显示，百香果的残留农药主要附着于果皮，只有少数较强内吸性的农药可能通过根、茎、叶等部位进入果肉中。其原因可能有，一是百香果的常年连作，导致土地营养物质的匮乏及病虫害的加重，为保证果实的质量而大量使用农药；二是果农的农业知识和病虫害防治技术较弱，存在多次使用农药和单次使用多种农药；三是不遵守规定的安全间隔期，未过安全间隔期而上市销售。建议加强对百香果种植的科学指导，对果农加大示范推广合规农药的使用，加强安全采摘意识；加强对果蔬作物的农业基础研究，对百香果的种植强化科学生产和病虫害的精准防控；加大对合规种植的宣传力度，加强管理、科学防治，从根本上解决百香果的用药问题。