傅增辉 林再红 金 艳 姜 岩 刘 晶 于绘丽 张广萍

（齐齐哈尔医学院附属第三医院神经内科，齐齐哈尔 161002）

多发性硬化（multiple sclerosis，MS）是中枢神经 系统的慢性炎症性脱髓鞘性自身免疫病。MS的临床症状不仅包括运动障碍，还包括认知缺陷［1-2］。实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）是已建立的MS模型，其特征在于中枢神经系统中的炎症和神经退行性变，并表现出与人类MS在临床和组织病理学上的相似性［3-5］。课题组前期研究发现，急性发作期的复发-缓解型MS患者维甲酸相关核孤儿受体γt（retinoicr acid-related orphanreceptorγt，RORγt）、B细胞转录激 活 因 子（B cell activating transcription factor，BATF）可能通过共同调控辅助性T细胞17（helper T cell 17，Th17）的分化，从而促进Th17及其细胞因子IL-17高表达，促使MS的发生与进展［6］。研究发现，RORγt在MS和EAE的发生发展中扮演重要角色，BATF与RORγt在多种自身免疫病中具有关联性［7-8］。本研究将通过髓鞘少突细胞糖蛋白多肽35-55（myelin oligodendrocyte glycoprotein35-55，MOG35-55）、完全弗氏佐剂（complete Freund"s adjuvant，CFA）和百日咳毒素（pertussis toxin，PTX）诱导EAE模型，检测小鼠Th17水平，观察脊髓组织BATF、RORγt、IL-17的表达及病理表现，旨在探讨BATF与EAE发病关键转录因子RORγt的关系，为进一步研究及临床治疗提供可能。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物SPF级雌性C57BL/6小鼠30只，8～10周龄，体质量18～20g，由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（黑）2016-001。本实验遵循实验室的实验动物使用管理规定，并通过齐齐哈尔医学院学校伦理委员会批准。建模前将实验动物在SPF级环境中饲养1周。将小鼠随机分为正常对照组、EAE组、EAE+甲泼尼龙（methylprednisolone，MP）组，每组10只。

1.1.2 主要试剂MOG35-55（批号：20190415020）购自英国Biorbyt公司；CFA（批号：201907143）购自美国Invivogen公司；将10 mg MOG35-55溶于2 ml生理盐水，并与含2.5 mg/ml结核杆菌的CFA等体积混合，使用玻璃注射器反复抽打至完全融合，制成油包水样乳剂。……