张凯宁，刘涵，朱秋媚，富锐丽，刘玉林，孙瑞欣，刘景会，赵竞男，韩雪容

1.长春理工大学生命科学技术学院，吉林 长春 130000；2.长春生物制品研究所有限责任公司细胞因子室，吉林 长春 130000

人生长激素（human growth hormone，hGH）是一种由人脑垂体前叶的嗜酸性细胞分泌的蛋白质类激素，含有191个氨基酸分子，相对分子质量为22 000，编码GH的基因位于17号染色体上，总长度约6.5万个碱基。本研究使用的重组人生长激素-Fc 融合蛋白（rhGH-Fc）采用IgG4的Fc 段通过一段柔性多肽与rhGH 相连接，并采用S228P 突变防止IgG4 解离成半分子，同时也可抑制Fab-臂交换现象来增强稳定性，采用V308P 突变增强与FcRn 的亲和力延长半衰期。N-糖基化的修饰位点为Asn-X-Ser／Thr（其中X为除了Pro 以外的任意氨基酸），当蛋白类药物含有N-糖基化修饰位点时，在蛋白转录后翻译便会进行糖基化修饰。人IgG分子的重链Asn297为N-糖基化修饰位点，抗体分子的N-糖基化修饰与其他蛋白相似，由一个预装配好的Glc3Man9GlcNAc2 寡糖链通过内质网上的寡糖转移酶复合物（oligosaccharyltransferase，OST）从焦磷酸长醇糖脂载体（dolichol-ohosphate lipid，DoI-P-P）转移到IgG重链的Asn297上，通过内质网α-葡糖糖苷酶Ⅰ、α-葡糖糖苷酶Ⅱ（α-glucosidaseⅠ／Ⅱ）以及内质网α-甘露糖苷酶修饰形成Man8GlcNAc2，转移到高尔基体顺面的网络结构（cis-golgi network，CGN）后，另外3 个甘露糖被高尔基体甘露糖苷酶切掉，形成1 个Man5GlcNAc2。进入高尔基体中间膜囊（medial gdgi）后，N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅰ（N-acetylglucosaminyltransferase-Ⅰ，GnTⅠ）就会介导Glc-NAc 从 UDP-GlcNAc 转移到 Man5GlcNAc2 寡糖链的α-1-3 分支上，再从α-1-6 分支上切除2 个甘露糖残基，就得到了GlcNAcMan3GlcNAc2，转移至高尔基体反面的网络结构（trans golginetwork，TGN）之前再经GnTⅡ作用下，将GlcNAc从UDP-GlcNAc转移到Man-5GlcNAc2 寡糖链的α-1-6 分支上，形成GlcNAc2Man 3GlcNAc2保守双天线结构。……