周勤文，林群英，赵孔发，苟仕坤，张锋伦，朱昌玲

（1.中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所，江苏 南京 211111；2.昭通市大成农业开发有限责任公司，云南 昭通 657100；3.南京同仁堂康普生物技术有限公司，江苏 南京 211800）

花椒（Zanthoxylum bungeanum）为芸香科花椒属落叶小乔木。我国已有三千多年的栽培历史，是花椒种植面积最大、品种最为齐全的国家［1-3］。截至2020年底，我国累计种植面积已超过167万公顷，年产量28万吨左右；全球约有250多种花椒，中国共有45种13变种［4-6］。

花椒籽，名为椒目［7］，呈黑色、有光泽，内含丰富的油脂和蛋白质，是花椒的主要副产物，占其总质量的60%左右［1，8］。花椒籽中油脂含量为27%～31%，低于油菜籽及花生中的油脂含量而高于大豆中的油脂含量，属中等含油量农产品［1，9］。花椒籽脱脂后的饼粕含蛋白质高达48%以上［8］，由于没有得到充分的利用，造成了资源浪费和环境污染［1，3-4］，阻碍产业的健康发展。随着我国花椒种植面积和产量的快速增长，对花椒这一副产物的开发利用研究已经迫在眉睫。成分分析证实，花椒籽饼粕营养丰富，其疏松的物理性状有助于食用菌的分解利用，其适宜的碳氮比及其它成分可满足食用菌各生长阶段的需要。花椒籽粕在滑菇（Pholiota nameko）、姬菇（Pleurotus geesteranus）、平菇（Pleurotus ostreatus）等品种中的栽培应用已有报道［7-8，10］。食用菌具有变废物为宝的特点是利用农林下脚的理想材料，本研究以花椒籽饼粕为辅料，研究不同的添加量对4种食用菌生长的影响，对合理利用花椒籽饼粕资源提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

青花椒籽饼粕，由东平九鑫生物化学有限公司提供；马铃薯葡糖糖琼脂培养基（PDA），购自北京奥博星生物技术有限责任公司；大米，为市售。

供试菌株分别为：蛹虫草（Cordyceps militaris）1个菌株；鸡腿菇（Copyinds comatus）1个菌株；金针菇（Flammulina filiformis）为金都43；平菇5个菌株。蛹虫草和鸡腿菇菌种由中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所提供；金针菇及平菇菌株均购自江都天达食用菌研究所，其主要栽培性状见表1。

表1 部分供试菌株及主要栽培性状Tab.1 Some tested strains and their main cultivation traits

1.2 主要设备

LDZX-75L-I立式高压蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）；SW-CJ-1F型单人双面净化工作台（苏州净化设备有限公司）；SPX-5013全自动智能型生化培养箱（北京市恒诺利科技有限公司）。

2 方法

2.1 花椒籽饼粕提取液添加量对菌丝生长速度的影响

花椒籽饼粕提取液的制作：称30 g花椒籽饼粕放入烧瓶中，加水300 mL，在90℃时搅拌回流2 h。抽滤，得提取液，冷藏备用。

试验方案设计：空白对照样为3.7 g PDA+200 mL水。在PDA为3.7 g、样液总量为200 mL基础下，提取液添加量分别为10 mL、20 mL、40 mL、60 mL、80 mL，即提取液占总样液的比例分别为5%、10%、20%、30%、40%。

灭菌及分装：在121℃灭菌20 min，冷却至50℃～60℃时，在净化工作台内，趁热分装入培养皿中，一个培养皿10 mL。

接种及培养：冷却至室温后，接入菌种。各浓度设置3个平行试验。接入菌种后，将培养皿用封口膜密封，放入培养箱中，在25℃避光环境中培养，采用十字划线法进行菌丝生长速度测定。平菇、金针菇、蛹虫草培养时间为6 d，鸡腿菇培养时间为10 d。菌丝生长速度（mm/d）=菌落半径长度（mm）/培养时间（d）。

2.2 花椒籽饼粕添加量对蛹虫草子实体栽培的影响

试验方案设计：在大米25 g，水的添加量为固体物料1.8倍不变的基础上，花椒籽饼粕添加量分别为5%、10%、15%、20%，即分别为1.3 g、2.7 g、4.41 g、6.25 g。各浓度设置5个平行试验。

栽培、采收：在121℃灭菌20 min，冷却后取出，放入超净工作台中；接种比例为5%；按行业标准进行培养［11］。待子实体成熟后采收，称重，计算生物转化率。

3 结果与分析

3.1 花椒籽饼粕提取液添加量对菌丝生长速度的影响

在不同提取液添加量的培养基，平菇（a、b、c、d、南抗9号）、鸡腿菇、金针菇、蛹虫草等菌株的菌丝平均生长速度见表2。

由表2可看出，花椒籽饼粕提取液对不同菌株的生长影响是不一样的，对5个平菇菌株的生长均有抑制作用，其中低浓度时对南抗9号的抑制最强烈，而对平菇d的抑制最轻；而对鸡腿菇、金针菇、蛹虫草菌株的生长均有较好地促进作用，在添加浓度为10%时，鸡腿菇的菌丝生长速度为2.0±0.1 mm/d，较空白对照提高了33%。在添加浓度为20%时，蛹虫草菌丝的生长速度最快，比空白对照组增长了37.5%。由此，将对蛹虫草菌株进行其子实体的培养试验，进一步研究花椒籽饼粕对其生长的影响。

表2 花椒籽饼粕提取液添加量对4种食用菌菌丝生长速度的影响Tab.2 Effects of the supplemental levels of Z.bungeanum seed meal extract on the mycelial growth rate of four edible mushrooms

3.2 花椒籽饼粕添加量对蛹虫草子实体栽培的影响

花椒籽饼粕添加比例分别为0、5%、10%、15%、20%时，蛹虫草子实体成熟时的情况见图1，对子实体生物转化率的影响见图2。

图1 含不同添加量花椒籽饼粕培养基上的蛹虫草子实体Fig.1 Fruitbodies of Cordyceps militaris on substrates with different supplemental levels of Z.bungeanum seed meals

从图2可以看出，与空白组相比，添加了花椒籽饼粕的培养基栽培所得的蛹虫草子实体产量均有不同程度的提高，其中以添加量为10%为最佳，生物转化率达67.60%，其次是5%和15%，这两种添加量对子实体的生物转化率效果相同（图2）。随着添加比例再增加，花椒籽饼粕对子实体产量的促进作用呈逐渐降低的趋势，说明添加量过大时，子实体的生长反而受到了抑制。

图2 花椒籽饼粕不同添加量对蛹虫草子实体生物转化率的影响Fig.2 Effects of different supplemental levels of Z.bungeanum seed meals on the bioefficiency of Cordyceps militaris

4 讨论

本文以花椒籽饼粕为辅料，通过对花椒籽饼粕不同的添加量对4种食用菌生长的影响试验，结果表明，花椒籽饼粕对不同菌株的生长影响是不一样的，对平菇的5个菌株（a、b、c、d、南抗9号）的生长均有抑制作用，而对鸡腿菇、金针菇、蛹虫草菌株的生长均有促进作用。由此也表明，花椒籽饼粕对其他菌株的生长作用情况，还有待于进一步的研究试验。另外，花椒籽饼粕对蛹虫草的生长有较大促进作用，在花椒籽饼粕的添加量为10%时，蛹虫草菌株的生长最佳，子实体平均鲜重为18.73 g，生物转化率为67.6%，这可能是花椒籽饼粕含有丰富的蛋白质等营养成分，促进了蛹虫草菌株的生长，才使得蛹虫草子实体的产量得以增加。测试中的5个平菇菌株的生长均受到抑制，可见平菇对花椒籽饼粕较为敏感，而其他3个种类则显示出较好适应性。由此可推测，为更好地利用花椒籽饼粕这一资源，有必要扩大食用菌种类及菌株的筛选，以获得更适宜的菌种，实现其在食用菌栽培产业中的生产应用。

当前对花椒副产物利用率较低，对花椒籽副产物的利用率就更低了，相关产品的开发较少。本文利用花椒籽饼粕栽培食用菌，为花椒籽副产物的开发利用提供了一条新路，对于促进花椒产业的可持续发展具有重要作用。随着科技的发展，花椒副产物可应用范围会更加广泛。