陈乃君 高倩

绍兴文理学院附属医院内分泌科，浙江绍兴 312000

老年糖尿病的发生主要是由于体内胰岛β 细胞分泌功能较差，且病程较长，需要联合治疗予以控制[1-3]。甘精胰岛素是一种新的长效胰岛素类似物，与人类胰岛素极其相似，能够有效控制患者的血糖水平[4]。对老年糖尿病患者予以穴位按摩，能够增加胰岛素敏感性，有效改善患者的血脂、血糖水平[5]。本研究使用穴位按摩辅助甘精胰岛素对老年糖尿病患者进行治疗，旨在探讨二者联合治疗对老年糖尿病患者血糖及轴突导向因子-1（Netrin-1）、鸢尾素（Irisin）水平的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年6 月至2021 年6 月绍兴文理学院附属医院收治的老年糖尿病患者165 例，纳入标准：①符合中华医学会老年医学分会等学会对老年糖尿病的诊断标准[6]；②予以口服降糖药物其效果不佳者；③病历资料齐全。排除标准：①1 型糖尿病者；②严重的肾功能不全者（肾小球滤过率≤15ml/min·1.73m2）；③严重心功能不全Ⅳ级者；④肝酶大于正常5 倍者；⑤糖尿病高渗高糖综合征者；⑥糖尿病酮症酸中毒者；⑦严重低血糖或低血糖反复发作者；⑧依从性较差者。

所有患者均采用数字表法随机分为对照组83例、联合组82 例。对照组患者中，男45 例，女38 例；年龄67～85 岁，平均年龄（75.25±5.74）岁；病程2.5～6.0 年，平均病程（4.3±1.4）年；联合组男43 例，女39 例；年龄66～87 岁，平均年龄（76.25±7.74）岁；病程3～5 年，平均病程（4.0±1.6）年。两组患者的性别、年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究所有患者或家属均签署知情同意书，且经绍兴文理学院附属医院伦理委员会批准（伦理审批号：KY-2019-0415-02）。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 两组患者均予五谷杂粮、洋葱、黄瓜、苦瓜等合理健康低糖饮食干预，以及健步走、太极拳、羽毛球等运动康复干预。对照组使用甘精胰岛素[赛诺菲安万特（北京）制药有限公司，批准子号：国药准字：J20120031]对患者进行皮下注射，于每日睡前固定时间皮下注射，初始剂量为0.2IU/kg，然后定时进行血糖监测，动态调整甘精胰岛素注射剂量。联合组：在甘精胰岛素组治疗基础上使用穴位按摩辅助治疗：嘱患者取仰卧位，分别找到涌泉穴、足三里、关元穴。按揉方法：在患者对应穴位位置使用拇趾端按压、点揉、旋揉，在患者耐受范围内保持力度适中，1 次/d，按揉10～15min，连续3 周。甘精胰岛素使用剂量同对照组。

1.2.2 糖化血红蛋白（hemoglobin A1c，HbA1c）、空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）、餐后2h血糖（2-hour postprandial blood glucose，2hPG）、胰岛β 细胞功能指数（index of β-cell function in HOMA，HOMA-β）、胰岛素抗生指数（insulin life resistance index，HOMA-IR）水平检测 采集患者治疗前后空腹、饭后2h 静脉血5ml，通过葡萄糖氧化酶法检测HbA1c、FBG、2hPG 水平，将所采集患者的血清置于无菌试管中，待血清凝固后分离血清，送至检验室检验，记录HbA1c、FBG、2hPG 水平，并计算HOMA-β、HOMA-IR 水平。

1.2.3 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、硫代巴比妥酸法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平检测 通过黄嘌呤氧化酶法测定，选取聚苯乙烯试管，分别为对照管和测量管。提取样品后，于上清中加蒸馏水，上清∶蒸馏水为1∶10。两管内分别加入1.0ml 试剂盒中的试剂，然后测量管加入样品50μl，在对照管内加50μl 蒸馏水，待加样后，将试管放入旋涡混匀器进行充分混匀，37℃恒温水浴箱中存1h。然后在对照管、测量管中各加4ml 显色剂，室温放置20min。使用蒸馏水调零分光光度计算，比色应在波长450nm 波长测定吸光度，测定SOD 水平。

通过使用硫代巴比妥酸法检测MDA 水平。取用2 个聚苯乙烯试管，并分为测量管、标准管，然后在测量管加入0.2ml 的上清液与试剂，标准管内加入13nmol/l 四乙氧基丙烷0.2ml 与试剂盒试剂。随后将两管放置于试管架中摇晃至均匀。测量管置入硫代巴比妥酸3ml 与50%冰醋酸1ml，标准管置入4ml硫代巴比妥酸与1ml 双蒸水，并将其置入旋涡混匀器中将其摇晃均匀，将试管口使用保鲜膜进行密封，用针头刺出一个小孔，60min 80℃水浴，使用后用流水冷却，然后在3℃下以3000 转/min 离心处理5min，随后加入比色皿内待检，使用蒸馏水调零分光度计算出MDA 水平。

1.2.4 酶联免疫吸附实验法检测白介素细胞-17（interleukin 17，IL-17）、白介素细胞-1β（interleukin-1β，IL-1β）、Irisin 检测 采用酶联免疫吸附试验法检测IL-17、IL-1β、Irisin 水平，采用离心机（济南爱来宝仪器设备有限公司，型号：TD-5E）离心3000转/min，离心半径10cm，离心15min。后置于-70℃的低温中保存、待检。随后取出血清样本，置-37℃保温箱环境下利用试剂盒酶标板进行检测，将血清样本用稀释液进行稀释，其稀释比例为1:2。首先，先将60μl 稀释成功的标准品加入至反应孔中，37℃常温中孵育110min；其次，通过洗涤液洗涤3 次，加入60μl 抗体工作液；再次将其置于恒温环境中孵育50min，洗涤3 次后加入100μl 终止液终止反应，于450nm 波长处测定吸光度，绘制IL-17、IL-1β、Irisin 水平曲线。

1.2.5 血脂水平检测 使用离心机（Eppendorf 艾本德中国有限公司，型号：Centrifuge5427R）以2500转/min 对患者血清离心处理10min，离心半径10cm。使用全自动生化分析仪（上海帝博思生物科技有限公司，型号：PUZS-300）检测总胆固醇（serum total cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high level data link control，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平。

1.2.6 Netrin-1 表达检测 采用RT-PCR 法测定Netrin-1 相对表达量，采用Netrin-1 提取分离试剂盒（北京艾克赛仑生物科技有限公司）提取血液内RNA，用RTFQ-PCR 试剂盒进行反转录，将cDNA产物进行PCR 扩增。条件参数：预火95℃，预变性10min，取出降温至85℃，变性5s，迅速降温至60℃，退火15s，温度保持50℃，延伸45s，35 个循环，重复实验3 次。内参β-actin 上游引物：5′-GTTGCGTTA CACCCTTTCTTG-3′，下游引物：5′-CTGCTGTCAC CTTCACCGTT-3′；Netrin-1 上游引物：5′-TGGGG CGGTTGTCCTATTTC-3′，下游引物：5′-GCCTTCTT GCTTGGCGTGT-3′；以β-actin 为内参，采用2-ΔΔCt方法计算Netrin-1 相对表达量。

1.3 疗效评价

显效：两组氧化应激、血脂水平得到显著改善，炎性反应显著减轻，其余相关指标均得到显著改善；有效：两组氧化应激、血脂水平得到有效改善，炎性反应得到一定程度减轻，其余相关指标均得到有效改善；无效：患者临床症状以及各指标水平未得到任何改善。总有效率=（显效例数+有效例数）/总例数×100%[7]。

1.4 不良反应

观察两组患者治疗中是否出现皮肤瘙痒、视觉异常、低血糖等不良反应。

1.5 统计学方法

采用SPSS 19.0 统计学软件对数据进行处理和分析，应用Kolmogorov-Smirnov 检验数据是否符合正态分布，若符合正态分布以均数±标准差（）表示，Levene 法进行方差齐性检验，两组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验，计数资料以例数（百分比）[n（%）]表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的各项临床观察指标比较

治疗前，两组患者的HbA1c、FBG、2hPG 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，与对照组比较，联合组患者HbA1c、FBG、2hPG 水平明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者的各项临床观察指标比较（）

表1 两组患者的各项临床观察指标比较（）

2.2 两组HOMA-β、HOMA-IR 水平比较

治疗前，两组患者的HOMA-β、HOMA-IR 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，与对照组比较，联合组患者HOMA-β 水平升高，HOMA-IR水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组HOMA-β、HOMA-IR 水平比较（）

表2 两组HOMA-β、HOMA-IR 水平比较（）

2.3 两组患者的氧化应激及炎症因子水平比较

治疗前，两组患者的SOD、MDA、IL-17、IL-1β水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，联合组患者SOD 水平明显高于对照组，MDA、IL-17、IL-1β 水平明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组患者的氧化应激及炎症因子水平比较（）

表3 两组患者的氧化应激及炎症因子水平比较（）

2.4 两组患者各项血脂指标比较

治疗前，两组患者各项TC、TG、HDL-C、LDL-C水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，与对照组比较，联合组TC、TG、LDL-C 水平降低，HDL-C 水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 两组患者各项血脂指标比较（）

表4 两组患者各项血脂指标比较（）

2.5 两组Netrin-1、Irisin 表达水平比较

治疗前，两组Netrin-1、Irisin 表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，与对照组比较，联合组患者Netrin-1 表达水平降低，Irisin水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表5。

表5 两组Netrin-1、Irisin 表达水平比较（）

表5 两组Netrin-1、Irisin 表达水平比较（）

2.6 两组疗效比较

联合组患者治疗后的总有效率明显高于对照组，差异有统计学意义（χ2=5.404，P=0.020），见表6。

表6 两组疗效比较[n（%）]

2.7 两组不良反应比较

两组患者不良反应发生率比较，差异无统计学意义（χ2=1.652，P=0.199），见表7。

表7 两组不良反应比较[n（%）]

3 讨论

糖尿病在我国的发病率较高，为临床常见的慢性病、多发病，病情较复杂，主要以多食、多饮、多尿、体重减轻为主要临床症状，常合并心脑肾等多种并发症。近年来，随着人口老龄化的增加，该病呈逐年上升趋势，已经成为严重威胁老年人群的主要疾病之一[8]。有效平稳控制血糖，才能改善及延缓病情进展。胰岛素具有较理想的控糖效果，是目前临床治疗糖尿病常用的手段之一。本研究选用甘精胰岛素治疗老年糖尿病，能够有效降低患者高血糖，减少高血糖对患者机体带来的损伤，延缓病情的进展及减少并发症的发生[9]。

我国传统中医认为糖尿病的发生是由多种原因诱发机体阴虚燥热而导致。穴位按摩作为一种传统保健疗法，在传统中医中具有悠久的历史[10]。研究显示，适当的穴位按摩对老年糖尿病患者的血糖控制具有较好的辅助作用[11]。HbA1c、FBG、2hPG 为常用的血糖指标，检测HbA1c、FBG、2hPG 水平对老年糖尿病患者血糖控制情况、临床治疗效果的评价具有重要意义[12,13]。本研究结果显示，对老年糖尿病患者使用穴位按摩辅助甘精胰岛素治疗，患者HbA1c、FBG、2hPG 水平明显降低，说明二者联合应用能有效控制患者血糖水平。

胰岛素抵抗能够降低靶细胞对胰岛素敏感性，调节机体血糖水平，参与糖尿病的发生、发展过程[14]。本研究结果显示，老年糖尿病患者使用穴位按摩辅助甘精胰岛素治疗，患者HOMA-β、HOMA-IR 水平受到明显调控，说明二者联合应用能明显改善患者胰岛素抵抗水平。

大量临床研究结果显示，糖尿病的发生发展与氧化应激反应、炎症反应关系密切，因此，减轻氧化应激损伤、炎性反应严重程度是临床治疗糖尿病的关键。SOD 在机体内以氧自由基的形态存在，自身具有较高的活性，能够有效清除机体内的有害物质[15]。MDA 通过机体的不饱和脂肪酸过氧化分泌，有效反映机体细胞的氧化程度[16]。IL-17、IL-1β 是常用的评价机体的炎性反应指标，二者的水平变化与机体炎性反应密切相关[17]。本研究结果显示，使用穴位按摩辅助甘精胰岛素对老年糖尿病患者进行治疗，患者SOD 水平上升，MDA、IL-17、IL-1β水平下降，说明使用该治疗方案对老年糖尿病患者进行治疗，能够减轻患者氧化应激损伤、炎性反应严重程度，治疗效果较好。

本研究结果显示，对老年糖尿病患者使用穴位按摩辅助甘精胰岛素进行治疗，能够降低TC、TG、LDL-C 水平，升高HDL-C 水平。在老年糖尿病的临床治疗方面，TC、TG、HDL-C、LDL-C 为常用检测血脂水平异常的指标，TC、TG、HDL-C、LDL-C指标水平变化与老年糖尿病的病情严重程度具有相关性[18]，因此对糖尿病患者采用穴位按摩辅助甘精胰岛素进行治疗，能够改善患者血脂水平，从而发挥治疗效果。

Netrin-1 是具有促进神经组织生长发育作用的神经生长因子，能够促进血管生成、抑制炎性细胞迁移，并减轻机体炎性反应[19]。Irisin 作为一种运动诱导肌肉因子，其水平变化与机体糖耐量、胰岛素抵抗联系密切[20]。研究显示，Netrin-1、Irisin 表达变化参与了机体血管新生，与糖尿病的发生、发展密切相关。本研究结果显示，使用穴位按摩辅助甘精胰岛素对老年糖尿病患者进行治疗，患者Netrin-1 表达下调，Irisin 水平上升，说明使用该治疗方案对老年糖尿病患者进行治疗，能够调控Netrin-1、Irisin表达水平，治疗效果较好。本研究还发现，使用穴位按摩辅助甘精胰岛素对老年糖尿病患者进行治疗，能够控制患者病情进一步发展。

综上所述，使用穴位按摩辅助甘精胰岛素对老年糖尿病患者进行治疗，患者血糖水平、胰岛素抵抗明显缓解，氧化应激、炎性反应明显减轻，血脂水平也得到显著改善，调控Netrin-1、Irisin 相对表达量，治疗效果较好，为老年糖尿病的临床治疗提供一定的参考依据。