柴 局，牛 峰，张良斌，张志强，张仙保，罗保华，徐海波，高振江，冯志远，魏 娟，张新杰★，冯立刚

（1.包头市农牧科学技术研究所，内蒙古包头 014000；2.包头市达茂联合旗百灵庙镇综合保和技术推广中心，内蒙古包头 014000；3.呼伦贝尔市农牧科学研究所，内蒙古 呼和浩特 010000；4.巴彦淖尔市乌拉特中旗农牧和科技局畜牧业服务中心，内蒙古 巴彦淖尔 015000）

内蒙古依托丰富广阔的草原资源，肉牛养殖在全国一直占据着非常重要地位。目前农牧民养殖肉牛品种以西门塔尔牛及西门塔尔杂交牛为主，以适应饲养和市场需求。西门塔尔牛原产于瑞士阿尔卑斯山，由于其产乳量高，产肉性能优秀，役用性能也不错，是被称为“全能牛”的乳、肉、役兼用的大型品种，备受我国农牧民喜欢。又该品种牛对地方黄牛改良效果良好，因其杂交后代毛色漂亮、生长快、早熟、屠宰率高、适应性强、耐寒抗病等特点，很受养殖户欢迎。为了提高养殖效益，人们开始采用同期发情和人工冷配技术进行人工繁殖。因内蒙古地处西门塔尔肉牛及西门塔尔杂交牛养殖体量较大，体况差别较大，会对肉牛养殖繁育环节有一定影响。

目前通过药物干预采用同期发情技术的途径主要分为两种：（1）采用黄体溶解，利用前列腺素类的药物对空怀母牛的处理，促使卵泡成熟排卵；（2）延长母牛的黄体，采用孕酮类药物来处理，抑制卵巢的卵泡生长发育，通过孕酮类药物延长母牛的黄体，然后迅速停药使卵泡成熟排出。

目前通过在肉牛繁育中推广同期发情技术有很多优点，（1）通过同期控制母牛发情，有利于在肉牛育种与繁殖中提高工作效率，推广同期发情、人工授精技术缩短世代间隔、按照自然发情母牛3年2胎，通过该技术可以一年一胎，提高母牛繁殖效率；（2）便于生产上的管理，通过同期发情技术的推广有利于控制母牛的配种期，有计划地繁殖、生产和育肥，根据养殖场的情况合理安排配种、产犊的时间，做到生产与销售相协调；（3）有利于养殖场设施和设备的合理使用，通过有计划的繁育工作，统筹安排养殖场工作人员的工作，做好饲料生产、供应与组织肉牛的存栏、出栏管理的相互配合协调工作。（4）大力提高繁殖力。用前列腺素处理因持久黄体存在而表现乏情的母牛，其黄体逐渐消散，繁殖力恢复，通过同期发情技术使卵巢静止的母牛经过孕激素类药物处理后，使其表现发情；（5）有利于推广AI（人工授精冷配技术）。由于养殖户分散AI推广受到影响，通过同期发情技术肉牛养殖户在短时间内使母牛集中发情、排卵，按照计划配种，方便AI的推广。

试验母牛饲养在内蒙古达茂旗半牧半舍的草原地区，养殖场空怀期为80d，41头母牛，试验前进行为期10d的调整期后，被分为两组，分别定为Ⅰ组和Ⅱ组，Ⅰ组21头母牛，Ⅱ组20头母牛。在实验开始时，记录体重和身体状况评分，每组放置在大约1.5公顷的草场中。

1 试验材料与方法

1.1 试验动物来源 试验动物来自内蒙古包头市达尔罕茂明安联合旗草原路宝龙养殖场，经度：110.3789496度、纬度：41.5187473度，海拔：1470 m。

试验牛体况：试验牛来自宝龙肉牛养殖场产后80d以上无繁殖障碍性能的西门塔尔空怀母牛和西门塔尔与蒙古牛杂交的西蒙杂交牛。实验牛数量：西门塔尔空怀母牛20，与本地蒙古牛杂交的西蒙杂20头，年龄为4～7岁。

1.2 试验兽用药品 孕酮阴道栓(Cue-Mate)，加拿大Bioniche公司生产；戈那瑞林注射液（GnRH）宁波市三生药业有限公司生产，氨基丁三醇前列腺素F2α(PGF2α)，宁波市三生药业有限公司生产；促黄体素释放激素(LHRH-A3)(规格50μg/支)，宁波市三生药业有限公司生产。5%酒精、生理盐水、160万IU青霉素钠等。天津云牧生物科技有限公司提供。

1.3 冻 精 冻精由包头市农牧科学技术研究所提供，品种为西门塔尔牛。

1.4 试验器材 永新显微镜（国产）、耐尔尼注射器（规格20mL装、注射针头16号）、蒋氏输精枪（0.25ML）、直检长臂手套、无菌脱脂棉球、博翔来B超测孕仪（BXL-V50）等。

2 试验方法

2.1 分 组 Ⅰ组：20头西蒙塔尔空怀母牛和21头杂交西门塔尔空怀母牛；Ⅱ组：21头杂交西门塔尔牛。于7月份开始试验。

2.2 发情方案筛选确定 试验开始第1日上午8：30～9：30放栓，每头试验牛肌肉注射戈那瑞林2支（4mL），做好记录。第11日上午同一时段实验牛肌肉注射氯前列烯醇钠注射液2支（4mL）和戈那瑞林2支（4mL）。第8日上午撤栓，撤栓时用生理盐水与青霉素钠配制液清洗母牛阴道。第10日上午肌肉注射促排3号4mL。并进行人工授精(见表1)。

表1 Cue-Mate法诱发肉牛排双卵处理程序

成年母牛1-8-9-10同期方案。

2.3 人工授精 观察发情情况，做好发情记录，并在试验的第10日8：00开始人工授精，做好授精记录，输进采用直肠把握法，进行子宫颈深部输精法早晚各一次。

2.4 妊娠检查 人工授精35d后采用兽用B超仪（博翔来-BXL-V50）对试验牛只进行直检，确定妊娠情况并记录。

3 试验结果

同期发情效果观察，由表2可知，两次试验的同期发情率分别为95%、85.75%，Ⅰ组高于Ⅱ组,但差异不显著（P＞0.05）；受胎率分别为78.95%、61.11%，Ⅰ组组显著高于Ⅱ组（P＜0.05），产双胎率分别为33.33%、27.27%，Ⅰ组高于Ⅱ组，但差异不显著（P＞0.05），两组平均产双胎率为30.77%，Ⅰ组产三胎率为6.67%，Ⅱ组出现流产1头。

4 小结与讨论

4.1 繁殖效率是影响牛犊和肉牛养殖业成功的重要因素之一，在繁殖技术较低的情况下，发展牛犊或肉牛产业受到很大的影响。20世纪50年代，冷冻牛精液被开发出来，经后代测定的公牛的人工授精被认为是有效地促进肉牛产业的重要技术。20世纪50～60年代，人工授精对肉牛的要求是肉牛发情的观察判断，因此，随着人工授精技术的发展，进一步控制发情和育种管理具有更大的利益和价值，尤其是对肉牛产业尤为重要。人为控制肉牛发情周期技术的也应用而生，运用同期发情技术对肉牛进行处理，使其在预定的时间内集中发情、配种，提高生产效率。保障肉牛养殖场的经济效益。利用同期发情技术程序控制，对产业化养殖场来场非常重要。

4.2 西门塔尔牛与西蒙杂交牛效果比较 通过同期发情技术处理，西门塔尔牛的发情率明显高于西杂牛，原因可能是因为杂交牛发情体况及繁殖激素处理时间需要更长时间，且西杂牛可常年发情，产仔后需经过一段时间恢复，一般自然繁殖的肉牛在在产后2～3d内子宫颈很快收缩，同期发情的机理主要为成年母牛的发情周期为18～24d，平均为21d，对于青年母牛的发情周期约为20d，在使用同期发起技术效果较好，20世纪80年代到21世纪初的研究使人们了解了卵巢卵泡的波动，描述了卵泡的补充、选择、优势和闭锁的时间，这种研究对有效管理卵泡以达到成功的人工授精是必不可少的。在本研究结果中杂交牛受胎率相对低于西门塔尔纯种牛，可能与杂交牛在年龄和体况上与西门塔尔牛有差别造成的，同期发情是根据卵巢上卵泡的生长、成熟、排出及排卵后成为红体、最后形成黄体的周期活动来干扰周期中某个阶段，让牛群卵巢周期达到同步，群体卵巢上表现为两个阶段：这些研究成果发展了大量具有高效效益的、能够满足大多数牛奶企业育种管理需要的、具有良好同步性和育种管理方案。第一阶段通过延长黄体期，推迟卵泡期,为卵泡期；第二阶段通过缩短黄体期，使卵泡期提前,为黄体期，本研究是通过二者结合起来一起使用，要想达到理想的发情同步，就要把卵泡期和黄体期的转换有机结合起来，这需要以后进一步研究。

表2 试验母牛的同期发情、人工授精和产仔结果

4.3 母牛双胎率效果 牛是单胎动物，通常母牛卵子生产，受精，移植，怀孕正常，一头母牛在最佳年龄产下第一头小牛犊，之后每隔12～13个月产下一头小牛犊。产后平均间隔时间为正常产犊69d，异常产犊71d。为了每年产仔，母牛需要在85～115d完成配种。发情周期持续时间为21d，交配非能育周期平均为37d，非交配周期平均为32d。排除32d或以上的发情周期，发情周期持续时间为21～22d。试验结果表明，应用成母牛1-8-9-10同期方案，导母牛产双胎是可行的，平均双胎率达到30.77%。另外，母牛群产双胎可能与母牛的体况、养水平、饲养管理技术、冷配技术水平有关。

4.4 超数排卵方案的选择 关于牛羊超数排卵的最早报道来自美国的威斯康星州。基本上，促性腺激素是在前期正常发情之前几天给予的，目的是诱导多次排卵。大约5d后(或发情开始时)，通常注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)来诱导排卵。虽然有关于绵羊、马、牛和猪前垂体制剂的研究报道，但使用马绒毛膜促性腺激素(ECG或PMSG)已成为标准方法。李铭等在荷斯坦牛超数排卵研究中对CIDR+FSH+PGF2α超数排卵方法进行了改进，在促性腺激素诱导的持续性卵泡出现新卵泡波时开始FSH治疗。或者，诱导小的有腔卵泡生长和超排卵。平均每头用“CIDR+FSH+PGF2α+LHRH-A3方法比CIDR+FSH+PGF2α的方法的可用胚胎数要多1.5枚左右”的效果。卢维在改进超数排卵方案使用“CIDR+E2+P4+FSH+PGF2α+LHRHA3法”，试验母牛的同期发情效果非常好。本试验在放置cue-Mate+PGF2α+LHRH-A3同时，通过联合使用几种外源激素，对试验母牛肌肉注射戈那瑞林6 mg，放栓4mg，撤栓2mg，注射PGF2α，以便诱发其增大双排、三排卵的比例，最终获得较高的双犊率。该方案操作方便简单，便于推广应用。本次试验中没有使用E2、P4可能导致但双胎率与卢维联合使用的E2、P4效果无差异，说明使用戈那瑞林也能加快卵巢黄体的成熟溶解，从而诱发卵巢波的发生。促排3号（LHRH-A3）是促黄体素释放激素的类似物，属多肽类激素，能促使动物垂体前叶分泌(LH)和FSH，利于改善受精环境和提高胚胎质量。

4.5 同期发情技术中营养水平对超数排卵和受胎率的效果 母牛营养水平对超数排卵与发情率和受胎率受影响较大。母牛高、低摄入量均可改变体内和卵泡液激素水平。相对于饮食的影响，药物超数排卵的效果更大，涉及卵泡液激素浓度和卵母细胞形态异常的显著增加。反刍动物的营养与生殖之间的关系是复杂的，反应往往是多变的和不一致的。肉牛低摄入量可以降低排卵率，而高能量和高蛋白质的日粮可以提高体质差的肉牛的排卵率，但不会使核仁组织中的染色质颗粒脱落。这些结果表明，高和低摄入量都可以改变体内和卵泡液激素的浓度。相对于饮食的影响，超数排卵的效果更大，涉及卵泡液激素浓度和卵母细胞形态异常的显著增加。

张立等研究结果表明，较高的营养水平饲喂与药物处理相协调对提高母牛同时发情是有效的，因此提高实验动物的营养水平增加超数排卵发情率和受胎率是一种非常重要的手段。内蒙古属高寒草原地区，冬季寒冷风大，特别是阴山北麓，对肉牛繁殖有一定影响，因此养牛场在进行同期发情技术前，为饲喂较高营养饲草料可以提高其发情率和受胎率，添加微量元素和维生素，以确保其较好的繁殖机能。

从本次试验及卢维等的报道来看，用FSH或PMSG处理，结合人工授精技术是可以诱发肉牛产双胎的，排双卵或产双胎的程序主要在于如何选择外源激素并掌握它的用量。本实验相对于前者的研究虽然在处理程序上优化了，但在用外源激素诱发肉牛排双卵时，多次肌肉注射激素对母牛本身会造成了一定的应激反应，一定程度上也影响了最终的效果，今后在诱发肉牛超排时应进一步加强处理程序简化或降低处理应激等方面的研究。