王 妍，郭 依，汪汉成，蔡刘体，安梦楠，张 崇，吴元华*

1.沈阳农业大学植物保护学院，沈阳市沈河区东陵路120号 110866

2.贵州省烟草科学研究院，贵阳市观山湖区龙滩坝路29号 550081

烟草靶斑病（tobacco target spot）是由立枯丝核菌（RhizoctoniasolaniKühn）引起的一种真菌病害，染病烟株叶片有病斑，病斑浅褐色且形状不规则，病斑坏死部分易脱落形成穿孔［1］。烟草靶斑病常发生在烟草旺长期至成熟期，潜育期短，流行性强，危害严重［1-2］。自2006年在我国辽宁丹东首次报道烟草靶斑病后，广西、云南、贵州、四川、湖北、湖南、黑龙江和吉林等地区也陆续发生该病危害［3-9］。目前化学药剂仍是防治烟草靶斑病的主要手段，但长期使用化学药剂容易使病原菌产生抗药性，造成农药残留和环境污染等问题［10］，故迫切需要一种环境友好的防治新方法。

RNA 干扰（RNA interference，RNAi）是真核生物共有的一种由RNA介导的保守调节机制，由基因特异性双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）触发，随后dsRNA被RNase Ⅲ样核酸内切酶切割成21～24 nt 的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）。这些siRNA 以同源配对的形式靶向目标基因，达到在转录或转录后水平沉默或抑制目标基因表达的目的［11-13］。近年来，RNAi 技术在植物病虫害防治方面得到广泛应用［14］，喷雾诱导基因沉默（spray-induced gene silencing，SIGS）是实现RNAi的一种方法，该方法通过外源喷施dsRNA，诱导与病原菌生长发育和致病相关基因的沉默，从而降低病原菌的致病力［15］。Koch 等［16］通过在大麦叶片表面喷施靶向禾谷镰孢菌麦角甾醇生物合成基因（CYP51A、CYP51B和CYP51C） 的 长 dsRNA（CYP3-dsRNA），显著降低该真菌CYP51A、CYP51B和CYP51C的表达量，减轻了对大麦的危害。Rao 等［17］研究发现，多聚半乳糖醛酸酶（Polygalaturonase，PG）的关键候选基因AG1IA_04727在水稻纹枯病感染期间显著上调，靶向AG1IA_04727的dsRNA 在水稻中的稳定表达可有效沉默该基因，抑制水稻纹枯病的发生。……