蒋洁兰，陈佳宜，林小平，叶 乐，王海山，毛明光

(1.海南热带海洋学院 崖州湾创新研究院，海南 三亚 572022；2.海南热带海洋学院 热带海洋生物资源利用与保护教育部重点实验室，海南 三亚 572022；3.海南热带海洋学院 海南省热带海洋渔业资源保护与利用重点实验室，海南 三亚 572022；4.海南热带海洋学院 水产与生命学院，海南 三亚 572022)

罗非鱼为广盐性鱼类，能在淡水中养殖，也能生活在不同盐度的咸水中。与淡水养殖相比，咸水养殖可改善罗非鱼的肌肉品质及口感、风味。我国沿海地区存在面积广泛的受海水侵蚀形成的盐碱地和盐水湖，受开发技术和养殖品种限制，未能得到有效利用。吉富罗非鱼是现有养殖尼罗罗非鱼中生长最快的一个品系，对环境的适应能力强，耐盐性较好，本文拟研究不同盐度对吉富罗非鱼受精卵孵化和吉富罗非鱼稚鱼生存的影响，以期找到最适合吉富罗非鱼生存、繁殖的盐度范围，为吉富罗非鱼的咸水养殖提供理论依据，也为我国沿海地区盐碱地和盐水湖的开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

吉富罗非鱼稚鱼及受精卵均取自百容水产良种有限公司定安育种基地。选用稚鱼全长为(2.15±0.25)cm，平均体重0.28 g。放在吊水池中暂养24 h，并从中挑选活力旺盛、无明显受伤、染病迹象的个体用于试验。暂养用水为经过消毒处理的自来水，暂养期间定时测量水质，确保桶中水质始终保持pH值 7.0～7.5，水温(28±0.5)℃，亚硝酸盐及氨氮均处于极低水平。

1.2 试验设计

1.2.1 盐度对吉富罗非鱼受精卵孵化的影响 向经过曝气处理的自来水中加入适量的海盐，配置成盐度分别为3‰、6‰、9‰、12‰、15‰、18‰、21‰、24‰的水体，未加海盐组为对照组(盐度为0)，每组设置三个平行。将挑选后的吉富罗非鱼受精卵分组放入30 L不同盐度的水体中，每桶100粒。试验过程中水温控制在(28±0.5)℃范围内，利用气泵使孵化桶中存在轻微地向上的水流，保证受精卵悬浮在水中。

观察并记录吉富罗非鱼受精卵的孵化情况，包括孵化时间、孵化周期、孵化率。孵化时间是指同批受精卵中有50%的受精卵孵化出膜时所用的时间；孵化周期指同批受精卵从第一尾仔鱼孵化出膜开始至最后一尾仔鱼孵化出膜间隔的时间；孵化率即受精卵的孵化比率，孵化率=受精卵出苗数/受精卵总数×100%。

1.2.2 盐度对吉富罗非鱼稚鱼急性胁迫试验 配置盐度为10‰、15‰、20‰、25‰、32‰共5个盐度组(一般认为，32‰是罗非鱼能正常生活的最高盐度)的水体，曝气自来水(盐度为0)为对照组，每桶放入吉富罗非鱼稚鱼30尾，每一盐度组设置3个平行。利用恒温棒将试验水温控制在(28±0.5)℃，每天早晚各调节盐度1次。试验鱼死亡标准为鳃盖停止运动，用解剖针轻扎而无反应。试验开始时持续观察3 h，随后每隔1 h观察1次，试验开始8 h后，每隔4 h观察1次，记录试验鱼的存活状况。试验期间不投喂饲料，不换水。

耐盐指标：

平均成活时间(mean survival time,MST))：将试验鱼直接从淡水移到试验所用的盐水中的平均成活时间。

50%成活时间(median survival time,ST50)：将试验鱼直接从淡水移到试验所用的盐水中，50%个体成活的时间。

开始死亡时间(begin time,BT)：将试验鱼直接从淡水移到试验所用的盐水中，出现个体死亡现象的时间。

死亡率：将试验鱼直接从淡水移入到试验所用的盐水中，在试验期间，死亡个体所占的百分比。

2 结果

2.1 盐度对吉富罗非鱼受精卵孵化率的影响

盐度对吉富罗非鱼受精卵孵化的影响如表1所示。不同盐度下，罗非鱼的孵化时间不同，在盐度0和盐度24‰条件下孵化时间最长，分别为(77.6±0.075)h和(77.5±0.043)h；盐度3‰组和盐度15‰组孵化时间最短，为(75.9±0.45)h和(76.2±0.19)h。吉富罗非鱼受精卵的孵化周期大致随盐度的增大而增大，以盐度24‰组最长，为(5.1±0.029)h。当盐度范围为6‰～15‰时，吉富罗非鱼受精卵的孵化率变化范围在(90.3±0.47)%～93.0%，组间孵化率差异不显著(>0.05)；当盐度低于或等于3‰时，孵化率随着盐度的降低而降低，组间孵化率差异显著(<0.05)，且显著低于盐度6‰～15‰组；当盐度高于或等于18‰时，孵化率随着盐度的升高而降低，组间孵化率差异显著(<0.05)，且显著低于盐度6‰～15‰组，当盐度达到24‰时，孵化率最低，为(5.3±0.47)%。

表1 盐度对吉富罗非鱼受精卵孵化的影响

2.2 盐度对吉富罗非鱼稚鱼生存的影响

将稚鱼依次放入各盐度梯度后，盐度为0、10‰、15‰的组中稚鱼无明显反应，经过短暂的随机游动后即开始集群匀速逆流游动；盐度为20‰、25‰、32‰的组中稚鱼无规则急游后集群伏于水底，在盐度25‰、32‰的组中，部分吉富罗非鱼稚鱼始终处于无规则急游状态。

其中，在盐度为32‰的试验组中最先出现试验鱼的死亡，开始死亡时间为(24.3±3.3)min，随后该组中出现鱼的大规模死亡，该组的50%成活时间出现在试验开始后的(39.3±2.5)min。盐度25‰的试验组中开始死亡时间为(65±3.6)min，50%成活时间出现在试验开始后的(95.7±10)min。与其他盐度组相比，盐度25‰和32‰组的试验鱼在死后体表分泌有较多黏液。

在盐度20‰的试验组中，部分稚鱼在经历了最开始的应激状态后逐渐开始恢复至正常游动状态，在(229.3±2.5)min时，稚鱼开始死亡，此时组内稚鱼活动状态出现分化，部分鱼开始趋流游动，而部分鱼卧于桶底，在没有外力刺激的情况下无明显活动迹象，刺激(用小抄网和细竹条轻轻搅动)后缓慢游动片刻。该组的50%成活时间出现在试验开始后的(1 320±85)min。

吉富罗非鱼稚鱼的耐盐指标见表2。96 h内，盐度10‰组、15‰组和对照组未出现稚鱼死亡；盐度20‰组稚鱼开始出现死亡现象；盐度高于25‰时，96 h稚鱼的死亡率都达到了100%。

表2 吉富罗非鱼稚鱼的耐盐指标

3 讨论

3.1 盐度对罗非鱼受精卵孵化的影响

盐度对于鱼类受精卵，尤其是淡水鱼类受精卵的孵化有着不可忽视的作用。在一定盐度范围内(1‰～12‰)，盐度越大，鲤()受精卵的孵化率越小，其受精卵孵化的最佳盐度为1‰左右；陈昆慈等通过对宝石鲈()受精卵孵化的研究发现，其最适盐度范围为0～8‰，当盐度为8‰时，受精卵的孵化率最高，正常孵化盐度不能高于12‰。广东鲂()在盐度1‰～7‰的条件下孵化情况最好，受精卵正常孵化的最大盐度不能超过11‰。虽然罗非鱼成鱼可以在淡水中正常生活，但在本次试验中，盐度为0的对照组中吉富罗非鱼受精卵的孵化率只有(10±0.47)%，孵化效果非常不理想，而实际生产中淡水土塘中雌鱼孵化的效果却很好，这可能与罗非鱼受精卵在雌鱼口腔孵化过程中口腔的理化环境以及可能存在的分泌出的某种对孵化有益的物质有关。在本次试验中，当盐度为6‰～15‰时，吉富罗非鱼受精卵的孵化率变化范围在(90.3±0.47)%～93.0%，而盐度低于3‰或高于18‰时，孵化率均随着盐度的变化而显著降低。无论盐度过高或过低，吉富罗非鱼的受精卵孵化率都处于较低的水平，盐度大小是影响吉富罗非鱼受精卵孵化率的重要因素，在其他条件相同的情况下，孵化周期随着盐度的增大而增大。通过对不同盐度下吉富罗非鱼受精卵的孵化时间、孵化周期和孵化率的统计与观察得出结论，适合吉富罗非鱼受精卵孵化的盐度范围为6‰～15‰。在实际生产中，出于降低成本和简化操作的考虑，可以在适宜盐度范围内选择较低的盐度作为生产标准盐度。

3.2 盐度胁迫对罗非鱼稚鱼生存的影响

当鱼类处于高盐度胁迫的环境条件时，由于外界的渗透压与鱼体内的渗透压存在着明显的差异，因此，鱼类需要消耗比正常情况下更多的能量，这些额外消耗的能量大多被用以维持鱼体内渗透压在一定范围内的平衡。在这种情况下，发育完全、抵抗能力强的成鱼受到的影响尚且较小，而还未完全成熟对环境变化抵抗能力弱的仔鱼、稚鱼和幼鱼则尤其敏感，极易影响到这些鱼的活力与正常的摄食活动等，进而导致鱼的死亡率上升。本研究中，将吉富罗非鱼稚鱼直接放入不同盐度水体中，由于稚鱼对体内渗透压的调节能力较弱，因此在试验的最初阶段，便出现了盐度25‰组和盐度32‰组稚鱼的全部死亡与盐度20‰组的部分死亡，而存活的稚鱼在生理及行为方面做出调整，使得鱼体内外的渗透压逐渐平衡，适应了环境盐度的急剧变化，最终存活率趋于稳定。对吉富罗非鱼稚鱼的急性盐度胁迫试验结果与其他淡水鱼类在高盐度胁迫下相近，当盐度低于或等于15‰时，96 h内各组别中罗非鱼无死亡现象；当盐度高于或等于20‰时，吉富罗非鱼稚鱼的成活率和平均存活时间随盐度增长而快速降低，盐度25‰组和盐度32‰组稚鱼在96 h内全部死亡。

综上得出，最适合吉富罗非鱼孵化的盐度为6‰～15‰；在没有经过长期盐度驯化的情况下，吉富罗非鱼稚鱼适合在盐度低于15‰的条件下养殖。