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高效液相色谱法快速测定保健品中6 种人参皂苷的含量

2023-11-11居广琳

食品安全导刊 2023年28期
关键词:牛磺酸蜂胶皂苷

居广琳

(福建省产品质量检验研究院,福建福州 350002)

人参皂苷是人参、西洋参等人参属植物中被证实具有增强体质、调节神经、延缓衰老及抗肿瘤等功效的有效成分[1-2]。其中人参皂苷Rg1具有调节神经系统、保护神经元细胞的作用[3];人参皂苷Rb1具有促进神经修复,减少神经元损伤的作用[4];人参皂苷Re 具有抑制胰岛素抵抗、调节脂质代谢、抗炎的作用[5];人参皂苷Rd 有抗氧化作用[3];人参皂苷Rb2具有降脂降糖、调节心血管系统、维持心脏和血管正常生理功能的作用[6];人参皂苷Rc 有抗氧化和抗炎作用[7]。本实验以3 种保健品基质为研究对象,参照《保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则(2020 年版)》应用高效液相色谱法建立了快速稳定高效检测以非人参及其加工品为主要原料的保健品中6 种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1含量的方法[8]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

唐传牌阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料、汤臣倍健蜂胶软胶囊,购自市场。

人参皂苷Rb2(批号CCPE900007,纯度96.0%)、人参皂苷Rc(批号CCPE900217,纯度95.6%)、人参皂苷Rd(批号CCPE900216,纯度95.3%)、人参皂苷Re(批号CCPE901307,纯度98.7%)和人参皂苷Rg1(批号CCPE900 214,纯度94.9%),均购自广州佳途科技股份有限公司;人参皂苷Rb1(批号1ST400 41,纯度98.7%),购自天津阿尔塔科技有限公司;甲醇(分析纯)、乙腈(色谱纯),购自山东禹王化学试剂有限公司;水为自制超纯水。

1.2 仪器与设备

D3200 高效液相色谱仪,大连依利特分析仪器有限公司;KQ-500DE 数控超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司;ME204 电子天平,梅特勒托利多仪器有限公司;超纯水机,美国密理博公司;多位平行浓缩仪,睿科集团(厦门)股份有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 溶液的制备

标准品储备溶液的配制:称取人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1标准品于同一容量瓶中,用甲醇配制成各组分浓度为9.92 mg·mL-1、10.3 mg·mL-1、9.54 mg·mL-1、9.59 mg·mL-1、9.84 mg·mL-1和9.94 mg·mL-1的标准品储备溶液。

标准系列溶液配制:精密量取标准品储备液1.0 mL、2.0 mL、2.0 mL、2.0 mL 和1.0 mL,置于100 mL、100 mL、50 mL、25 mL 和10 mL 容量瓶中,用甲醇稀释并定容至刻度,摇匀,即配成人参皂苷标准系列溶液。人参皂苷标准系列溶液配制浓度如表1 所示。

表1 人参皂苷标准系列溶液配制

唐传牌阿拉伯糖粉和力保健牛磺酸功能饮料样品溶液的制备:称取样品5 g,置于50 mL 容量瓶中,加入20 mL 水溶解,超声提取15 min 后,加20 mL甲醇继续超声提取15 min,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,离心,取10 mL 上清液,氮吹浓缩至1 mL 即得样品溶液。

蜂胶软胶囊样品溶液的制备:按上述方法取内容物进行供试品溶液的制备。

1.3.2 色谱系统条件

色谱柱:依利特Hypersil 300Ǻ C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-水,洗脱程序见表2;检测波长:203 nm;柱温:35 ℃;流速:1.0 mL·min-1;进样量:10 μL。

表2 梯度洗脱程序

2 结果与分析

2.1 液相色谱图

按1.3.2 色谱系统条件分析人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1浓度为992.0 μg·mL-1、1 030.0 μg·mL-1、954.0 μg·mL-1、959.0 μg·mL-1、984.0 μg·mL-1和994.0 μg·mL-1时的标准溶液,基线分离较好。液相色谱图见图1。

图1 标准品溶液液相色谱图

2.2 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 的线性范围

取1.3.1 配制的人参皂苷标准系列溶液10 μL 进高效液相色谱分析,以人参皂苷浓度(μg·mL-1)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,结果见表3。

表3 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 标准曲线

2.3 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1 的回收率

称取供试样品各2 份,按1.3.1 方法制备样品溶液测定6 种人参皂苷含量,结果表明阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料及蜂胶软胶囊均不含被测组分。称取5.031 2 g、5.041 2 g、5.036 4 g、5.112 4 g、5.095 4 g、5.038 7 g、5.098 3 g、5.064 4 g 和5.046 1 g 共9 份阿拉伯糖粉,称取5.112 4 g、5.064 2 g、5.310 2 g、5.142 1 g、5.010 6 g、5.065 4 g、5.041 5 g、5.210 4 g 和5.009 4 g 共9 份力保健牛磺酸功能饮料,称取5.048 9 g、5.210 5 g、5.131 5 g、5.198 2 g、5.176 6 g、5.077 8 g、5.210 6 g、5.116 2 g 和5.130 2 g共9 份蜂胶软胶囊内容物,分成3 组分别加入标准品储备溶液30 μL、80 μL、200 μL,按1.3.1 方法制备样品溶液,按1.3.2色谱条件进行测定,结果见表4~表6。结果表明该实验方法有较好的回收率和精密度,回收率为82.9%~109.2%,精密度为4.0%~8.3%。

表4 测定阿拉伯糖粉中人参皂苷的回收率和精密度

表5 测定力保健牛磺酸功能饮料中人参皂苷的回收率和精密度

表6 测定蜂胶胶囊中人参皂苷的回收率和精密度

3 结论

越来越多的年轻人开始重视中医理疗养生,关注养生,因此向保健品中添加人参提取物成为趋势。本实验采用高效液相色谱法测定了保健品中6 种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和Rg1的含量,为保健品质量检测提供了方法参考。

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