刘 翔 胡陶玉

四川省宜宾市第二人民医院医学检验科 644000

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是临床上较为常见的一种恶性血液系统疾病[1-2]，是由于骨髓中的浆细胞发生异常增生，使患者血液以及尿液中出现大量的免疫球蛋白，同时也会导致患者机体各个组织以及器官受到不同程度的损伤，使患者机体免疫力下降，并发贫血、严重感染、肾衰竭等各种疾病[3-4]。多发性骨髓瘤多发生于中老年人群体中，男性患者所占比例较大，其病因目前尚未明确，且病情发展迅速，预后较差，若不及时进行治疗，会对患者的生命造成很严重的威胁[5]。因此多发性骨髓瘤的早期诊断与治疗，对延长患者生存期有着极其重要的意义。本文选取我院血液科于2020年8月—2021年3月期间收治的29例多发性骨髓瘤患者，探究多发性骨髓瘤患者的CD38+、CD138+浆细胞表面Notch1的表达水平及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院血液科于2020年8月—2021年3月收治的29例多发性骨髓瘤患者作为研究组，其中男17例，女12例，年龄45～84岁，中位年龄51岁。选取同一时期内于我院进行体检的29例健康人作为对照组，其中男15例，女14例，年龄42～86岁，中位年龄54岁。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本次研究经过医学伦理学委员会批准后进行研究。纳入标准：(1)研究组对象均符合《血液病诊断及疗效标准》中的诊断标准[6]，确诊为多发性骨髓瘤,且均为初次治疗患者；(2)所选对象均无沟通障碍以及语言表达障碍，且自愿签署对本研究的知情同意书。排除标准：(1)患者存在沟通障碍和(或)语言表达障碍；(2)患伴有其他重大器官性疾病和(或)伴有恶性肿瘤疾病等影响患者病情的稳定。

1.2 治疗方法 研究组患者均采用硼替佐米联合地塞米松进行治疗。硼替佐米注射液(生产企业：Janssen-Cilag International N.V.；批准文号：H20050308)单次注射剂量为1.3mg/m2，且每周注射2次，连续注射2周(即在治疗的第1、4、8和11天时进行注射)后需要停药10d(即在治疗的第12～21天时停药)；地塞米松注射液(生产企业：成都天台山制药有限公司；批准文号：H51020513)8mg进行肌肉注射，每天注射1次。21d为1个治疗疗程，本次治疗共6个疗程。在每个疗程结束后以及在出院后每2个月，患者需要进行相关的骨髓检查，并检测患者初期、缓解期以及进展期骨髓液中CD38+CD138+浆细胞表面Notchl的表达情况。

1.3 检测方法 采集两组对象的骨髓液于真空肝素抗凝管中，并通过200目滤网将骨髓液进行过滤备用。各取两组对象100μl骨髓液样本于EP管中，并分别加入15μl的CD45-PerCP抗体、CD38-PE抗体、CDl38-FITC抗体以及Notchl-APC抗体，进行充分涡旋混匀，并在4℃环境中避光静置15min，15min后在每个样本中加入2ml溶血素，再次涡旋混匀后，在室温避光的条件下静置10min，以1 500r/min的转数离心5min，弃去上清液后，加入1ml PBS缓冲液重悬细胞形成细胞悬液，再次以1 500r/min的转数离心5min，此操作重复2次，目的是对细胞样本进行清洗，最后通过流式细胞仪检测两组骨髓液样本中CD38+CD138+浆细胞和CD38+CD138-浆细胞表面Notchl的表达水平[7-8]。

1.4 观察指标 (1)比较两组骨髓样本中CD38+CD138+浆细胞和CD38+CD138-浆细胞表面Notchl的表达水平。(2)比较研究组患者在不同时期(包括初期、缓解期、发展期)CD38+CD138+浆细胞表面Notchl的表达情况。不同时期的定义如下：①初期：患者在首次诊断为多发性骨髓瘤时的时间点；②缓解期：患者在入院接受治疗的6个疗程中，接受骨髓穿刺检查结果综合评价最佳的时间点；③进展期：患者治疗疗程结束出院后病情发生进展的时间点。

2 结果

2.1 两组浆细胞表面Notch1表达水平比较 研究组患者骨髓液中CD38+CD138+浆细胞表面Notch1的表达率为(62.35±19.64)%，显著高于研究组CD38+CD138-浆细胞表面的(40.18±16.65)%、对照组CD38+CD138+浆细胞表面的(29.90±7.28)%，以及对照组CD38+CD138-浆细胞表面的(33.79±15.22)%，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组浆细胞表面Notch1表达水平比较

2.2 研究组不同时期与对照组CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达情况比较 研究组患者在初期和进展期骨髓液CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达率分别为(62.35±19.64)%、(45.58±10.44)%，均高于研究组缓解期的(39.34±8.23)%和对照组的(29.90±7.28)%；同时，研究组患者缓解期骨髓液CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 研究组不同时期与对照组CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达情况比较

3 讨论

多发性骨髓瘤多发生于中老年人群体中，男性的患病概率高于女性，目前其病因尚未明确。多发性骨髓瘤患者的生存期较短，且病情发展迅速，预后较差，如若不及时进行治疗，会对患者的生命造成很严重的威胁。患者在患病后，其骨髓液中的浆细胞会发生异常增生，并在周围的组织和骨骼中浸润[9]，导致部分组织和脏器发生不同程度的损伤，骨髓的造血功能也受到破坏，使患者的免疫功能低下，并发贫血、严重感染、肾衰竭等各种疾病，危害患者生命[10-11]。CD38的表达与细胞增殖有关，且检测结果显示其在浆细胞表面表达量较高，是浆细胞表面的一种特异性标记。CD138是细胞表面的黏附因子，其功能有很多，主要有促进细胞增殖、维持细胞正常形态、抑制肿瘤分化等。由于接近100%的多发性骨髓瘤患者恶性浆细胞CD138表达为阳性，并且在正常粒细胞中，CD138表达为阴性，因此将CD138作为恶性浆细胞的特异性指标[12]。

近几年来有研究结果表明，浆细胞表面Notch1的表达与多发性骨髓瘤有着密不可分的关系[13]。Notch受体目前一共有4种，在与其他细胞表面的配体结合后就会被激活，与细胞核内的转录因子相互作用后对目的基因进行调节，从而影响细胞的增殖和凋亡。抑制骨髓细胞表面Notch1基因表达后，会下调Hes1蛋白的表达，诱导PTEN抑癌基因表达的上调，同时使Bcl-2的表达下调。Bcl-2是一种抗凋亡蛋白，因此会有效抑制癌细胞的增殖，促进细胞凋亡[14]。本文探究了多发性骨髓瘤患者的CD38+CD138+浆细胞表面Notch1的表达水平及其临床意义。

研究组骨髓液中CD38+CD138+浆细胞表面Notch1的表达率为(62.35±19.64)%，显著高于研究组CD38+CD138-浆细胞表面的(40.18±16.65)%、对照组CD38+CD138+浆细胞表面的(29.90±7.28)%，以及对照组CD38+CD138-浆细胞表面的(33.79±15.22)%(P<0.05)。结果说明Notch1在MM患者的CD38+CD138+浆细胞表面高度表达。同时研究组患者在初期和进展期骨髓液CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达率分别为(62.35±19.64)%、(45.58±10.44)%，均高于研究组缓解期的(39.34±8.23)%和对照组的(29.90±7.28)%(P<0.05)。结果表明，Notch1的表达量与患者的疾病发展以及预后情况有着密切的关系，呈现病情越严重Notch1的表达量越高的趋势。这一研究结果的发现为多发性骨髓瘤疾病的发生发展、治疗疗效以及预后情况的监测提供了一个新的方向。

综上所述，在多发性骨髓瘤患者骨髓液中CD38+CD138+浆细胞表面Notch1表达较高，并且患者的治疗效果越好，Notch1表达量越低，在多发性骨髓瘤的检测、进展、治疗和预后中发挥极其重要的意义。