冯鹏程，曹奕强，汤荡，宋海，龙江，王永刚

昆明医科大学第一附属医院神经外一科，昆明650000

肿瘤微环境具有低氧、低pH、高压等特点，在肿瘤的自我更新、分化、转移过程中发挥重要作用。现有研究表明，在胶质瘤细胞的生物进程中，缺氧微环境的形成具有显著影响，酸性代谢产物堆积可导致细胞间质中各种细胞因子、炎症细胞浸润，增强胶质瘤干细胞的增殖能力和侵袭能力，并引起治疗耐受，导致患者预后不良［1-2］。了解胶质瘤与其所处微环境的关系对于改善胶质瘤的治疗前景具有重要意义。我们的前期研究显示，在颅内移植神经胶质瘤小鼠中，高压氧能够促进颅内胶质瘤细胞增殖和血管生成，抑制细胞凋亡［3］。既往多数研究通过建立低氧或高氧微环境，认为胶质瘤生长、侵袭与氧微环境密切相关［4-7］，但缺少低氧与高氧微环境中胶质瘤细胞生物学行为变化的对比。2022年3月—7月，我们通过模拟细胞生长所处的氧微环境，观察高氧、低氧、极低氧浓度中U251脑胶质瘤细胞生物学行为的变化。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器 人胶质瘤U251细胞购于昆明动物研究所。胎牛血清（美国Gibco）；青霉素/链霉素、胰酶、DMEM无糖培养基（大连美伦生物）；CCK-8试剂盒（日本同仁研究所）；结晶紫（北京索莱宝）；细胞凋亡检测试剂盒（美国BD）；活性氧（ROS）检测试剂盒（江苏碧云天）；Cell Staining Buffer购于（美国Biolegend）；488标记山羊抗兔IgG（武汉赛维尔）；TRIzol试剂盒（美国Ambion）。CO2培养箱（美国Thermo），酶标板自动读数仪（美国BIO-RAD），倒置荧光显微镜（德国Motic），流式细胞仪（美国BD），实时定量荧光PCR仪（美国Bio-Rad）。……