刘智敏 霍宝锋 王莉娟 梁海燕 林奕斌 何 辉 张天弼

广东省韶关市中心血站检验科，广东韶关 512026

血液筛查是防止乙型肝炎病毒（hepatitis bvirus，HBV）、丙型肝炎、艾滋病等多种传染性疾病发生的重要手段，能够防止供受血间的交叉感染，保障临床用血安全[1]。既往，献血者HBV筛查方法为常规酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测，随着近年来病毒核酸检测（nucleic acid test，NAT）技术的逐步完善，采供血机构将NAT纳入无偿献血的筛查策略，以提高血液安全性[2-3]。研究指出，NAT联合ELISA检测应用于血液筛查中虽提高检测灵敏度，但特异性往往有所下降，加之在筛查血液标本时受试剂、技术及献血者自身因素的影响，多存在假反应性结果[4]。HBV献血者NAT假反应性不仅在一定程度上造成献血资源流失，也给献血者自身带来心理负担，甚至造成医疗纠纷。因此，为减少献血者流失和保护献血者的权利，完善献血后续服务，建立无偿献血者归队策略十分必要。中国输血协会团队于2019年制定的《血液筛查反应性献血者归队指南》[5]中指出单试剂HBV表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）反应性、NAT 检测无反应，献血者屏蔽6个月后可进入归队流程，但HBV NAT存在假反应情况，对于HBV NAT反应性献血者的归队方案值得探讨和研究。基于此，本研究旨在探讨HBV NAT反应性献血者可行性归队方案。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

分析2015年1月至2020年12月在韶关市中心血站无偿献血中HBV NAT反应性且ELISA无反应性的献血者，召回63例进入归队流程，本研究经本站医学伦理委员会批准，献血者对本研究均知情同意。献血者中男41例，女22例；年龄18～55岁，平均（30.76±3.15）岁；初次献血15例，献血2～10次39例，献血10次以上9例。

1.2 方法

1.2.1 献血者追踪复查流程 由献血服务科室专人通知HBV NAT反应性献血者，解释献血归队过程及意义，由献血者自行选择是否归队，本研究共有63例HBV NAT反应性献血者自愿进入归队流程。

1.2.2 复检标本采集 采集63例HBV NAT反应性献血者初次反应性结果后第3、6个月时外周静脉血10 ml，分别置于血清学标本管（EDTA-K2抗凝）和NAT标本管（EDTA-K2抗凝，带分离胶）中，每个试管各5 ml血液标本，其中血清学标本管以离心力1600 g离心8 min，NAT标本管以离心力2000 g离心15 min，均在72 h内完成相关检测。

1.2.3 试剂和仪器 HBsAg ELISA检测（北京万泰、上海科华生物）；检测HBV核酸试剂（中山大学达安基因）。ELISA检测所用主要仪器：TECAN EVO200全自动加样仪、BEHRING（Ⅲ）ELISA分析系统。NAT病毒检测主要仪器：DA3000核酸提取仪（达安）、ABI7500核酸扩增仪。

1.2.4 HBV NAT反应性献血者能否符合归队献血资格判定 参照《血液筛查反应性献血者归队指南》[5]制订判定标准。（1）合格判定：63例HBV NAT反应性献血者初次反应性结果后第3、6个月时检测的ELISA双试剂检测阴性/NAT阴性，则为合格，不再屏蔽献血资格，允许归队献血并建立相关档案，若归队献血后再次出现ELISA或NAT阳性，则移出归队流程，并将献血资格永远屏蔽。（2）不合格判定：①在初次反应性结果后第3个月第1次检测1种或2种试剂出现ELISA反应性或NAT反应性，则不需要进行第6个月时的第2次检测，直接淘汰移出归队程序；②若第1次结果为合格，第2次检测出现不合格情况（出现①的情况），则淘汰并屏蔽献血资格，且移出归队程序。

1.3 统计学处理

采用SPSS 25.0统计学软件进行数据处理，计量资料均经Shapiro-Wilk正态性检验，符合正态分布以均数±标准差（）表示；计数资料以[n（%）]表示。

2 结果

2.1 HBV NAT反应性献血者归队复查人数情况

2015—2020 年献血人数共146 319例，共召回63例归队复查。见表1。

表1 HBV NAT反应性献血者归队复查人数情况

2.2 HBV NAT反应性献血者第1次追踪检测结果

63例HBV NAT反应性献血者第1次追踪检测结果ELISA筛查反应性1例，占1.59%；NAT筛查反应性9例，占14.29%。见表2。

表2 HBV NAT反应性献血者第1次追踪检测结果[n=63，n（%）]

2.3 HBV NAT反应性献血者第2次追踪检测结果

53例ELISA无反应性/HBV DNA无反应性献血者第2次追踪检测结果ELISA筛查反应性为0例，NAT筛查反应性为5例，占9.43%。见表3。

表3 HBV NAT反应性献血者第2次追踪检测结果[n=53，n（%）]

2.4 归队献血资格方案设计

本研究召回63例HBV反应性献血者经第1次追踪检测后直接淘汰ELISA筛查反应性、NAT筛查反应性共10例，移除归队程序，其余53例第1次追踪检测为ELISA无反应性/HBV DNA无反应性献血者进行第2次追踪检测后，直接淘汰NAT筛查反应性5例，移除归队程序；经2次追踪复查结果显示，有76.19%（48/63）的献血者ELISA无反应性/HBV DNA无反应性，符合归队献血资格。

3 讨论

HBV为常见的感染性疾病，病毒携带率高、传染性强，对无偿献血者血液常规ELISA筛查后行NAT能够有效提高血液的安全性，降低HBV传染风险[6-7]。但随NAT在血液筛查领域的广泛应用，有许多献血者因HBV NAT假反应性结果或献血处于病毒感染康复期被永久屏蔽，导致献血者流失，加剧采供血与需求矛盾[8]。但有相当部分此类献血者于后期自身完全清除病毒而自然恢复，符合献血体检要求。因此，对HBV NAT反应性献血者进行追踪调查，探讨其归队策略对稳定献血队伍、保障血液资源具有重要意义。

献血者归队策略是为减少献血者流失、保留固定献血者的一种手段，通过对暂时屏蔽的献血者进行复检，从而证明其血液安全性，可继续进行献血，缓解血液供求不足[9-10]。本研究结果显示，2015—2020年献血人数共146 319例，共召回63例归队复查；63例HBV NAT反应性献血者第1次追踪检测结果ELISA筛查反应性1例，占1.59%；NAT筛查反应性9例，占14.29%；53例ELISA无反应性/HBV DNA无反应性献血者第2次追踪检测结果ELISA筛查反应性为0例，NAT筛查反应性为5例，占9.43%；经2次追踪复查结果显示，有76.19%（48/63）的献血者ELISA无反应性/HBV DNA无反应性，符合归队献血资格，对此类献血者的献血资格屏蔽需要仔细考虑，这为HBV NAT反应献血者是否建立归队方案及其归队流程提供数据支持。本研究第1次追踪复检是在HBV NAT初次反应性结果后第3个月，此时间段能够基本将HBV的窗口感染期覆盖，而在6个月的第2次追踪复检时，仍有9.43%的献血都出现不合格情况，可见对HBV反应性献血者只屏蔽3个月仍存在一定风险，难以达到献血者免疫预后转归的间隔时间，建议归队复检间隔时间至少为6个月更能保障血液安全[11-12]。

本研究中HBV NAT反应性献血者经2次复检仍具有一定的不合格率，由于隐匿性HBV献血感染者病毒载量较低，会呈现低水平的波动状态，即使在规定间隔时间进行2次复检仍存在合格可能性，但仍不能确保献血者自身完全清除病毒，是输血传播HBV的潜在危险[13-14]。文献指出，HBV NAT反应性献血者归队复检ELISA、NAT均无反应性，补充化学发光法检测有89.5%为HBV表面抗体（hepatitis B surface antibody，抗 -HBs）和 /或HBV 核心抗体（hepatitis B core antibody，抗 -HBc）反应性[15]。由此，建议对HBV NAT反应性献血者的归队复检增加化学发光法等补充试验，以制订更严密的安全归队策略，从而更加安全、合理、有效地保障血液质量，确保血液检测结果准确性，减少血源流失，完善献血后续服务。本研究局限之处在于献血者的数据会随着后续的献血行为及时间推移发生变化，所以本研究结果受数据截取时间影响较大。

综上所述，HBV NAT反应性献血者中存在假反应性结果，也存在感染康复期群体，开展献血归队方案可完善献血后续服务，为献血者归队的科学管理程序提供依据，有利于血筛检测结果确证，减少血源流失。