王远玲， 陈 林

(1.湖北省孝感市中心医院儿科， 湖北 孝感 432003 2.湖北省妇幼保健院儿科， 湖北 武汉 430070)

小儿反复呼吸道感染(Recuerrent respiratory tract infections,RRTIs)指患儿一年中发生上或下呼吸道感染频次超出正常范围，疾病发生率占儿科门诊约30%[1]。在呼吸道感染中，肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)、肺炎衣原体(Chamydiae pneumoniae,CP)均为常见病原体类型，有传染性，可在各个年龄组的儿童中出现[2]。现阶段临床关于上述3种病原体感染关注度越来越高，然而针对RRTIs患儿的相关文献报道较少。本研究对186例RRTIs患儿血清MP、CP、LP进行检测，分析其分布特点，旨在为疾病的预防治疗提供参考，报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取本院2017年9月至2021年9月186例RRTIs患儿，男96例(51.61%)，女90例(48.39%)；0～2岁44例(23.66%)，3～6岁76例(40.86%)，7～12岁66例(35.48%)；筛查季节：春季51例(27.42%)，夏季39例(20.97%)，秋季55例(29.57%)，冬季41例(22.04%)。

1.2纳入标准：符合全国呼吸道学术会议修订的RRTIs诊断标准[3]：①0～2岁：年发作次数大于等于7次；②3～6岁患儿：年发作次数大于等于6次；③7～12岁患儿：年发作次数大于等于5次，2次感染发生间隔在7d以上(注：①两次感染间隔至少7d以上；上呼吸道感染次数不够时候可加上下呼吸道感染次数，反之则不能；确定次数须连续观察1年；反复肺炎：须由肺部体征和影像学证实，1年内发作≥2次，且期间无肺炎体征和影像学改变)。0～12岁。未有急性感染表现；血MP、CP或LP病原体感染；伦理委员会批准，监护人同意。排除标准：①原发免疫缺陷性疾病；②重度营养不良；③合并肺部发育不良、过敏性鼻炎、哮喘等；④长期使用影响免疫的药物，如糖皮质激素等；⑤合并其他传染疾病。

1.3病原学检测：取3mL空腹静脉血，分离血清，通过间接免疫荧光法测定血清CP、LP病原体IgM，取血清15μL，加入PBS及抗人IgG吸附剂各150μL，对照无须通过抗人Ig G吸附剂处理，离心，于载玻片上滴入15μL血清，置入湿盒，37℃温度1.5h孵育，PBS冲洗浸泡，轻摇，蒸馏水冲洗后风干。滴入15μL抗人Ig M异硫氰酸荧光素，湿盒中37℃下孵育30min，重复上述PBS冲洗及与风干系列操作，盖上盖玻片，400倍荧光镜下观察，出现特异性荧光，则可判断为相应抗体阳性；如未出现特异性荧光，则判为相应抗体阴性。用被动凝集法检测血清MP-IgM，试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社提供，半定量检测血清MP抗体滴度，操作步骤按说明书执行，MP-IgM≥1∶80为MP感染。

1.4统计学分析：通过SPSS22.0软件，计数资料通过构成比或率的形式表示，不同性别、年龄、季节组间病原体阳性率的比较采用卡方检验，检验水准为0.05；对三组或四组间差异有统计学意义者进行两两比较，采用Bonferroni校正，三组间两两比较检验水准α=0.05/3=0.017；四组间两两比较检验水准α=0.05/6=0.0083。

2 结 果

2.1三种病原体阳性结果比较：RRTIs患儿血清MP病原体阳性率31.72%高于CP阳性率19.89%(P<0.017，Bonferroni校正)，CP病原体阳性率19.89%高于LP阳性率8.06%(P<0.017，Bonferroni校正)。见表1。

表1 三种病原体阳性结果比较

2.2性别差异性比较：不同性别RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体阳性率比较(P>0.05)。见表2。

表2 性别差异性比较

2.3年龄差异性比较：3～6岁年龄段RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体检测阳性率分别为51.32%、34.21%、17.11%高于0～2岁患儿13.64%、9.09%、2.27%，且高于7～12岁患儿21.21%、10.61%、1.52%(P<0.017，Bonferroni校正)。见表3。

表3 年龄差异性比较

2.4季节差异性比较：冬季RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体阳性率分别为58.54%、41.46%、24.39%高于春季25.49%、13.73%、3.92%，高于夏季17.95%、12.82%、2.56%，高于秋季27.27%、14.55%、3.64%(P<0.0083，Bonferroni校正)。见表4。

表4 季节差异性比较

3 讨 论

RRTIs病因复杂，大部分由先天原因、免疫功能低、缺乏微量元素等导致，反复发作、迁延不愈，近年来随着人们生活环境和生活习惯的改变，发病率呈上升趋势。研究显示呼吸道感染其流行和季节、区域、年龄均有一定关系，表现出不同流行特点[4]。

不同病原体导致的RRTIs感染症状以及采用的治疗方式存在一定的差异，确定致病病原体，分析病原体感染特点，针对性做好预防工作，合理选择抗菌药物，有利于患儿早日康复。MP、CP、LP感染中，MP属于细胞外寄生生物，可于无细胞培养基中进行生长繁殖，主要经呼吸道飞沫传播，MP感染人口密集地区发病率较高，病情重且病程长，易损伤脏器，可引起相关细胞出现变性甚至死亡，并可致使白介素等升高，同时由于其不具备细胞壁，青霉素和头孢类抗生素应用无效，可选择敏感抗生素较少[5]。CP作为细胞内寄生生物，具有细胞壁，CP感染发生后可致咽喉、气管、肺部等炎症。LP为细胞内寄生，属于条件致病性微生物，可致呼吸性细支气管、肺部炎症。明确感染病原学，指导抗生素的使用，对RRTIs患儿康复有重要意义。

本研究中MP病原体阳性率31.72%高于CP、LP病原体阳性率19.89%、8.06%，分析其原因在于MP是目前在可独立生活微生物中已知体积最小的，可由空气飞沫传播，与其他感染患者接触易感[6]。本研究中CP阳性率低于MP且又高于LP，人类是CP唯一宿主，其生物活性较MP差。LP可入侵机体巨噬细胞，其表现出的致病性与胞内寄生的能力有关，受机体免疫制约。本研究中反复呼吸道感染患儿MP、CP感染率高于Elhussein AM等[7]研究结果，这可能是由于地域、人群种族、生活习惯、病原体传播等的影响。

本研究中RRTIs患儿MP、CP、LP阳性率无性别差异，与韩宏枫等[8]研究结果一致。Calapodopulos NVI等[9]研究显示MP、CP、LP感染贯穿各个年龄阶段，检出峰值在学龄前期儿童。本研究也显示3～6岁患儿MP、CP、LP病原体感染阳性率高于0～2岁与7～12岁患儿，分析可能原因，一方面由于年龄较小儿童免疫系统尚未完全发育完善、成熟，为呼吸道感染发生创造了条件；另一方面，0～2岁儿童受家长精心呵护，和外界的接触较少，病原体入侵机会较少，而3～6岁患儿普遍处于幼儿园集体学习阶段，接触人员多，病原体均可通过飞沫及密切接触进行传播，感染率较高。周霞等[10]研究结果显示MP、CP、LP呈现一定的季节性特征，且以冬季阳性率较春夏明显升高。本研究中3种病原体阳性率以冬季最高，与上述研究结果一致，冬季天气寒冷，早晚温差相对较大，而相较于成年人，儿童温度敏感性高，气温骤变影响机体免疫，更易发生急性呼吸道感染，这与Tian Y等[11]研究中认为的RRTIs全年散发，且以秋冬季高发的特点一致，由此也提示家长应做好冬季小儿保暖工作。本研究的不足之处在于，样本量较少，未针对三种病原体感染，针对性分析其耐药性，后续研究过程中可扩大样本量，在分析病原体感染的同时，进一步分析其耐药性。

综上所述，在RRTIs患儿中，呼吸道感染MP、CP、LP病原体中以MP感染率最高，CP感染次之，以LP最低，但在不同年龄段患儿易感性不同，3～6岁患儿MP、CP、LP病原体感染阳性率高于0～2岁与7～12岁患儿，同时病原体流行存在季节差异，以冬季感染率最高。临床上应针对儿童RRTIs病原菌感染流行特点，制定合理预防和诊疗方案。