郑妍妍，王燕，李蓓

西安市儿童医院神经内科，陕西西安 710002

杜氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy，DMD)是一种X染色体连锁的隐性遗传病，由编码抗肌萎缩蛋白(dystrophin)的基因突变所致。分裂的成肌细胞是肌肉生长和维持所必需的，而成肌细胞的有限生长能力与DMD的进行性肌肉退化特征直接相关[1-2]。据统计显示，全球新生男婴DMD 患病率为1/3500[3]，而目前临床尚无有效疗法。因此，研究DMD发生和发展的机制对实现该病的早期诊断、干预具有重要的临床意义。DMD基因位于染色体Xp21，编码含有3685个氨基酸的dystrophin(427 kD)。肌细胞膜表面存在抗肌萎缩-糖蛋白复合物(dystrophin-associated protein complex，DAPC)，可维持细胞结构的完整性和细胞膜内外的传递运输功能，而dystrophin 是DAPC 的重要组成部分[4]。N6-甲基腺苷(m6A)修饰是真核生物RNA 中最广泛的内部修饰，参与多个生物学过程。不同的阅读蛋白(包括YTHDF、YTHDC 和IGFBP 等家族蛋白)可特异性识别m6A 修饰，并调节RNA 的稳定性[5]。研究发现，m6A 修饰在肌肉干细胞维持、肌细胞增殖和分化中发挥重要作用[6]。Yes1 相关转录调节因子(Yes1 associated transcriptional regulator，YAP1)是一种转录辅助因子，可促进细胞增殖以及调节器官发育和再生，最近研究发现，在DMD 心脏组织中YAP1 活性明显降低；而抑制YAP1 活性可明显降低DMD 多能干细胞衍生的心肌细胞增殖，诱导DMD心肌病的发生[7]，但YAP1 是否通过调节m6A 修饰水平调控肌细胞增殖尚不明确。本研究通过检测DMD患者和健康人群肌肉组织中YTHDF1 和dystrophin 的表达水平，观察过表达或干扰YTHDF1 对人骨骼肌成肌细胞增殖的影响，探究YTHDF1对DMD中成肌细胞生物学行为的影响及其潜在作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)、Ham's F-10 培养基购自美国Gibco 公司；……