辛凌翔，冯 宇，徐 磊，任小侠，孙浩杰，丁家波，毛开荣，李晓宁，李俊平，王 楠

布鲁氏菌是一种革兰氏阴性的兼性胞内寄生菌，主要寄生于巨噬细胞和胚胎滋养层细胞[1]。布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患传染病，可导致多器官慢性损伤，在世界范围内广泛流行，严重威胁人类食品安全和公共卫生安全[2]。预防控制布鲁氏菌病对畜牧业生产发展和人类健康至关重要[3]，为减轻布鲁氏菌病对人类和动物种群的影响，提出并制定可预防的策略十分关键[4]。到目前为止，疫苗免疫仍是防控该病的重要手段[5]，目前主要应用的疫苗为光滑型疫苗，虽然具有良好的免疫效果，但安全性不高，并且容易产生阳性血清干扰诊断，无法区分免疫牛和自然感染牛[6]。由于粗糙型布鲁氏菌毒力较弱，且能提供对光滑型布鲁氏菌的免疫保护，不会干扰临床检测，因此，开发适宜的粗糙型疫苗具有重要的意义。本实验室前期以布鲁氏菌A19为亲本株，利用op诱导剂成功诱导出布鲁氏菌弱毒株，命名为诱导株RB71。由于wboA基因编码光滑型布鲁氏菌脂多糖O侧链合成相关的糖基转移酶，wboA基因的不完整性对布鲁氏菌光滑表型存在重要影响[7]。通过结晶紫染色鉴定、热凝集试验、脂多糖完整性鉴定试验等方法，结合测序等技术发现，诱导株缺失的基因中含有wboA基因，诱导株连续培养30代基因组未发生突变，说明诱导株RB71为具有遗传稳定性的粗糙型布鲁氏菌。为进一步验证其安全性、免疫力与毒力，本实验利用布鲁氏菌病的小鼠感染模型[8]，模拟布鲁氏菌的感染，通过分离确认感染等指标[9]，探究粗糙型布鲁氏菌诱导株RB71的生物学特性。……