李新新 王燕芹 邢潇匀 马 蕾（滨州医学院附属医院皮肤科，滨州 256603）

IL-17A导致的免疫紊乱和炎症效应是银屑病的重要致病因素，辅助性T细胞17（Th17）是其主要来源细胞［1-2］。Notch信号通路在T淋巴细胞分化中起关键作用，在小鼠和人促Th17分化的细胞因子环境中均有Notch信号通路的活化［3］。课题组前期研究亦表明，Notch/发状分裂相关增强子1（hairy and enhancer of split 1，Hes1）信号通路能够调控银屑病患者及银屑病样皮炎小鼠Th17的分化和功能［4-5］。磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（also known as PKB，protein kinase B，AKT）/雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信号通路在银屑病发展过程中发挥重要作用，且该信号通路能够正向调控Th17的分化［6-8］。第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（phosphate and tension homology deleted on chromosome ten，PTEN）是PI3K/AKT/mTOR信号通路上游的负向调控因子，急性T淋巴细胞白血病研究显示，Notch信号通路靶基因Hes1能够负向调控PTEN［9-10］。本研究以银屑病样皮炎小鼠为研究对象，利用γ分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路，以探讨Notch/Hes1-PI3K/AKT/mTOR复合物1（mechanistic target of rapamycin complex 1，mTORC1）信号轴对IL-17A表达和分泌的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 小鼠来源及饲养24只雄性健康无特定病原（SPF）级BALB/c小鼠（济南朋悦实验动物繁育有限公司，动物合格证号：1107261911003852），6周龄，体质量（18±2）g，饲养于滨州医学院附属医院SPF动物房，动物实验许可证号：SYXK（鲁）20180022，室温（23±1）℃，照度15～20 Lux，光照时间为每天7：00～19：00，昼夜明暗交替时间12 h/12 h，标准灭菌饲料和高压蒸汽灭菌水饲养，自由取食，实验过程遵循减少、替代、优化的3R原则。

1.1.2 主要试剂与仪器5%咪喹莫特乳膏（英国3M Health Care Limited公司）；DAPT（纯度99%，美国Selleck公司）；Trizol RNA提取试剂、引物的设计及合成［生工生物工程（上海）股份有限公司］；PrimeScriptTMRT试剂盒、TB Green®PreMix Ex TaqTMⅡ试剂盒（日本TaKaRa公司）；……