郭 美，马丽娟

（定西市人民医院病理科，甘肃 定西74300）

宫颈癌是严重危害女性健康的恶性肿瘤，据世界卫生组织报道，2018年全球有大约近57万人新发宫颈癌，其中发展中国家和欠发达国家占76.2%[1]。人乳头状瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染是公认的导致宫颈癌的重要因素，其中至少有13种HPV 高危亚型感染可能引起宫颈癌前病变和宫颈癌[2]。一般情况下，HPV 感染并没有明显的临床症状，且在有限的时间内会被机体的免疫功能清除，但若高危型HPV 感染持续存在则会逐步发展为癌前病变甚至为癌。有文献报道，由于地区、种族差异，HPV 总感染率及HPV 感染亚型分布存在明显的地域差异性，即不同地区感染的亚型分布不同[3∕4]。目前尚未查到关于定西地区女性HPV 感染亚型分布的研究报道。所以，通过对定西地区女性HPV 感染状况进行统计分析，了解HPV 亚型分布特征，对于筛查高风险人群，及早对高危HPV 感染人群进行干预治疗具有指导意义，为当地适龄女性选择接种合适的HPV 疫苗降低该地区宫颈癌的发病率提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2017—2020 年在定西市人民医院进行高危人乳头状瘤病毒检测女性（包括门诊、住院及体检人群）的实验结果，共计10 322例，年龄16～90岁。所有样本均由妇产科医师使用宫颈刷采集宫颈脱落细胞，置于宫颈细胞保存液中，立即送检。

1.2 仪器与试剂

杭州博日科技有限公司基因扩增仪，型号TC-25∕H，潮州凯普医用核酸分子快速杂交仪，型号YYZ1005040，潮州凯普生物化学有限公司人乳头状瘤病毒（HPV）21 分型检测试剂盒（PCR+膜杂交法）。

1.3 方法

1.3.1 DNA分离提取

取保存有宫颈细胞的细胞保存液0.5 mL，以14，000 rpm 离心1 min，弃上清，严格按照试剂盒说明书使用裂解液提取DNA。取1 ul 抽提好的DNA样本作为模板进行PCR 扩增，剩余DNA 样品存储于-20℃备用。

1.3.2 PCR扩增

将PCR 混合液、DNA 聚合酶和DNA 模板按试剂盒要求混匀，扩增反应体系为25 ul∕反应，混匀，上机扩增。

1.3.3 杂交

严格按照试剂盒说明操作，检测结果阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点，根据膜条HPV 分型分布图判断感染类型。

1.4 统计学处理

所有实验数据均采用SPSS 23.0 软件进行统计分析，各年龄组之间的样本率比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高危型HPV总体感染情况

在10 322 例检测样本中，检出高危型HPV 感染2 210例，感染率为21.41%（2210∕10322）。以单一感染为主，共1699 例，占高危型HPV 感染率的76.88%（1699∕2210）。双重及多重感染511 例，占高危型HPV总感染率的23.12%（511∕2210）。

2.2 高危型HPV各亚型感染情况

在10 322 例检测样本中，HPV16 感染者共483例，占总样本量的4.68%（483∕10 322），感染率最高，其次分别为HPV58（4.53%，468∕10 322）、HPV52（4.10%，423∕10 322），见表1。

表1 定西地区女性高危型HPV各亚型感染情况[例（%）]

2.3 高危型HPV感染年龄分布情况

将10 322 例检测病例分为6 个年龄段，分析高危型HPV 感染情况。由表2 可见，高危HPV 感染的高发年龄段为60～69 岁，总感染率为30.30%（110∕363），其次是≥70 岁（24.78%，29∕117）和50～59 岁（22.70%，422∕1 859）。各年龄段之间总感染率比较差异有统计学意义（χ2=2211，P＜0.05），见表2。

表2 高危型HPV感染的年龄分布情况[例（%）]

3 讨论

人乳头状瘤病毒（HPV）是一种含双链DNA、无包膜、20 面体对称的核壳病毒，是最常见的性接触传播病原微生物之一。通过皮肤或黏膜微小损伤进入接触者皮肤黏膜，刺激上皮细胞增生，引起人类恶性肿瘤和疣。20 世纪70 年代，Zur Hausen 提出HPV 与子宫颈癌发病可能有关的假设。2008 年10月6 日，Zur Hausen 获诺贝尔生理学或医学奖。世界卫生组织已确认，宫颈癌的主要致病原因是HPV，几乎所有的宫颈癌标本中都可以找到HPV，使宫颈癌成为目前人类所有癌症中唯一病因明确、唯一可以早期预防和治疗、唯一可以消灭的癌症。正常宫颈受到高危型HPV 持续感染之后才会发生病变，从癌前病变发展为癌要经过5～10 年的时间，所以定期检测HPV，及早注射HPV 疫苗是预防宫颈癌的可靠方法。

研究表明，HPV 的感染率、感染型别和模式特征具有地域差异性[5]。本研究对10 322 例采集的HPV 样本进行回顾性分析，统计出定西地区妇女高危型HPV的感染率为21.41%，接近多省市统计的女性高危型HPV 感染率23.20%[6]。其中以单一感染为主，占76.88%，明显低于吕静等[7]研究报道的高危型HPV 单一感染率80.55% 和高超等[8]报道的81.80%。感染率最高的基因型是HPV16，其次是HPV58 和HPV52，与国内众多研究结果相似，杨赟平等[9]研究报道高危型HPV16 检出率最高，其次为HPV52 和HPV58；李冬梅等[10]研究报道HPV16 和HPV52 检出率最高；LI 等[11]研究报道四川地区HPV52、HPV58、HPV16 和HPV51 检出率最高；高超等[8]研究发现吉林长春地区体检人群中HPV16 和HPV52 检出率最高。此结论说明定西地区妇女高危型HPV 感染率与全国大多数地区感染率及感染型别地域差异性不大，HPV16、HPV58 和HPV52 仍然是定西地区女性感染的常见亚型。

通过对样本不同年龄段分组结果显示，50 岁以上是感染高危型HPV 的高峰年龄，尤其60～69 岁感染率最高，各年龄段之间感染率差异有统计学意义，但与国内多省市报道的不同年龄段HPV 检出率呈双峰分布的结论有差异[12-14]，此结论体现了高危型HPV分布年龄段的地域差异性。

4 结论

定西地区女性高危型HPV 感染率与国内多省市地区感染率相似，感染模式以单一感染为主，感染型别以HPV16 型最为常见，其次为HPV58 和HPV52 型。不同年龄段高危型HPV 感染率存在显著差异，60～69 岁感染率最高，可能与定西部分地区经济生活条件较为落后，卫生条件差，个人疾病预防观念薄弱，延误了宫颈病变早期筛查时间有关。由此可见，及早接种HPV 九价疫苗科能有效降低该地区女性高危型HPV感染率，而HPV九价疫苗的适宜接种年龄段为16～26岁，所以，应加强对定西地区年轻女性的健康教育，定期进行HPV筛查。